新买来的超滤管如何保存

A. 超滤离心管怎么使用

蛋白浓缩和换Buffer通常使用的超滤管，常用Millipore的Amicon-Ultra-15超滤管（MWCO10kD）。也有其它型号的、不同体积大小和超滤管可选，视目的蛋白的分子量与浓缩前体积、浓缩目标体积而定。可重复使用。
1、选择合适的超滤管，主要考虑MWCO和浓缩体积，通常应截留分子量不应大于目的蛋白分子量的1/3，比如目的蛋白分子量为35kDa，就可以选择10kDa截留分子量的超滤管。若目的蛋白分子量为10kD左右，则可以用截留分子量3kD的超滤管。
2、新买来的超滤是干燥的，使用前加入MilliQ水，水量完全过膜，冰浴或冰箱里预冷几分钟。然后将水倒出，即可加入蛋白液，加入的多少，以不超过管顶的白线为准。操作要轻，加入蛋白液前，超滤管需要插在冰上预冷。
3、平衡。质量和重心二者都要达到平衡。注意转速和加速度不可太快，否则直接损坏超滤膜。开始离心超滤（离心机预冷至4度）。膜与转轴的方向根据说明书调整（角转离心机的情况是膜与轴垂直）。在实际使用中，一般转速开的比说明书里的要低，这样可以延长离心管的使用寿命。
4、当浓缩到剩下1ml时，【取50ul国产Bradford溶液，加入10ul流穿，看有没变蓝色，以此判断超滤管是否漏掉蛋白。如果管漏了，将上层和流穿重新倒入新管中开始超滤。要精确判断是否漏管，用5mg/ml的BSA离心10min，再取流穿，跑蛋白胶或Bradford粗测】，继续加入剩下的蛋白液浓缩（在冰上操作，防止蛋白受热），直到所有浓缩液都加完为止。离心过程中注意是否发生蛋白沉淀，导致堵管。若发生沉淀，要确定沉淀的具体原因，是蛋白浓度过高还是Buffer不合适；前者可用多根超滤管同时超滤，降低浓度的办法解决，后者的方法是换不同的Buffer，直到蛋白不发生沉淀为止。
5、前面几步用以浓缩蛋白，如果要换Buffer，在总蛋白液浓缩至1ml左右的时候，轻轻加入新的Buffer（经0.22um超滤膜超滤），再浓缩至1ml左右，连续三次，最后一次的浓缩终体积根据需要的蛋白浓度而定，一般不多于500ul，也有浓缩至200ul以内的情况。按照每次至少10倍左右的体积浓缩算，三次达到1000倍以上，基本上可以达到换buffer的目的。
6、取出最终蛋白浓缩液的操作在冰上操作，用黄枪头（200ul）取，轻轻顺着边缘插入枪头，轻轻吹打、混匀蛋白液，注意不要碰到超滤膜，然后吸取浓缩液，每次吸接近200ul，直到吸完。管底剩下的最后一点浓缩液不必吸取，否则难度太大，有可能损坏超滤膜。最后加入MilliQ水到超滤管中，没过超滤膜，防止膜失水变干。
7、以下是处理超滤管，重复利用超滤管的步骤。
8、倒出超滤管里的水，用milliQ水轻轻润洗几次，【若管底有可见的蛋白沉淀，可以先加入水，然后用枪头吹打，注意不要碰到膜，吹打至沉淀悬起，然后倒掉，不可用自来水猛冲】然后加入0.2M的NaOH溶液，室温放置20min，期间平衡超滤管。再离心10min。倒出残留的NaOH溶液，将管芯浸入MilliQ水的烧杯(1或2L)中,放置几个小时,再换新的水,放置几个小时，不断稀释NaOH浓度。50ml管和盖子用自来水洗，内壁再用MilliQ水洗干净。
9、取出浸没的管芯，加至接近满的MilliQ水，50ml管也加满MilliQ水，将管芯慢慢放入50ml
离心管，排出部分水，然后盖上盖子，放4度保存，直到下次使用。一般来说，按照上述步骤和注意事项，每根管用三四年不会坏。

