㈠ 请问 配置液相色谱流动相时 是不是所有的流动相都必须要超滤
需要纠正一下,你所说的叫抽滤,不是超滤,这是两个概念。
对HPLC用的流动相来说,抽滤能达到两个目的:一是除掉机械杂质,避免阻塞色谱柱(主要在柱头的筛板处);二是利用抽滤时的负压除掉流动相中溶解的空气,避免在紫外检测器的流量池里形成气泡,产生干扰信号。
不管你用什么级别的溶剂,配好的流动相使用前都必须抽滤。对于已经抽滤过的流动相,放置几天后,再次使用时,也应该再次抽滤(需要注意的是,因为有负压,多次抽滤会造成流动相组成的微小变化,在保留时间上会有大小不同的变化,有时会影响到分离)
另外,超声处理也能排除流动相中的空气,但效果没有抽滤好。有些色谱系统配有脱气机(如低压混合的多元系统),但预先排除空气也能减少脱气机的负担,延长使用寿命。
不知道这样清楚了吗?
㈡ 为什么液相色谱实验中流动相和待测样品都需要过滤
因为要过滤掉流动相和待测样品里面的不溶性物质和气泡。防止它们堵住仪器。
很多东专西不是你看着澄清就真属的干净。液相的管路很细,还有色谱柱的孔径也很小,万一堵住了就报废了。所以一定要过滤。
流动相不单要过滤掉不溶物,还有就是气泡。这些气泡可能会堵住泵头,堵住色谱柱,就算哪儿都不会堵上也会导致流速不准确,柱压不稳定,基线波动等等。所以一定要过滤。
你的色谱柱是5um粒径的,用4.5um孔径滤膜就可以了。如果色谱柱粒径更小,那么也应该选择孔径更小的滤膜。
另外,如果你的流动相和待测样品是纯的色谱纯有机相,其实就没必要过滤了。
㈢ 为什么高效液相色谱仪的流动相在使用前必须过滤,脱气
用于高效液相色谱的流动相必须事先除气,否则容易在系统中逸出气泡,影响泵的工作。气泡还会影响色谱柱的分离效率、检测器的灵敏度、基线的稳定性,甚至使其无法检测。
噪音增加,基线不稳定,突然跳跃。此外,溶解在流动相中的氧可以与样品、流动相甚至固定相(如烷基胺)发生反应。溶解气体也会引起溶剂ph值的变化,从而导致分离或分析结果的误差。
常用的除气方法有加热沸腾、抽真空、超声波、吹氦等。
高效液相色谱(hplc)是色谱的一个重要分支。以液体为流动相,高压输液系统,将不同极性的单溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入固定相色谱柱。分离柱中的组分后,用检测器检测。实现了样品的分析。
(3)液相流动相过滤影响扩展阅读:
液相色谱-质谱联用(LC-MS)可增加额外的分析能力,准确识别和量化细胞和组织裂解物、血液、血浆、尿液和口服液等复杂样品基质中的微量化合物。
流动相和固定相都是液体。流动相与固定相应不相容(极性不同,避免固定液流失),界面清晰。当样品进入色谱柱时,溶质分布在两相之间。达到平衡后,遵循高效液相色谱的计算公式。
公式中cs溶质在固定相的浓度、cm溶质在流动相的浓度、vs固定相的体积和vm流动相的体积。llpc与gpc有相似之处,即分离顺序取决于k值较大的组分的保留值,但也存在差异。在gpc中,流量对k的影响较小,而llpc流量对k的影响较大。
㈣ 流动相在使用前为什么要过滤和脱气
过滤是为了除去流动相中的杂质,保护系统和柱子。脱气是为了除去溶解在流动相中得气泡,降低基线噪音。
㈤ 高效液相色谱法测定时,流动相合样品均应先过滤和超声波,为什么
流动相需要过滤、超声,过滤是除去固体杂质或异物,同时驱除溶解的气体,超声进一步驱内除溶解的气容体。样品需要过滤,防止不溶性物质堵塞系统的管路,样品不需要超声,超声过程往往伴随温度升高,样品一旦温度升高液体的体积会改变,浓度发生变化,影响到结果的准确性。
㈥ 相要经过过滤,那标准品和待测样品需不需要过滤
因为要过滤掉流动相和待测样品里面的不溶性物质和气泡。防止它们堵住仪器。
很多东西不是你看着澄清就真的干净。液相的管路很细,还有色谱柱的孔径也很小,万一堵住了就报废了。所以一定要过滤。
流动相不单要过滤掉不溶物,还有就是气泡。这些气泡可能会堵住泵头,堵住色谱柱,就算哪儿都不会堵上也会导致流速不准确,柱压不稳定,基线波动等等。所以一定要过滤。
你的色谱柱是5um粒径的,用4.5um孔径滤膜就可以了。如果色谱柱粒径更小,那么也应该选择孔径更小的滤膜。
另外,如果你的流动相和待测样品是纯的色谱纯有机相,其实就没必要过滤了。