凝胶层析和离子交换层析的原理

⑴ 凝胶过滤层析和离子交换层析分离蛋白质的原理有何不同

所有的层析在原理上都是相通的，区别在于流动相和层析剂之间的作用力的不同。
离子交换是利用蛋白质表面的电荷与层析剂上的离子基团的静电作用。
凝胶过滤层析利用了凝胶的多孔性，根据溶剂分子的大小进行分离。

⑵ 请教离子交换层析与亲和层析方面的问题

亲和层析是通过层析介质表面键合的配基与目标物质特异性吸附，然后非目标物流穿，再改变流动相是目标物质的特异性吸附消失，从而达到纯化目的。凝胶层析是通过层析介质孔径的设定，使分子量大小相差比较大的物质通过的路径不一样，从而达到分离效果。离子交换是通过层析介质表面的带电荷的基团与目标之间产生吸附，通过改变盐浓度使吸附力的大小改变，从而使不同的物质解吸的速度不一样，达到分离的效果。离子交换又分阴离子交换和阳离子交换。一般来说以上三种，离子交换应用面最广，亲和特异性最好，体积排阻的话只能对分子量差距很明显的物质进行分离。

⑶ 按层析原理分类有哪几类层析

按层析原理分类层析主要可以分为以下几类：

1、吸附层析

这种层析的原理是利用吸附剂的吸附作用，根据吸附剂与被吸附物之间的相互作用力不同进行分离。常见的吸附剂包括硅胶、氧化铝、活性炭等。

层析的介绍

1、概念

层析法是利用不同物质理化性质的差异而建立起来的技术。所有的层析系统都由两个相组成：一是固定相，另一是流动相。

当待分离的混合物随流动相通过固定相时，由于各组分的理化性质存在差异，与两相发生相互作用（吸附、溶解、结合等）的能力不同，在两相中的分配（含量比）不同，且随流动相向前移动，各组分不断地在两相中进行再分配。

分部收集流出液，可得到样品中所含的各单一组分，从而达到将各组分分离的目的。

2、特点

各种薄层层析的原理与其对应的柱层析原理相同，但比其相应的柱层析具有更多的优越性。它同柱层析一样，可选择不同的支持剂和不同的处理方法进行薄层层析，它保持了操作方便、设备简单、显色容易等特点。

同时，层析速度快，一般仅需15～20分钟，混合物易分离，分辨力一般比纸上层析高10倍，甚至100倍，它既适用于只有0.01微克（一般用几十微克）的样品分离，又能分离大于500毫克的样品作制备用，而且可以使用如浓硫酸、浓盐酸之类的腐蚀性显色剂。

⑷ 比较凝胶层析与分配层析在实验原理上的区别

比较凝胶层析与分配层析在实验原理上的区别：含义不同，作用力不同。

一、作用力不同：所有的层析在原理上都是相通的，区别在于流动相和层析剂之间的作用力的不同。离子交换层析法是以具有离子交换性能的物质作固定相，利用它与流动相中的离子能进行可逆的交换性质来分离离子型化合物的一种方法。

二、含义不同：离子交换是利用蛋白质表面的电荷与层析剂上的离子基团的静电作用。凝胶过滤层析利用了凝胶的多孔性，根据溶剂分子的大小进行分离。

原理

单个凝胶珠本身象个"筛子"。不同类型凝胶的筛孔的大小不同。如果将这样的凝胶装入一个足够长的柱子中，作成一个凝胶柱。当含有大小不同的蛋白质样品加到凝胶柱上时，比凝胶柱平均孔径小的蛋白质就要连续不断地穿入珠子的内部，这样的小分子不但其运动路程长，而且受到来自凝胶珠内部的阻力也很大，所以越小的蛋白质，把它们从柱子上洗脱下来所花费的时间越长。

⑸ 层析法按原理分类有哪几种各自分离依据是什么

层析法按照原理可分为：
1、吸附层析：主要利用吸附剂对被吸附成分的版吸附能力差异进行权分离
2、分配层析：主要利用被分离成分在两相不相混溶的溶剂中分配系数的差异进行分离
3、离子交换层析：主要利用被分离成分对离子交换剂的亲和能力的不同进行分离。
4、电泳法：利用电流通过时，离子倾向性不同进行分离。
5、凝胶过滤色谱：利用凝胶对分子大小不同成分的阻滞作用不同而得到分离。