强阴离子交换硅胶色谱柱

⑴ 色谱硅胶的孔径及用途

Kromasil柱

Kromasil是瑞典AKZO NOBEL公司生产的高性能硅胶基质液相色谱柱填料品牌。
Kromasil是一种高纯度球形硅胶填料，金属杂质含量极低，减少了有些金属螯合物在硅胶基质上的络合作用。
Kromasil硅胶的表面由独特的硅羟基基团组成，硅烷的覆盖率高，在较高的或较低的PH条件下不易水解和分解，可在PH=1.5～9.5条件下稳定使用。
Kromasil 的含碳量高，表面极性小，分离效能高。通常在分析碱性样品时，与酸性硅羟基反应会产生不利的拖尾现象，而Kromasil化学纯度极高，它的表面由分布独特、相对中生的硅羟基基团组成，并使不需要的酸性硅羟基基团减少到最低，从而使之具有良好的峰对称性种较高的柱效。

Hypersil BDS

Hypersil BDS 类色谱填料是极好的反相柱填料，有很好的耐久性及重现性，应用范

围极其广泛。Hypersil BDS 硅胶担体键合前经过专门的碱钝化处理，将残余硅羟基降至极

限，这种改善的表面，使得键合后的硅胶具有很高的配位度，大大降低了硅羟基与分析物之

间的相互作用，改善了色谱峰形，降低了色谱峰的拖尾程度，提高了峰的对称性。

Hypersil BDS填料的特征：

l 对碱性化合物有更好的峰型。

l 更长的寿命。

l 更好的稳定性。

l 同碱性化合物一样，酸性和中性化合物也有非常优异的峰值--真正的通用柱填料。

紧管常规填料色谱柱具有优异的选择性和较长的色谱柱寿命。且对于简单的两元流动相(如

甲醇/水)，当样品为酸性、中性和弱碱性化合物时均可获得较佳的峰不对称度。但当分析药

物等样品中的强极性含氮的化合物时，样品峰型就极查，拖尾严重，并导致定量分析精度下

降，时常会出现一些小峰埋没于前一拖尾峰的尾巴中，造成该现象的原因是固定相上尚有残

余的硅羟基。尽管很多厂家对硅胶表面作了第二次反应，即所谓的“封尾”，以减小残余硅

羟基的作用，但往往都不能完全消除残余的硅羟基的影响。Hypersil公司开发的将残余的硅

羟基降至极限的Hypersil BDS(Base Deactived Silica,碱纯化硅胶)系列产品，并用现代衍生反应技术生产出特别适用于碱性化合物的真正均一反相填料。

Hypersil 300A 填料是基于5um和10um,
孔径为300A 的硅胶为基质的HPLC填料适合越来越多的生物大分子分离与分析的需要,现可提供C18 C8 C4 的填料

*Hypersil 300A C18 适合亲水性强的分子量大于5000的小肽酶的水解片断及各种天然和合成小肽的分析
*Hypersil 300A C4 适合疏水性的小肽及大分子的多肽分析
*Hypersil 300A C8 选择性介于C18和C4之间适用于亲水性及弱疏水性的小肽和蛋白质酶的水解片断及各种天然和合成小肽的分析。

Hypersil ODS填料

Hypersil 填料是基于粒度为3um 、5um和10um, 孔径为120A的硅胶为基质的HPLC填料其生产过程的质量控制标准非常严格全世界数千个实验室使用Hypersil色谱柱已长达20多年很多应用实例可以从多种文献及著名杂志上查到。大量的试验测试已经证实Hypersil ODS2填料是替代Waters Spherisorb ODS2的最佳填料无论是在酸性还是碱性样品的分析上选择性与峰型几乎与其保持一致。

LiChrosorb填料常规色谱分析柱

产品介绍： LiChrosorb是德国MERCH公司出品的一种多孔无定型硅胶基质填料品牌，在过去的25年中非常成功地应用于液相色谱分离。
产品特点：LiChrosorb RP-8和RP-18适合于碱性样品的色谱分析。

技术参数：

LiChrosorb填料参数

Spherisorb 填料
Waters公司出品的Spherisorb填料有3um、5um和10um, 孔径为80A 硅胶为基质的HPLC填料其高的分离性能已得到广大色谱用户的认可

Spherisorb填料有C18 C8 CN C6H5和NH2等固定相C18有经封尾处理的ODS-2和未经封尾处理的ODS-1 两种ODS-2 的碳含量为11.5%ODS-1的碳含量为5.75%

Spherisorb SAX强阴离子交换柱和SpherisorbSCX强阳离子交换柱分别适合于对小分子的酸性和碱性化合物的分析比
通常的正相和反相色谱柱有更佳的分离性能

