㈠ 单纯超滤的注意事项
(一) 患者血细复胞比容(制Hct)水平越高,越容易在单纯超滤过程中因血液浓缩、血液粘度上升而使血流阻力增加。因此对于Hct 较高的患者,应适当增加抗凝药物的剂量。
(二) 患者血清白蛋白水平越高,单纯超滤过程中血清蛋白成份越容易黏附于滤器膜上,而影响超滤效果;若血清白蛋白水平过低,血浆胶体渗透压下降,可以导致单纯超滤过程中患者组织间隙中的水分回流入血减少,血管再充盈不足,容易发生低血压而难以完成超滤目标,此类患者在单纯超滤过程中是否补充血清白蛋白制剂,应依据临床实际情况做出判断。
(三) 温度过低将增加血液粘度,影响超滤效果。因此,单纯超滤过程中应注意给患者保温。
(四) 单纯超滤过程中,血液中电解质成份将随水分等比例清除,因此超滤结束后患者体内各种电解质的总量、尤其是钠离子总量将降低;而超滤引起的有效循环血容量的下降,将刺激交感神经兴奋,促使钾离子从细胞内移向细胞外,因此,超滤结束后患者血清钾水平可能升高。
(五) 选择高通量滤器,有助于完成目标超滤量;但超滤过程中氨基酸等营养物质的丢失也会因此而增多。
㈡ 如何用蛋白浓缩管
选择合适的超滤管,主要考虑MWCO和浓缩体积,最常见的是Ultra-15(10kD)。
通常应截留分子量不应大于目的蛋白分子量的1/3,比如目的蛋白分子量为35kDa,就可以选择10kDa截留分子量的超滤管。若目的蛋白分子量为10kD左右,则可以用截留分子量3kD的超滤管。认真阅读使用说明书,注意超滤膜对各种化学物质的耐受程度有所不同。
新买来的超滤是干燥的,使用前加入MilliQ水,水量完全过膜,冰浴或冰箱里预冷几分钟。然后将水倒出,即可加入蛋白液,加入的多少,以不超过管顶的白线为准。操作要轻,加入蛋白液前,超滤管需要插在冰上预冷。
(2)来不及超滤的蛋白怎么办扩展阅读:
超滤浓缩离心管,最新推出专利产品Hydrosart膜2K型,具有极低的蛋白吸附特性,高流速、高通量,是免疫球蛋白浓缩和脱盐的理想用膜。
备有四种材质的超滤膜:聚醚砜、三醋酸纤维素、再生纤维素和Hydrosart,可根据不同要求灵活选用;两种回收浓缩液的方法:既可用吸管直接吸取并回收,又可将离心管放入离心机反甩,将浓缩液甩入回收帽中,加盖保存。这两种方法都可使浓缩液达到近乎完全回收;
㈢ 蛋白用超滤管浓缩容易沉淀怎么办
可能是抄这个蛋白的水溶性较差,也就是只能保持在一定浓度不能太高
另外就和这个蛋白的稳定性有关了,超滤时保持低温,体积缩小一点后就把滤液混匀避免局部浓度过高,选择更合适的缓冲液,添加一点甘油等小分子物质等都可以增加蛋白的稳定性。
㈣ 超滤法分离的蛋白留在哪里
被截留在半透膜上。透析和超滤通常用于蛋白质分离方法。待分离的透析混合物放置在由半透膜的透析袋,然后浸入在透析液分离。超滤是利用离心力或压力强行使水和其它小分子通过半透膜,而蛋白质被截留在半透膜上的过程。