超滤管摆放水平

A. 如何用蛋白浓缩管

选择合适的超滤管，主要考虑MWCO和浓缩体积，最常见的是Ultra-15（10kD）。

通常应截留分子量不应大于目的蛋白分子量的1/3，比如目的蛋白分子量为35kDa，就可以选择10kDa截留分子量的超滤管。若目的蛋白分子量为10kD左右，则可以用截留分子量3kD的超滤管。认真阅读使用说明书，注意超滤膜对各种化学物质的耐受程度有所不同。

新买来的超滤是干燥的，使用前加入MilliQ水，水量完全过膜，冰浴或冰箱里预冷几分钟。然后将水倒出，即可加入蛋白液，加入的多少，以不超过管顶的白线为准。操作要轻，加入蛋白液前，超滤管需要插在冰上预冷。

(1)超滤管摆放水平扩展阅读：

超滤浓缩离心管，最新推出专利产品Hydrosart膜2K型，具有极低的蛋白吸附特性，高流速、高通量，是免疫球蛋白浓缩和脱盐的理想用膜。

备有四种材质的超滤膜：聚醚砜、三醋酸纤维素、再生纤维素和Hydrosart，可根据不同要求灵活选用；两种回收浓缩液的方法：既可用吸管直接吸取并回收，又可将离心管放入离心机反甩，将浓缩液甩入回收帽中，加盖保存。这两种方法都可使浓缩液达到近乎完全回收；

B. 超滤离心管怎么使用

蛋白浓缩和换Buffer通常使用的超滤管，常用Millipore的Amicon-Ultra-15超滤管（MWCO10kD）。也有其它型号的、不同体积大小和MWCO超滤管可选，视目的蛋白的分子量与浓缩前体积、浓缩目标体积而定。可重复使用。
1、选择合适的超滤管，主要考虑MWCO和浓缩体积，通常应截留分子量不应大于目的蛋白分子量的1/3，比如目的蛋白分子量为35kDa，就可以选择10kDa截留分子量的超滤管。若目的蛋白分子量为10kD左右，则可以用截留分子量3kD的超滤管。
2、新买来的超滤是干燥的，使用前加入MilliQ水，水量完全过膜，冰浴或冰箱里预冷几分钟。然后将水倒出，即可加入蛋白液，加入的多少，以不超过管顶的白线为准。操作要轻，加入蛋白液前，超滤管需要插在冰上预冷。
3、平衡。质量和重心二者都要达到平衡。注意转速和加速度不可太快，否则直接损坏超滤膜。开始离心超滤（离心机预冷至4度）。膜与转轴的方向根据说明书调整（角转离心机的情况是膜与轴垂直）。在实际使用中，一般转速开的比说明书里的要低，这样可以延长离心管的使用寿命。
4、当浓缩到剩下1ml时，【取50ul国产Bradford溶液，加入10ul流穿，看有没变蓝色，以此判断超滤管是否漏掉蛋白。如果管漏了，将上层和流穿重新倒入新管中开始超滤。要精确判断是否漏管，用5mg/ml的BSA离心10min，再取流穿，跑蛋白胶或Bradford粗测】，继续加入剩下的蛋白液浓缩（在冰上操作，防止蛋白受热），直到所有浓缩液都加完为止。离心过程中注意是否发生蛋白沉淀，导致堵管。若发生沉淀，要确定沉淀的具体原因，是蛋白浓度过高还是Buffer不合适；前者可用多根超滤管同时超滤，降低浓度的办法解决，后者的方法是换不同的Buffer，直到蛋白不发生沉淀为止。
5、前面几步用以浓缩蛋白，如果要换Buffer，在总蛋白液浓缩至1ml左右的时候，轻轻加入新的Buffer（经0.22um超滤膜超滤），再浓缩至1ml左右，连续三次，最后一次的浓缩终体积根据需要的蛋白浓度而定，一般不多于500ul，也有浓缩至200ul以内的情况。按照每次至少10倍左右的体积浓缩算，三次达到1000倍以上，基本上可以达到换buffer的目的。
6、取出最终蛋白浓缩液的操作在冰上操作，用黄枪头（200ul）取，轻轻顺着边缘插入枪头，轻轻吹打、混匀蛋白液，注意不要碰到超滤膜，然后吸取浓缩液，每次吸接近200ul，直到吸完。管底剩下的最后一点浓缩液不必吸取，否则难度太大，有可能损坏超滤膜。最后加入MilliQ水到超滤管中，没过超滤膜，防止膜失水变干。
7、以下是处理超滤管，重复利用超滤管的步骤。
8、倒出超滤管里的水，用milliQ水轻轻润洗几次，【若管底有可见的蛋白沉淀，可以先加入水，然后用枪头吹打，注意不要碰到膜，吹打至沉淀悬起，然后倒掉，不可用自来水猛冲】然后加入0.2M的NaOH溶液，室温放置20min，期间平衡超滤管。再离心10min。倒出残留的NaOH溶液，将管芯浸入MilliQ水的烧杯(1或2L)中,放置几个小时,再换新的水,放置几个小时，不断稀释NaOH浓度。50ml管和盖子用自来水洗，内壁再用MilliQ水洗干净。
9、取出浸没的管芯，加至接近满的MilliQ水，50ml管也加满MilliQ水，将管芯慢慢放入50ml
离心管，排出部分水，然后盖上盖子，放4度保存，直到下次使用。一般来说，按照上述步骤和注意事项，每根管用三四年不会坏。