BETASIL 填料
ThermoHypersil-Keystone公司非常有特点的新型通用填料装填的色谱柱-BETASIL 为了达到原装柱的水平公司采用全新结构柱管装填以满足您更高分析要求的需要

*高纯硅胶彻底减去活处理提供完美的峰型
*高比表面积高覆盖键合相
*真正的高效柱理论塔板数较高
*较强的保留,反相色谱应用中适宜强极性化合物的分离

⑵ 色谱柱的填料

常见的分配柱填料：碳十八柱 （ODS/C18)、碳八柱（MOS/C8）、碳六柱（Hexyl/C6）、
碳四柱（Butyl/C4）、碳一柱（Methyl/C1）、阴离子交换柱（SAX)、
阳离子交换柱（SCX）、苯基柱（Phenyl）、氨基柱（Amino/NH2）、
氰基柱（Cyano/CN/Nitrile）
常见的吸附柱填料：硅胶柱

⑶ 怎样查找usp药典上使用的色谱柱

根据下面色谱柱系列的编号，就可以在USP药典上查到需要的色谱柱：
L1：十八烷基键合多孔硅胶或无机氧化物微粒固定相，简称ODS柱 L2：30～50mm表面多孔薄壳型键合十八烷基固定相，简称C18柱 L3：多孔硅胶微粒，即一般的硅胶柱 L4：30～50mm表面多孔薄壳型硅胶柱 L5：30～50mm表面多孔薄壳型氧化铝柱 L6：30～50mm实心微球表面包覆磺化碳氟聚合物，强阳离子交换柱 L7：全多孔硅胶微粒键合C8官能团固定相，简称C8柱 L8：全多孔硅胶微粒键合非交联NH2固定相，简称NH2柱 L9：强酸性阳离子交换基团键合全多孔不规则形硅胶固定相，即SCX柱 L10：多孔硅胶微球键合氰基固定相（CN），简称CN柱 L11：键合苯基多孔硅胶微球固定相，简称苯基柱 L12：无孔微球键合季胺功能团的强阴离子交换柱 L13：三乙基硅烷化学键合全多孔硅胶微球固定相（C1），简称C1柱 L14：10mm硅胶化学键合强碱性季铵盐阴离子交换固定相，简称SAX柱 L15：已基硅烷化学键合全多孔硅胶微球固定相，简称C6柱 L16：二甲基硅烷化学键合全多孔硅胶微粒固定相 C2柱 L17：氢型磺化交联苯乙烯-二乙烯基苯共聚物,强阳离子交换柱 L18：3～10mm全多孔硅胶化学键合胺基（NH2）和氰基（CN）柱 L19：钙型磺化交联苯乙烯－二乙烯基苯共聚物，强阳离子交换柱 L20：二羟基丙烷基化学键合多孔硅胶微球固定相（Diol），简称二醇基柱 L21：刚性苯乙烯－二乙烯基苯共聚物微球填料柱L22：带有磺酸基团的多孔苯乙烯阳离子交换柱 L23：带有季胺基团的聚甲基丙烯酸甲酯或聚丙烯酸酯多孔离子交换柱 L24：表面含有大量羟基的半刚性聚乙烯醇亲水凝胶柱 L25：聚甲基丙烯酸酯树脂交联羟基醚（表面含有残余羧基功能团）树脂。能分离分子量100～5000MW范围的水溶性中性、阳离子型及阴离子型聚合物（用聚氧乙烯测定）的固定相 L26：丁基硅烷化学键合全多孔硅胶微球固定相，即C4柱 L27：30～50mm的全多孔硅胶微粒 L28：多功能载体，100Å的高纯硅胶加以氨基键合以及C8反相键合的官能团 L29:氧化铝,反相键合,含碳量低,氧化铝基聚丁二稀小球,5mm，孔径80Å L30:全多孔硅胶键合乙基硅烷固定相

太多了，没有一一列举了～～

⑷ 磺酸基阳离子交换键合硅胶色谱柱，怎样维护保养及活化

在使用系统之前，首要任务是检查色谱柱是否受到微生物污染，否则可能会导致柱子堵塞，使得柱压升高到无法接受的水平。首先，不连接检测器，正向安装色谱柱，使用纯甲醇以0.6ml/min流速冲洗大约10倍柱体积。接着，连接检测器，继续使用纯甲醇以相同流速冲洗约20倍柱体积。随后，改用去离子水以相同流速冲洗约20倍柱体积。

为确保色谱柱的最佳性能，建议连接保护柱（通常由制造商提供），然后用选定的洗脱液以0.6ml/min流速平衡柱子至少1小时。在用分析洗脱液进行平衡前，如果洗脱液中含有缓冲盐，应先使用不含缓冲盐的同比例洗脱液过渡，冲洗约10倍柱体积，以避免缓冲盐在分析柱内析出。

