阳离子交换柱的维护

『壹』 磺酸基阳离子交换键合硅胶色谱柱，怎样维护保养及活化

在使用系统之前，首要任务是检查色谱柱是否受到微生物污染，否则可能会导致柱子堵塞，使得柱压升高到无法接受的水平。首先，不连接检测器，正向安装色谱柱，使用纯甲醇以0.6ml/min流速冲洗大约10倍柱体积。接着，连接检测器，继续使用纯甲醇以相同流速冲洗约20倍柱体积。随后，改用去离子水以相同流速冲洗约20倍柱体积。

为确保色谱柱的最佳性能，建议连接保护柱（通常由制造商提供），然后用选定的洗脱液以0.6ml/min流速平衡柱子至少1小时。在用分析洗脱液进行平衡前，如果洗脱液中含有缓冲盐，应先使用不含缓冲盐的同比例洗脱液过渡，冲洗约10倍柱体积，以避免缓冲盐在分析柱内析出。

在进行洗脱液选择时，需注意阳离子交换柱多使用柠檬酸或酒石酸缓冲液（或其混合溶液）、邻苯二甲酸缓冲液，pH范围从2.5到6.5；阴离子交换柱则多使用磷酸缓冲液、硝酸铵溶液（1mMol/L），邻苯二甲酸缓冲液，pH范围同样从2.5到6.5。绝对禁止使用水杨酸缓冲液，因为水杨酸的分解产物会改变固定相的性质。洗脱液在使用前必须通过0.45um滤膜过滤并彻底脱气，以避免检测和泵送问题。

为了提高分析的稳定性，建议在室温条件下使用色谱柱，如果需要，可以将柱温设置为高于室温5～10℃。避免在40℃以上使用，以防损坏色谱柱。

在使用过程中，切勿超过色谱柱的耐受最高压力。调整流速时，应采取小的间隔变化以避免柱床扰动。更换柱子时，务必先将流量降至0，等待洗脱液完全流出柱子，压力变化到0（约2min）后再进行更换。

防止将来自流动相或样品中的疏水性或与流动相极性差别很大的化合物进入色谱柱，尤其要避免导入颗粒杂质，以防止操作压力增高，污染物难以或不能去除。

分析完毕后，采用与C18柱类似的净化程序，首先用去离子水以0.6ml/min流速冲洗约20倍柱体积，然后用甲醇以相同流速冲洗约10倍柱体积，确保纯甲醇饱和后密封保存。

对于长时间保存后的重新使用，重复上述步骤即可。

『贰』 如何进行阳离子交换柱层析的洗脱

阳离子交换柱层析的洗脱顺序包括：酸性洗脱、碱性洗脱、盐洗脱、温度洗脱和溶剂梯度洗脱。

5、溶剂梯度洗脱：

溶剂梯度洗脱是一种常用的层析技术，通过改变洗脱液的极性或疏水性来改变生物分子与树脂的结合状态，适用于不同性质的生物分子。在溶剂梯度洗脱中，通常需要选择适当的溶剂组合和梯度条件，以实现生物分子与树脂的有效解离，并保证分离和纯化的效果。

『叁』 用阳离子交换柱分离氨基酸，在pH=2.0时，碱性氨基酸和酸性氨基酸相比，哪一个先被洗脱为什么

【答案】：酸性氨基酸先被洗脱。
阳离子交换柱层析是一种用阳离子交换树脂作支持剂的层析法。阳离子交换树脂上含有酸性或碱性基团可以解离出氢离子，与溶液中的阳离子发生交换。在pH=2.0时，氨基酸的羧基不发生解离，氨基发生质子化，因此氨基酸主要以阳离子形式存在。碱性氨基酸带2个氨基，1个羧基；酸性氨基酸带2个羧基，1个氨基。发生质子化后，碱性氨基酸带正电荷明显多于酸性氨基酸。氨基酸与树脂的亲和力主要取决于他们之间的静电吸引，因此碱性氨基酸与树脂上的阳离子发生交换而被“挂”在树脂上的机会多，结合力强，相反，酸性氨基酸结合力弱。因此用缓冲液洗脱氨基酸时，酸性氨基酸先被洗脱。

