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用离子交换色谱时阴离子出峰顺序

发布时间:2025-02-12 20:49:43

⑴ 各类色谱洗脱规律,简明扼要

HPLC高效液相色谱按 固定相与流动相的极性相对大小分为正相和反相色谱
正相版中流动相极性小于固定相权,极性组分被滞留,出峰顺序:非极性->弱极性->极性
反相色谱流动相极性大于固定相,固定相常用C8-C18,非极性组分最后流出,出峰顺序:极性->弱极性->非极性,反相色谱因其与组分无强烈作用,组分不会长时间滞留污染柱子,且反相色谱用水做底溶剂,掺入其他弱极性、非极性溶剂如乙腈等有机物改变流动相极性达到分离目的,水的紫外吸收遏制波长低,不会干扰检测,且水易得便宜
还有要注意的点:大量物质中分离杂质应先让含量小的杂质先流出,如果让量大的组分先流出会拖尾导致杂质分离不纯
GC气相色谱没什么说的,原理类似,主要就是保留时间、峰高峰宽、校正因子
毛细管电泳,一般毛细管壁修饰成带负电,电渗流速率大于电泳速率,正负离子、中性分子均向阴极移动,检出顺序:正离子->中性分子->负离子

⑵ 离子色谱法测定水中阴离子

离子色谱是色谱法的一个分支,离子色谱法是利用被分离物质在离子交换树脂上交换能力的不同,从而连续对共存多种阴离子或阳离子进行分离、定性和定量的方法。

二、注意事项:

1、查淋洗液与分离柱是否一 致:是否过期,是否满足当天的需要,废液桶的容量。

2、接通气路并调节气压至操作压力:压缩气瓶的输出压力、淋洗液瓶的压力。

3、排除气泡:根据实际情况进行,淋洗液加压后旋松废液阀,开泵冲洗1 ~2分钟后,停泵,旋紧废液阀。

⑶ 阴离子交换色谱中阴离子洗脱强度顺序

阴离子交换树脂洗脱顺序是先从上层然后到下层,对阴离子交换树脂进行洗脱的目的是为了更好的对树脂进行再生。

⑷ 离子交换层析中流出物质顺序是什么

若用离子交换层析分离物质,以蛋白质为例,离子交换层析中,基质是由带有电荷的树脂或纤维素组成。带有正电荷的称之阴离子交换树脂;而带有负电荷的称之阳离子树脂。离子交换层析同样可以用于蛋白质的分离纯化。

由于蛋白质也有等电点,当蛋白质处于不同的pH条件下,其带电状况也不同。阴离子交换基质结合带有负电荷的蛋白质,所以这类蛋白质被留在柱子上,然后通过提高洗脱液中的盐浓度等措施,将吸附在柱子上的蛋白质洗脱下来。结合较弱的蛋白质首先被洗脱下来。

反之阳离子交换基质结合带有正电荷的蛋白质,结合的蛋白可以通过逐步增加洗脱液中的盐浓度或是提高洗脱液的pH值洗脱下来。

(4)用离子交换色谱时阴离子出峰顺序扩展阅读:

对于离子交换纤维素要用流水洗去少量碎的不易沉淀的颗粒,以保证有较好的均匀度,对于已溶胀好的产品则不必经这一步骤。

溶胀的交换剂使用前要用稀酸或稀碱处理,使之成为带H+或OH-的交换剂型。阴离子交换剂常用“碱-酸-碱”处理,使最终转为-OH-型或盐型交换剂;对于阳离子交换剂则用“酸-碱-酸”处理,使最终转为-H-型交换剂。

梯度不要上升太快,要恰好使移动的区带在快到柱末端时达到解吸状态。目的物的过早解吸,会引起区带扩散;而目的物的过晚解吸会使峰形过宽。

⑸ 离子交换色谱法的分离原理

离子交换色谱(ion exchange chromatography,IEC)以离子交换树脂作为固定相,树脂上具有固定离回子基团及可交换的答离子基团。当流动相带着组分电离生成的离子通过固定相时,组分离子与树脂上可交换的离子基团进行可逆变换。根据组分离子对树脂亲合力不同而得到分离。
阳离子交换:
阴离子交换:
式中"--"表示在固定相上,Kxy和Kzm是交换反应的平衡常数,Z+和X-代表被分析的组分离子。M+和Y-表示树脂上可交换的离子团。
离子交换反应的平衡常数分别为:
阳离子交换:
阴离子交换:
平衡常数K值越大,表示组分的离子与离子交换树脂的相互作用越强。由于不同的物质在溶剂中离解后,对离子交换中心具有不同的亲合力,因此具有不同的平衡常数。亲合力大的,在柱中的停留时间长,具有高的保留值。

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