B. 超滤离心管怎么使用

蛋白浓缩和换Buffer通常使用的超滤管，常用Millipore的Amicon-Ultra-15超滤管（MWCO10kD）。也有其它型号的、不同体积大小和MWCO超滤管可选，视目的蛋白的分子量与浓缩前体积、浓缩目标体积而定。可重复使用。
1、选择合适的超滤管，主要考虑MWCO和浓缩体积，通常应截留分子量不应大于目的蛋白分子量的1/3，比如目的蛋白分子量为35kDa，就可以选择10kDa截留分子量的超滤管。若目的蛋白分子量为10kD左右，则可以用截留分子量3kD的超滤管。
2、新买来的超滤是干燥的，使用前加入MilliQ水，水量完全过膜，冰浴或冰箱里预冷几分钟。然后将水倒出，即可加入蛋白液，加入的多少，以不超过管顶的白线为准。操作要轻，加入蛋白液前，超滤管需要插在冰上预冷。
3、平衡。质量和重心二者都要达到平衡。注意转速和加速度不可太快，否则直接损坏超滤膜。开始离心超滤（离心机预冷至4度）。膜与转轴的方向根据说明书调整（角转离心机的情况是膜与轴垂直）。在实际使用中，一般转速开的比说明书里的要低，这样可以延长离心管的使用寿命。
4、当浓缩到剩下1ml时，【取50ul国产Bradford溶液，加入10ul流穿，看有没变蓝色，以此判断超滤管是否漏掉蛋白。如果管漏了，将上层和流穿重新倒入新管中开始超滤。要精确判断是否漏管，用5mg/ml的BSA离心10min，再取流穿，跑蛋白胶或Bradford粗测】，继续加入剩下的蛋白液浓缩（在冰上操作，防止蛋白受热），直到所有浓缩液都加完为止。离心过程中注意是否发生蛋白沉淀，导致堵管。若发生沉淀，要确定沉淀的具体原因，是蛋白浓度过高还是Buffer不合适；前者可用多根超滤管同时超滤，降低浓度的办法解决，后者的方法是换不同的Buffer，直到蛋白不发生沉淀为止。
5、前面几步用以浓缩蛋白，如果要换Buffer，在总蛋白液浓缩至1ml左右的时候，轻轻加入新的Buffer（经0.22um超滤膜超滤），再浓缩至1ml左右，连续三次，最后一次的浓缩终体积根据需要的蛋白浓度而定，一般不多于500ul，也有浓缩至200ul以内的情况。按照每次至少10倍左右的体积浓缩算，三次达到1000倍以上，基本上可以达到换buffer的目的。
6、取出最终蛋白浓缩液的操作在冰上操作，用黄枪头（200ul）取，轻轻顺着边缘插入枪头，轻轻吹打、混匀蛋白液，注意不要碰到超滤膜，然后吸取浓缩液，每次吸接近200ul，直到吸完。管底剩下的最后一点浓缩液不必吸取，否则难度太大，有可能损坏超滤膜。最后加入MilliQ水到超滤管中，没过超滤膜，防止膜失水变干。
7、以下是处理超滤管，重复利用超滤管的步骤。
8、倒出超滤管里的水，用milliQ水轻轻润洗几次，【若管底有可见的蛋白沉淀，可以先加入水，然后用枪头吹打，注意不要碰到膜，吹打至沉淀悬起，然后倒掉，不可用自来水猛冲】然后加入0.2M的NaOH溶液，室温放置20min，期间平衡超滤管。再离心10min。倒出残留的NaOH溶液，将管芯浸入MilliQ水的烧杯(1或2L)中,放置几个小时,再换新的水,放置几个小时，不断稀释NaOH浓度。50ml管和盖子用自来水洗，内壁再用MilliQ水洗干净。
9、取出浸没的管芯，加至接近满的MilliQ水，50ml管也加满MilliQ水，将管芯慢慢放入50ml
离心管，排出部分水，然后盖上盖子，放4度保存，直到下次使用。一般来说，按照上述步骤和注意事项，每根管用三四年不会坏。

C. 超滤离心管可以灭菌吗

1、可以用70%的酒精消毒
2、如果是高温高压灭菌,要注意灭完菌后,管里面的超滤膜是处于湿润的状态,所以需要立即使用,因为膜湿润后就不能干

D. 超滤膜多久更换一次 如何判断超滤膜寿命到期

超滤膜是饮用水处理中应用广泛的高分子分离膜，能够有效过滤悬浮废物、胶状体、藻类、病菌以及其他水生病毒。超滤膜使用寿命长，不需要经常更换滤芯，减少消费。一般情况下，如果进水水质达标，超滤膜3-5年的使用年限是没有问题的。但是具体能用多久，还需要根据实际情况确定。

超滤膜没有一个固定的更换时间，需要根据用户使用的膜元件质量、进水条件、使用是否规范来进行判断。通常超滤膜在使用3-5年就需要进行更换，如果没有按照使用说明进行使用，可能用1年就需要更换，而有的对超滤膜维护、保养非常好的甚至能够使用5年以上，其实能够按照膜元件的使用说明进行使用，满足膜元件的使用要求，基本上都能够使用3年以上，如果出现超滤膜更换频繁的情况，应检查自己的设备是否满足使用要求，如果能够满足那可能是超滤膜质量问题。

为了能够有效的延长超滤膜的使用寿命，就要做好日常维护工作，比如定期的清洗，如果没有清洗，就会影响超滤膜的使用性能与寿命，定时的清洗也能保持超滤膜具有良好的通透性，清洗的方法一般会根据超滤膜的性质与处理料液的性质来决定，不过大多数情况下是用清水来清洗，然后依据情况不同采用不同的化学制剂来清洗。