『肆』 阳离子交换树脂的注意事项

阳离子交换树脂使用注意事项：

一般阳离子交换树脂都是氢离子型，这样的话就用1～2%的稀硫酸浸泡，时间12小时或以上，再用水洗至中性，即可使用。不能用自来水洗，要有去离子水，树脂的ph一般不测定，测的是通过树脂流出来的溶液的ph。

由于在合成树脂过程中，树脂表面及空隙中混掺有低分子和一些无机杂质(如铜、铁等)、高分子单体物质，以及致孔剂等，因此树脂在正式投入运行之前，必须将这些杂质除去，否则在使用过程中会以各种方式污染树脂。特别应当指出，在含铬废水中，因铬酸是一种氧化剂，如树脂中有铜、铁，便有催化氧化作用，从而加快树脂氧化。预处理方法如下：1、热水洗涤准备使用的新树脂先用热水反复清洗。阳树脂可用70～80℃的热水，阴树脂(特别是强碱阴树脂)的耐热性较差，可用50～60℃的热水。开始浸洗时，每隔15分钟左右换水一次，浸洗时要不是搅拌，换水4～5次后，可隔30分钟左右换水一次，总共换水7～8次，浸泡至洗涤水不带褐色，泡沫很少时为止。

树脂的保养树脂在使用过程中应防止悬浮物、有机物及油类等的污染，同时又要防止某些废水对树脂的剧烈氧化作用。因此，酸性氧化废水进入阴树脂前应去除重金属离子，以防止重金属对树脂的催化作用。每次设备运行完毕后应将交换柱中废水排回废水池，代之以自来水或净化水浸泡。树脂饱和后要及时再生，再生后不宜长期在原液中浸泡停放，应及时淋洗干净。

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『伍』 一篇看懂液相色谱柱的分类、选择及维护！

液相色谱柱的分类及选择与维护是进行高效液相色谱分析的关键。

一、液相色谱柱的分类

按照色谱固定相基质，液相色谱柱可以分为以下几类：

1. 硅胶基质

1.1 反相色谱柱：使用以硅胶为基础，表面键合有弱极性官能团的键合相。流动相通常为水、缓冲液与甲醇、已腈等混合物。样品流出顺序为极性强的先被冲出，极性弱的后被冲出。

1.2 正相色谱：使用硅胶作为固定相，其他具有极性官能团的键合相填料。流动相极性相对较低。分离顺序依据样品中各组分极性大小。

1.3 离子交换色谱柱：使用磺化交联强阴/阳离子键合硅胶色谱柱，如强阴离子色谱柱(SAX)和强阳离子交换色谱柱(SCX)。

2. 聚合物基质

聚合物调料如聚苯乙烯-二乙烯基苯或聚甲基丙酸酯等，优点是在PH值为1～14均可使用，对大分子物质分离有效。

3. 其他无机填料

如石墨化碳、氧化铝等，具有特殊性质，适用于特定用途。

二、色谱柱的选择

液相色谱柱的选择主要依据分析物的性质，如硅胶基质填料用于小分子量物质，聚合物填料用于大分子物质。

三、色谱柱的维护

1. 色谱柱的平衡：使用甲醇或乙腈冲洗色谱柱，确保分析样品流动相与冲洗溶剂互溶。

2. 色谱柱的再生：长期使用后柱效下降，可进行再生处理。

3. 色谱柱的维护：使用预柱保护分析柱，避免流动相组成及极性的剧烈变化，使用前经脱气和过滤处理。

『陆』 阳离子交换树脂怎样预处理

先要已知该离子交换树脂是用作何用,如水处理的钠床,氢床等方面,另一个是该阳树脂是钠型,还是氢型出厂,因以上问题,其预处理方式也不同…。华粼水质