㈠ 在做液相时0.1%磷酸缓冲盐用完了，机器显示压力不足，色谱柱走峰基线不稳，现在我应该用什么去冲洗柱子
C18柱用甲醇乙腈冲，基线平了换水冲，然后换成流动相就行
㈡ 我用0.2M的磷酸盐作为流动相，用完后用5%的乙腈冲洗，为什么会堵柱子和系统呢
真的吗？ 应该不会，要不然盐就不用走梯度了， 我用过0.1M的磷酸， 是不是0.2M太浓？
㈢ 因用磷酸盐缓冲液，液相色谱柱堵了怎么办
看你使用的是什么牌子的色谱柱悉唤蚂了，有的色谱柱是可以使用纯水冲去掉磷酸盐的。普通色谱柱是不能冲的，主要是由于水会溶解硅链樱胶，导致相坍塌。还有的色谱柱是可以反冲睁埋。但是如果使用磷酸盐堵了，久了不用，磷酸盐结晶了，会导致硅胶颗粒受破坏，影响分离效果。
一般而言，色谱柱堵了，可以用10～30的甲醇水走柱子。但是，不知道你使用的是什么牌子的柱子，以及情况严重到什么程度。
㈣ 高效液相色谱使用磷酸盐做流动相时应该注意什么
sunmaocheng(站内联系TA)是不是在跑液相开始的时候，用磷酸钾缓冲液和纯乙腈先梯度洗脱？huanghaiyu(站内联系TA)只要盐完全溶解，一般不会有问题的，如果你确实很担心，就把乙腈和盐按照你的比例混合好，然后装在一个瓶子了，再进样品，这样就没问题了，使用完清洗的时候首先要用95%的水冲洗，避免残留。痴客(站内联系TA)以前用PB缓冲液和乙腈跑过，貌似没出过什么问题，但是后来老师说盐可能会堵柱子fisherme(站内联系TA)遇到过这样的问题，前一天有人用眼做流动相跑了，系统可能没有冲干净，隔天再用乙腈系统压力就会升高，甚至堵住。这明显是少量盐溶液在系统内有过量的乙腈会洗握罩出盐结晶。 其实只要盐溶液和乙腈比例合适就不会存在析出的问题，关键是使用过后的后处理，也不能直接用100%水来冲，要有个缓冲。算不上经验，交流一下。lihuan0525(站内联系TA)最关键的就是使用后的及时冲洗。chene(站内联系TA)主要是要在用完后，耐心把柱子冲赶紧，这很重要，要不下次别人没法用的同时也耽搁你自己的使用！caozhanglei(站内联系TA)1.用前要用磷酸举皮纯调PH值，使其达到所要求的PH值。 2.要现用现配，以免时间长缓冲盐析出和滋生细菌。 3.要一次配足，多次配的前后缓冲效果不一样，影响分离效果。 4.磷酸盐流动相尽量现用现配，不要存放太久，如果晶体析出，会严重损坏柱子和泵内的密封垫圈，还有柱塞杆。 5.流动相溶剂应选择hplc的溶剂或依此为标准的溶剂。流动相使用前用0.45μm滤膜过滤、脱气，清除微粒和灰尘。 在送液泵内，为了防止杂物（固体）进入流路，装有吸滤器，但网孔径为10μm，比此更小的颗粒仍然可通过，这会导致流路和柱子堵塞和污染。为此，建议常用0.45μm滤膜过滤。流动相溶剂须经脱气，如不脱气，在溶剂混合时，或压力温度变化时容易产生大量气泡，会导致泵误动作和输液不畅，检测器产生噪声信号等。 6.流动相恢复到室温后使用。流动相温度与室温相差时，流动相在恢复到室温前，基线水平很难稳定，特正咐别是发生漂移，也容易产生气泡等现象。水与有机溶剂混合时，混合液变化大，往往会与室温相差很大，务必注意。gdmc041(站内联系TA)安装保护住，再则冲洗好柱子，一般没有什么大碍了。痴夷子皮(站内联系TA)缓冲盐会析出是因为流动相中有机相（甲醇或乙腈）比例高所致。防止盐析出就需避免高比例有机相-缓冲盐体系的出现。 正规操作1、以流动相平衡色谱柱前，先用50%~90%以上的水平衡约30min，再更换上流动相。 2、使用后，及时以梯度冲洗色谱柱。80%~90%水 0.5ml/min冲约1h，再改用80%~90%有机相冲约1h，然后以纯乙腈冲及保存。
㈤ 如果我液相色谱仪器一直用缓冲液做样应该怎么冲洗仪器
既然是洗盐，那肯定是先用纯水去长时间冲洗管路。如果您担心有污染的残留呢，建议用 甲醇：水：乙腈：异丙醇=1:1:1:1 低流速长时间冲洗系统，之后换成纯有机相就可以了。试剂一定都用色谱纯的。
㈥ 每次使用之后的高效液相色谱柱都要清洗吗，如何冲洗
这个是不是需要清洗的问题，需要看你的流动相是什么。
一般反相色谱，经常会用到缓冲盐。而盐对于色谱柱伤害比较大。如果盐堵在色谱柱里面那柱子就废了。所以需要把它冲掉。最好是每次都冲掉。
如果你的柱子流动相里面没有盐，那就瞎帆没必要冲洗了。
冲洗橘神信方法：反相柱子最好保存在纯甲醇或者纯乙腈里面，但是盐不溶于纯有机相。所以中间过渡甲醇水或者乙腈水。
究竟用什么，要看你的流动相。
比如，我用的是磷酸盐缓冲液-乙腈（70：30）的流动相，那么冲洗的时候最好选用10%-15%乙腈水，冲洗1.0ml/min，至少30min，最好40min。
如果第二天接着使用的话可以不必用纯甲醇或者纯乙腈封存了。如果第二天不用，最好用纯的有机相封上柱子，圆轮同样是1.0ml/min流速冲洗30min。
另，也不是说不清洗就会坏。我们研发有的时候为了赶项目，来不及冲洗色谱柱。柱子不会怎么样。就是寿命会短一点而已。
㈦ 液相色谱 流动相加了磷酸如何 冲洗可以使柱子使用更长久
反相柱的话，先用10%甲醇 1.0流速冲洗一个小时，再用甲醇清洗45-60分钟。
可以用甲醇-水=5:95冲洗，在用甲醇冲洗。不行的话就用异丙醇效果更好一些。能延长使用期，但与你做的东西有关。
冲洗柱子能够保持柱子良好的柱效
大比例水冲洗就可以了。只要ph不是很小，对色谱柱几乎无影响
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