⑴ 安捷伦zorbax sb c18色谱柱能用水冲么
最好不要,色谱柱这款柱子我记得是不耐受纯水的,就用乙腈或者甲醇冲吧
⑵ 安捷伦ZORBAX SB-C18能用100%纯水做流动相么
产生的原因有很多,需要一个个排除寻找原因。
1、请先检查一下进样隔垫是不是漏气了
2、打开进样器,将衬管取出,用丙酮浸泡清洗,再将衬管活化、干燥,重新装入进样器中
3、检查色谱柱前端是否平齐,是否已经沾污,若有,切除一小段,重新安装色谱柱。
4、微量器使用时是否做好了清洗和润洗?进样技术是否不够熟练?
⑶ 安捷伦液相出口阀滴的慢柱压上不去
一、压力太大,这是 HPLC 使用中的常见问题,是指压力突然升高。
解决方法:
1、一般是由于流路堵塞造成的。 在这一点上,我们应该检查部分。
2、首先断开真空泵的入口。 此时PEEK管内充满液体,使PEEK管低于溶剂瓶,看液体是否自由滴落。 如果液体不滴落或滴落缓慢,则溶剂过滤头堵塞。 处理方法:用30%的硝酸浸泡半小时,然后用超纯水冲洗干净。 如果液体自由滴落,则溶剂滤头正常,检查;
3、打开吹扫阀,使流动相不通过色谱柱。 如果压力没有明显下降,则过滤器白头被阻塞。 处理方法:取出过滤后的白头粉刺,用10%异丙醇超声半小时。 如果压力降到100PSI以下,过滤白头正常,检查;
4、拆下色谱柱的出口端。 如果压力没有下降,则色谱柱被堵塞。 处理方法:如果缓冲盐堵塞,用95%的水冲洗,直至压力正常。 如果某些强保留物质导致堵塞,请用比当前流动相更强的流动相冲洗,直到压力正常为止。如果按上述方法冲洗压力长时间没有下降,可以考虑将色谱柱的进出口反接仪器,用流动相冲洗色谱柱。 这时候如果柱压还是不下降,只能更换柱入口筛板,但一旦不操作,很容易造成柱效下降,尽量少用。 如果问题无法解决,请考虑更换色谱柱。流量设置不正确:可以重新设置正确的流量。流动相配比不正确:不同配比的流动相粘度系数不同,粘度较高的流动相对应的系统压力也较大。 如果可能,更换粘度较低的溶剂或重新设置比率。系统压力零漂:调整压力传感器的零点。
二、压力过低
解决方法:
1、通常由于系统泄漏,处理方法:找到各个接口,尤其是色谱柱两端的接口,将泄漏处拧紧。 取下色谱柱并用适当的力将其拧紧或用 PTFE 薄膜衬里。
2、空气已进入泵内,但此时压力往往不稳定、波动,甚至更严重的泵将无法吸出液体。 处理方法:打开Purge阀,以3~5ml/min的流速冲洗。 如果没有,请用注射器通过外力将排空阀处的气泡吸出。
3、无流动相流出:检查储液瓶中是否有流动相,水槽是否浸入流动相中,泵是否运转。
4、参考阀未关闭:降低流量,然后关闭参考阀。 一般在下降到0.1~0.2mL/min后关闭参比阀。
柱压问题是使用高效液相色谱过程中需要密切注意的地方,柱压的稳定与色谱图峰形的好坏、柱效、分离效果及保留时间等密切相关。所谓柱压稳定并不是指压力值稳定于一个恒定值而是指压力波动范围在345kPa 以内或在50PSI之间(在使用梯度洗脱时,柱压平稳缓慢的变化是允许的)。压力过高、过低都属于柱压问题。
⑷ 老师,我做液相的,昨晚Agilent XDB C18的柱子被我用水冲了40分钟,有什么解救方法
你好,咱们C18的柱子一般是不能走纯水的,40min水应该还不是很严重,你用纯甲醇版低流速冲色谱柱2小时,进权样一个以前走过的物质,看看柱效情况。如果不理想了,进一针二氯甲烷,再用甲醇冲。冲完后,在进样看看。
⑸ 安捷伦eclipse xdb c18色谱柱与eclipse plus c18色谱柱有什么区别
安捷伦eclipse xdb c18色谱柱与eclipse plus c18色谱柱区别:
1、裂橡XDB C18含碳量比plus c18高;
2、plus c18中填料孔径液嫌比XDB C18小;
其他方面包括使用的PH范围等等没有区别,很多时候两者可以通用。闹源手
⑹ 安捷伦高效液相色谱柱的洗柱方法
1、色谱柱清洗要看你的色谱柱是孔径是多少微米,适合的流速是多少。
2、以4.6微米的为例,先用纯水清洗2小时,再用甲醇清洗1小时。用的时候直接换上流动相。
3、高效液相色谱柱的系统由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成。储液器中的流动相被高压泵打入系统,样品溶液经进样器进入流动相,被流动相载入色谱柱(固定相) 内, 由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数, 在两相中作相对运动时, 经过反复多次的吸附- 解吸的分配过程, 各组分在移动速度上产生较大的差别, 被分离成单个组分依次从柱内流出, 通过检测器时, 样品浓度被转换成电信号传送到记录仪,数据以图谱形式打印出来。
⑺ 安捷伦高效液相色谱c18柱的洗柱方法
第一、安捷伦的色谱柱有很多种,所以要分清类型去冲洗。
第二、作为普通C18柱,尤其是硅胶基质的普通C18柱,对酸碱盐以及水,都是造成柱子的损坏的流动相构成。水不能过多(除了带AQ的纯水柱,一般各家品牌都有这款防水柱)我个人认为只要超过80%的水的流动相,都会造成C18的寿命缩短。所以做高水相的流动相分析时请注意选合适的柱子。酸对柱子的损伤是不可逆的,一定要控制PH,我个人认为PH在2以下的都要做好费柱子的准备。碱性条件是对于硅胶基质的C18的弱项,一般的硅胶基质的C18碱性条件都不太耐用,但现在也有碱性PH11的柱子,但比较贵。盐对色谱柱的影响主要是盐析造成的,而且是致命。
第三冲洗方法的问题。冲洗方法根据使用的流动相和样品的不同冲洗方法要加以区分。一般不加酸碱盐,水相也不高的情况(如甲醇水60:40),无需太过冲洗,冲洗的目的就是为了把样品的杂质冲出即可。保存流动相保存即可。酸和碱的条件下,原则上是将酸碱冲出色谱柱,保存在甲醇水即可(如60:40比例可根据要使用的流动相,只要水相不高即可)。盐的条件比较麻烦,处理不好,不仅仅色谱柱出问题而且仪器也比较麻烦。常用的就是高水相流动相甲醇-水(10:90)将盐冲出(注意压力),然后用纯甲醇冲洗(这一步是恢复高水相对色谱柱的损伤),最后保存在一般的甲醇水体系即可。
第四点,冲洗的时候注意是压力,最好是从小流速开始慢慢提升流速到压力许可的范围。冲洗的时间,准确的是流量一般色谱柱的冲洗都要达到10-20倍的柱体积。