㈠ 包涵体蛋白不变性复性能做WB吗
可以啊,包涵体蛋白只是二硫键折叠不正确,并不会影响到他们与抗体结合,而且你做western的时候蛋白都是变性的啊(SDS-PAGE阶段)。需要做包涵体复性的是需要有活性的蛋白时才用(比如重组蛋白酶活性分析)。
㈡ 包涵体复性过程中,用盐酸胍和尿素哪个好,有什么区别
包涵体复性过程中,用盐酸胍和尿素哪个好,有什么区别
① 包涵体就是蛋白的变性聚集后的产物,6M盐酸胍及8M尿素是作为溶解包涵体的溶剂.
② 复性的过程是逐步去除盐酸胍或者尿素,从而使得蛋白天然构象逐步形成.
所以一般如果起始使用的是6M盐酸胍进行包涵体溶解,这个过程中逐步降低的是盐酸胍的浓度.