1. 超滤离心管如何选择以及使用方法
超滤离心管在蛋白质、DNA和生物分子的浓缩、纯化和脱盐过程中被广泛应用。选择和使用超滤离心管时,需要理解其与微滤的区别。
微滤(Microfiltration)利用微孔膜介质去除溶液中尺寸为0.1 μm至10.0 μm的颗粒或生物体,广泛应用于生物制药预过滤和除菌过滤。微滤在细胞实验中常用于样品和培养基灭菌,以及从细胞裂解物中去除完整细胞和碎片,确保下游应用结果准确性。
超滤(Ultrafiltration)通过压力或浓度梯度使料液通过半透膜进行分离,能截留尺寸范围为1-1000kDa的分子,并允许盐和水等小分子通过。它广泛应用于蛋白质溶液的分离和纯化,以及核酸样品制备,如分子克隆和质粒纯化。与沉淀法相比,超滤更为温和,避免生物大分子失活。
超滤离心管是一种利用离心力驱动溶液通过超滤膜进行快速浓缩、渗滤和缓冲液置换的装置,由盖子、过滤装置和离心管组成。通过选择适合的膜孔径,可进行除热源、澄清和分离大分子污染物,或浓缩和脱盐目标分子。
选择超滤离心管时,需考虑样品起始量及超滤膜的截留分子量(MWCO)。样品体积决定离心管尺寸,而截留分子量则需根据目标大分子的分子量选择,通常选择比目标分子小2-3倍的膜。
使用超滤离心管涉及准备、加样、离心和回收步骤。准备阶段需冲洗设备以消除甘油残留,然后在离心前加入适量纯水或缓冲溶液。离心前确保离心机转子平衡,以保持稳定。回收时,从过滤装置或离心管中轻轻提取样品,注意不要接触或损坏超滤膜。
遵循上述步骤,正确选择和使用超滤离心管,将有效实现蛋白质、DNA和生物分子的高效浓缩、纯化和脱盐,为科学研究和工业应用提供可靠支持。