C. 净水器的优缺点是什么

净水器也叫净水机、水过滤器，是按对水的使用要求对水质进行深度过滤、净化处理的水处理设备。平时所说的净水器，一般是指用作家庭使用的小型过滤器，技术核心为滤芯装置中的过滤膜，目前主要技术来源于超滤膜和RO反渗透膜两种，诺百纳净水器以这两种来分析看。

一、优点不同

1、反渗透净水机：集微滤、吸附、超滤、反渗透、紫外杀菌、超纯化等技术于一体，更新鲜、更卫生、更安全。

2、超滤净水机：产水可直接饮用；最新一代滤芯，过滤精度高、使用寿命长，其水锤、耐压等测试均通过 NSF 测试标准。

二、缺点不同

1、反渗透净水机：出水为可以直接饮用的纯净水，出水量较小，比例大概为4比1，排出的废水是不能饮用的

2、超滤净水机：超滤净水器的出水比为2比1，过滤后的水可以直接喝下，但是前提是要正常的自来水，毕竟超滤膜只是一种物理过滤，对化学物质是无法过滤的，所以对一般的自来水过滤没有问题。但是超滤膜过滤后的水口感并没有反渗透膜好。

三、原理不同

1、反渗透净水机：反渗透膜是通过透过性膜将溶解在水中对人体有害的重金属离子去除掉，也可以过滤掉其他不利于身体健康的离子，并且很有效的溶解和去除水中的三氯甲烷、四氯化碳等有机物，将水中对人体有利的水分子留下，而其他杂质如细菌、污染物、病毒、水垢等，都会化成浓缩水被排除。

RO反渗透净水器内部有一层RO膜，这种膜的孔径微小至纳米级别，而细小如病毒、细菌，其体积也是RO膜孔径的的千倍。经过RO膜的基本上仅有水分，不含有其他元素，过滤出的水可以生饮也可以烧开。

2、超滤净水机：超滤膜净化技术是纯物理的过滤，其依靠超滤膜表面密布的微孔进行筛分，过滤精度取决于超滤膜孔径大小和孔径均匀度，水中的悬浮物、微粒、细菌、胶体和病毒等大分子物质可被截留住。超滤净水器内部有一层超滤膜，这层过滤膜的孔径精度范围为0.01~0.001μm，相比RO反渗透净水器要大一个数量级。同时，超滤膜不仅可让水分经过，同时也会让一些体积较小的小分子物质经过。

D. 上清液用30kd超滤管超滤出现絮状物是怎么回事

以下是一些原因：
1、超滤管的选择不当：经常使用的30KD超滤管过滤效果较好，如果采用了新的或不同品牌的超滤管，则可能会使得过滤效果受到影响，从而在上清液中出现絮状物。
2、超滤管损坏或不适当的使用:如果超滤管已经损坏或瞎州塌没有正确地安装在设备中，就有可能产生细小的颗粒或细丝等杂质物，进而形成絮状物。
3、上清液样品本身存在问题:如果上迹衫清液中存在高浓度的蛋白质、沉淀或其他大分子物质，这些物质磨圆即使通过超滤管过滤，也很难被完全去除，从而导致上清液出现絮状物。
4、超滤条件不合适:超滤过程中温度、pH值、离子强度等条件不符合要求，也可能会导致上清液中出现絮状物。