在进行洗脱液选择时，需注意阳离子交换柱多使用柠檬酸或酒石酸缓冲液（或其混合溶液）、邻苯二甲酸缓冲液，pH范围从2.5到6.5；阴离子交换柱则多使用磷酸缓冲液、硝酸铵溶液（1mMol/L），邻苯二甲酸缓冲液，pH范围同样从2.5到6.5。绝对禁止使用水杨酸缓冲液，因为水杨酸的分解产物会改变固定相的性质。洗脱液在使用前必须通过0.45um滤膜过滤并彻底脱气，以避免检测和泵送问题。

为了提高分析的稳定性，建议在室温条件下使用色谱柱，如果需要，可以将柱温设置为高于室温5～10℃。避免在40℃以上使用，以防损坏色谱柱。

在使用过程中，切勿超过色谱柱的耐受最高压力。调整流速时，应采取小的间隔变化以避免柱床扰动。更换柱子时，务必先将流量降至0，等待洗脱液完全流出柱子，压力变化到0（约2min）后再进行更换。

防止将来自流动相或样品中的疏水性或与流动相极性差别很大的化合物进入色谱柱，尤其要避免导入颗粒杂质，以防止操作压力增高，污染物难以或不能去除。

分析完毕后，采用与C18柱类似的净化程序，首先用去离子水以0.6ml/min流速冲洗约20倍柱体积，然后用甲醇以相同流速冲洗约10倍柱体积，确保纯甲醇饱和后密封保存。

对于长时间保存后的重新使用，重复上述步骤即可。

⑸ 一篇看懂液相色谱柱的分类、选择及维护！

液相色谱柱的分类及选择与维护是进行高效液相色谱分析的关键。

一、液相色谱柱的分类

按照色谱固定相基质，液相色谱柱可以分为以下几类：

1. 硅胶基质

1.1 反相色谱柱：使用以硅胶为基础，表面键合有弱极性官能团的键合相。流动相通常为水、缓冲液与甲醇、已腈等混合物。样品流出顺序为极性强的先被冲出，极性弱的后被冲出。

1.2 正相色谱：使用硅胶作为固定相，其他具有极性官能团的键合相填料。流动相极性相对较低。分离顺序依据样品中各组分极性大小。

1.3 离子交换色谱柱：使用磺化交联强阴/阳离子键合硅胶色谱柱，如强阴离子色谱柱(SAX)和强阳离子交换色谱柱(SCX)。

2. 聚合物基质

聚合物调料如聚苯乙烯-二乙烯基苯或聚甲基丙酸酯等，优点是在PH值为1～14均可使用，对大分子物质分离有效。

3. 其他无机填料

如石墨化碳、氧化铝等，具有特殊性质，适用于特定用途。

二、色谱柱的选择

液相色谱柱的选择主要依据分析物的性质，如硅胶基质填料用于小分子量物质，聚合物填料用于大分子物质。

三、色谱柱的维护

1. 色谱柱的平衡：使用甲醇或乙腈冲洗色谱柱，确保分析样品流动相与冲洗溶剂互溶。

2. 色谱柱的再生：长期使用后柱效下降，可进行再生处理。

3. 色谱柱的维护：使用预柱保护分析柱，避免流动相组成及极性的剧烈变化，使用前经脱气和过滤处理。

⑹ 阴离子交换柱流出水的电导率为什么远小于阳离子交换柱流出水

阴离子交换柱和阳悉局皮离子交换柱都是常见的离子交换色谱柱，但是它们的工作原理和流出水的离子种类不同，因此流出水的电导率也不同。
在阴离子交换柱中，固定相通常是带有正电荷的树脂，它可以吸附带有负电荷的阴离子。当样品溶液通过柱子时，阴离子会被树脂吸附，而流出水中的离子主要是未被吸附的阳离子。因此，阴离子交换柱流出水的电导率远小于阳离子交换柱流出水。此外，阴离子交换柱的流出水通常需要用碱性溶液进行洗脱，这些碱性离子也会降低流出水的电导率。
相比之下睁差，阳离子交换柱中的固定相是带有负电荷的树脂，它可以吸附腊郑带有正电荷的阳离子。当样品溶液通过柱子时，阳离子会被树脂吸附，而流出水中的离子主要是未被吸附的阴离子。因此，阳离子交换柱流出水的电导率通常比阴离子交换柱高。
总之，阴离子交换柱和阳离子交换柱的工作原理不同，导致它们流出水的离子种类和电导率也不同。