另外，超滤膜使用完之后放置于保护液中从保存起来，目的是防止超滤膜脱水后产生收缩，使膜结构遭到破坏，透水量下降。

超滤膜的使用寿命主要取决于进水水质。一般情况下，如果进水水质达标，3-5年的使用年限是没有问题的，但并不意味着可以达到使用年限，或者有可能超过使用年限。它能用多久，还需要根据实际情况确定。

1、产水量变小，在相同的操作条件下，超滤膜产水量比原膜少很多，可能是超滤膜堵塞。此时，可对超滤膜进行清洗。如果堵塞不严重，可通过清洗回收一定量的水。但是，如果清洗后情况不理想，则超滤膜的使用寿命已过，需要更换超滤膜。当超滤膜接近使用寿命时，应更换超滤膜，以避免出水交叉污染。

2、排水质量差，超滤膜过滤的原水中杂质和细菌过多，造成严重污染和水质恶化。超滤膜中杂质和细菌的长期积累也导致自来水的二次污染。因此，如果水质恶化，应考虑采用新的超滤膜。

3、按时间计算超滤膜使用寿命的80%，我们都知道理想和现实之间存在差距。事实上，在水污染严重的地方，超滤膜不能长时间使用。如果水质良好，使用寿命会延长。但不建议等待超滤膜过期，一般当使用寿命达到理想寿命的80%左右时，应更换新膜。

将超滤膜（滤芯）从超滤净水设备上拆卸，然后再换上新的超滤膜。具体的更换方法如下：

1、拆卸超滤膜

（1）先将压力容器上的进出水端、浓水端的管道卸掉，把与之连接的配件也拿掉。

（2）卸下压力容器两端的端盖。

（3）推动超滤膜膜元件，方向是进水端至浓水端。

（4）当超滤膜膜元件从浓水端出现后，慢慢将其取出来。

（5）成功将超滤膜膜元件从浓水端取出后，把该支膜的和别的膜元件的连相接部件取下。

（6）如果只需要取出一支即视为拆卸结束，需要拆卸多支请反复进行以上操作，直到将需要更换的超滤膜都拆下来。

2、更换超滤膜

（1）将密封包装的超滤膜膜组件打开并拿出。

（2）将超滤膜膜组件进行清洗，去除保护液和表面的污垢。

（3）将超滤膜膜组件放到架子上。

（4）保证超滤系统的管路没有杂质和污垢，把超滤膜膜组件连上管路。

（5）通水测试更换效果。

E. 大家用过的超滤管怎么保存

超滤膜组件的维护（四川禹华环保）要点：
一、短期停机的情况下：停机2-3天以内，请内在膜组件内部充水容的状态下停机；如果达一周左右时，请注入浓度为50mg/L的次氯酸钠溶液；
二、 长期停机的情况下：膜组件要先经过次氯酸钠药洗后，再注入浓度为1.5%的亚硫酸氢钠溶液。
三、置于阴凉处，不能脱水存放；低于零度时要加甘油防冻；

F. 如何用蛋白浓缩管

选择合适的超滤管，主要考虑MWCO和浓缩体积，最常见的是Ultra-15（10kD）。

通常应截留分子量不应大于目的蛋白分子量的1/3，比如目的蛋白分子量为35kDa，就可以选择10kDa截留分子量的超滤管。若目的蛋白分子量为10kD左右，则可以用截留分子量3kD的超滤管。认真阅读使用说明书，注意超滤膜对各种化学物质的耐受程度有所不同。

新买来的超滤是干燥的，使用前加入MilliQ水，水量完全过膜，冰浴或冰箱里预冷几分钟。然后将水倒出，即可加入蛋白液，加入的多少，以不超过管顶的白线为准。操作要轻，加入蛋白液前，超滤管需要插在冰上预冷。

(6)新买来的超滤管如何保存扩展阅读：

超滤浓缩离心管，最新推出专利产品Hydrosart膜2K型，具有极低的蛋白吸附特性，高流速、高通量，是免疫球蛋白浓缩和脱盐的理想用膜。

备有四种材质的超滤膜：聚醚砜、三醋酸纤维素、再生纤维素和Hydrosart，可根据不同要求灵活选用；两种回收浓缩液的方法：既可用吸管直接吸取并回收，又可将离心管放入离心机反甩，将浓缩液甩入回收帽中，加盖保存。这两种方法都可使浓缩液达到近乎完全回收；

G. 净水器超滤膜能使用多长时间

净水器超滤膜的使用时间是和水质量有关系，合理的使用能够延长净水器超滤膜的使专用时间，一般清洗周属期在2-3月，更换周期3-5年。
超滤膜过滤精度为0.01微米——0.1微米之间，他主要是用于滤除水中的细菌，经过过滤之后就是一般的矿物质水，一般一到两年更换一次。

H. 中空纤维超滤膜的使用寿命

超滤膜使用年限一般是多少?超滤膜寿命保质3年，正常维护寿命能到5年甚至8年膜的，使用寿命与膜在使用过程中的清洗维护有很大的关系，如果在日常生产中清洗维护得好的话，膜可以一直保持很好的通量，从而提高了生产效率，且使用寿命自然也会有所延长，减短膜更换的频率。