液相色谱流动过滤膜

1. 高效液相色流动相过滤必须使用什么粒径的过滤膜

0.45μm。
根据道客巴巴资料，高效液相色流动手卜悔相过毕正滤必弊兆须使用0.45μm粒径的过滤膜。为了改变色谱柱的选择性，可以改变固定相和流动相的种类。
过滤膜全称微孔过滤膜，应用于原料药、药用溶剂、注射用水、针剂，包括混合纤维微孔滤膜等种类。

2. 高效液相色谱，流动相抽滤时，什么时候用有机系滤膜，什么时候用水系滤膜

过市场出售的水系膜是混合纤维素滤膜或者醋酸纤维素滤膜,
有机系滤膜一般是PVDF(聚偏氟乙烯滤膜)和PTFE(聚四氟乙烯滤膜).
用有机系滤膜是可以滤不含有机相的水或盐溶液的，只是速度较慢，还是建议水膜过滤。当然有机系滤膜也可以过滤水和有机相混合的流动相。
但是纤维素滤膜是会被有机相溶解的，有机相比例高的时候你会发现膜被溶解。有机相比例低的时候你看不到溶解，但是也不证明膜没有损失，这些损失导致的后果就是流动相被溶解的膜污染以及膜孔的扩大导致的过滤效果变差。
不要为了有机系和水系滤膜的差价而放弃试验的严谨性。
我的结论就是：含有有机相的流动相，即便比例低也不要用水膜过滤。除非你买特殊材质的混合滤膜，说明书上说明都可以过滤的就行。
也别再追求什么比例了，那些都是自欺欺人，既然叫做水膜，就不能用于有机相。

3. 高效液相色谱法流动相为什么要用过滤膜过滤

楼上正解。但不光是堵塞柱子，如果有不容颗粒在流动相中，也会对泵进行磨损。

4. 高效液相色谱仪操作流程

高效液相色谱仪操作流程为开机、超声、排气、走基线。

1、开机前先将流动相过滤和超声：水流动相用混合滤膜（0.2μm）过滤，有机流动相用有机滤膜过滤，之后超声脱气15-20分钟。（过滤的目的是除去流动相里的杂质，以免杂质进入色谱柱堵塞色谱柱；超声的目的是排除流动相里面的气体，以防气体进入色谱柱损害色谱柱，影响柱效能）

注意：试验过程中由于只有0.45μm的混合滤膜，第一次使用时感觉效果不好，于是过滤水时同时使用两张混合滤膜过滤水流动相。

数据分析：

色谱得到的原始数据为色谱图，我们需要对途中的色谱峰进行积分，获得峰面积，并根据实验需要，使用不同的方法进行定量计算，比如外标法，内标法，面积百分比法等。

仪器还可以得到光谱或者质谱信息，我们可以通过色谱柱数据软件的对应功能得到光谱图及质谱图，获得定性信息。

获得所需信息后，可以利用色谱软件将结果输出成不同格式的报告，或将处理好的结果导入其他软件（如统计分析）进行二次处理。

5. 为什么液相色谱实验中流动相和待测样品都需要过滤

因为要过滤掉流动相和待测样品里面的不溶性物质和气泡。防止它们堵住仪器。

很多东专西不是你看着澄清就真属的干净。液相的管路很细，还有色谱柱的孔径也很小，万一堵住了就报废了。所以一定要过滤。
流动相不单要过滤掉不溶物，还有就是气泡。这些气泡可能会堵住泵头，堵住色谱柱，就算哪儿都不会堵上也会导致流速不准确，柱压不稳定，基线波动等等。所以一定要过滤。

你的色谱柱是5um粒径的，用4.5um孔径滤膜就可以了。如果色谱柱粒径更小，那么也应该选择孔径更小的滤膜。

另外，如果你的流动相和待测样品是纯的色谱纯有机相，其实就没必要过滤了。

6. 为什么用于液相色谱的流动相和样品溶液必须用孔径至少0.45μm的滤膜过滤

防止颗粒进入液相系统。因为颗粒会磨损设备元件和堵塞液相管道。