E. 如何选择超滤管

你看你要截留那部分物质，就选择比最小分子量小的，如果你要截留26KD的，你要的超滤管内就要比26小。但两者也要有一定容的差距，比如，选择20-25KD之间的就不合适，因为26的也可能会出去（这是由制造工艺决定的）。所以选择20KD以下的超滤管比较合适。

F. 贝朗crrt机超滤过多怎么处理

仅供参考，详细步骤请参考说明书

贝朗
CRRT CVVH
简易操作步骤

1
．

打开机器在
Diapact

CRRT
机器的背后有电源控制开关
ON/OFF
2
．

打开电源开关后，
必须确定两个控制系统检测一致，
用户必须比较屏幕上显示的特征线，
并按
EQ
键确定。

3
．

用
和
键来选择
连续性透析治疗
，并用
键确定，再选择
CVVH
并用
键确
定。

4
．

选择好治疗方式后，
机器开始硬件自检测试，
A
继电器自检，
B
安全空气检测硬件检测，
C
安全空气检测定标，
D
红色（血液）检测器自检，
E
漏血监测器测试，
F
零压力自检

5
．

硬件测试通过后进行管路安装及治疗参数设臵。

管路安装步骤：
A
挂盐水袋和臵换液袋到秤上。

B
放滤器到滤器夹子里，静脉（蓝）端朝上。

C
安装和连接臵换液管（绿），夹住不用的接头。

D
挂超滤收集袋到秤上，夹住出口。

E
穿过漏血，安装超滤管（黄），夹住不用的侧管。

F
挂静脉收集袋到输液杆。

G
安装和连接静脉管（蓝）和动脉管（红）。

6
．

确认必要的夹子是打开的，然后启动“预冲”血泵自动运转。

7
．

在准备阶段结束后，
系统会出现声音信号并且显示
治疗选择
的功能，
按显示的指导操作。

（如果需要，可以继续按
冲洗
键进行冲洗）

8
．

通过“进入治疗”键可以自动进行用户参数设臵。

9
．

设臵好参数通过“进入治疗”进入治疗状态。

10
．处于治疗状态。用
EQ
键确认漏血校正，血泵开始转动进行血循环。

11
．停血泵连接病人，并调节血泵转速，检查动静脉压力是否正常。

12
．当血泵运行
2-3
分钟后没有报警就可以开始治疗了，按治疗

键来激活进入治疗。

注意
:
治疗过程中动脉壶面应为
50%
壶高，静脉壶面应为
80%
壶高。

13
．在菜单选择中可以选择结束治疗。当结束治疗阶段被激活后，
虽然补液泵停止，但血泵
仍然转动，转速降低
(50ml/min)
14.
用户将动脉管路从病人身上取下，连接到盐水袋上。连接至血液管路（前
/
后稀释）的
臵换液必须停止。当体外血液回流回人体时，血泵停止，将静脉管路从病人身上取下。

注意
：需要换袋时，激活换袋功能。补液泵停止，换袋将不会引起报警。结束换袋后，
必须解除换袋功能。
然后治疗过程会自动继续。
结束换袋后，
必须检查静脉壶液面。

常用快捷键：
V+BE+ BP+/BP-
调节背景亮度
V+BE+
/

调节对比度

V+BE+ SN
调节语言
V+BE+
（壶液面下降）维修屏幕

V+BE+
▲按四秒

跳过自

G. 超滤离心管可以灭菌吗

1、可以用70%的酒精消毒
2、如果是高温高压灭菌,要注意灭完菌后,管里面的超滤膜是处于湿润的状态,所以需要立即使用,因为膜湿润后就不能干

H. 超滤管规格太小怎么放进离心机

1、首先将超滤内管插入所提供的一个微量离心管中。
2、其次向超滤管内管中加入不超过500微升的样本，并盖上盖子。
3、最后让盖子的连接带朝着转子的中央，用一个超滤管平衡即可。