离子交换法枸橼酸钠的含量测定

1. 离子交换色谱法结合酸碱滴定法测定枸橼酸钠的原理是什么

含有钙离子或镁离子造成水硬度的主为成分。离子交换色谱法掌握用离子交换法测定溶度积，结合酸滴碱定法测定枸橼酸钠加深对钠离子交换基本理论的理解，原理是含有钙离子或镁离子是造成水硬度的主为成分。

2. 生产柠檬酸及柠檬酸钠的方法有哪些

柠檬酸的发酵工艺

中国是世界上最大的柠檬酸生产国和出口国，
目前柠檬酸的合成
主要有水果提取法，
化学合成法和微生物发酵法三种，
相较于其它两
种，微生物发酵法生产柠檬酸其发酵周期短，产率高，便于连续化和
控制，是现在主要的生产方法。其发酵方程式如下：

C
12
H
24
O
11
(
蔗糖
)

+ H
2
O + 3O
2
→
2C
6
H
8
O
7
（柠檬酸）
+ 4H
2
O
主要工艺过程有：菌种培养，原料处理，接种、发酵，浸取柠檬
酸，酸解和脱色，浓缩结晶过程，工艺流程图如下：

图
1
发酵法生产柠檬酸流程图

Figure1
Schematic diagram for procing citric acid by fermentation

其过程可以简述如下
:
首先在培养基上接种黑曲霉素培养发酵细
菌，然后将培养出的细菌接种在无菌的原料中，然后送入曲室发酵，
发酵完成后将曲液放入浸取缸浸取，
然后向发酵液中加入沉淀剂一般

为石灰沉淀料液，
使得柠檬酸
（
C
6
H
8
O
7
）
沉淀为柠檬酸钙
（
Ca(C
6
H
5
0
7
)
2
）
,
之后在发酵液中加入硫酸酸化柠檬酸钙，
酸液经过离子交换树脂去除
Fe
2+
，
Ca
2+
离子，然后经过浓缩结晶得到柠檬酸。其方程式如下：

Ca(C
6
H
5
0
7
)
2
+ 3H
2
SO
4

→

2 C
6
H
8
O
7
+ CaSO
4
这时会产生大量的硫酸钙沉淀，一般每生产
1
吨的柠檬酸就会产生
3-4
吨的硫酸钙废料，这些废料会污染环境，从环境保护和可持续发
展角度来看这是很不可取的，
现在出现了一些新的方法来处理发酵液
从而达到结晶柠檬酸的目的，
例如电渗析法，
通过将发酵液通过阴膜
和阳膜根据设定次序交替组合后的电渗析淡化室，
通过施加一定的直
流电场，
在泵的驱动作用下连续循环一段时间后，
料液中的柠檬酸根
以离子形式通过阴离子交换膜并与氢离子在浓缩室结合成柠檬酸
（浓
缩室的引水为去离子水）
，从而达到浓缩提纯的目的，然后将浓缩液
通过阳离子交换树脂去除金属离子，
再经过浓缩结晶得到柠檬酸。
其
过程大体如下：

发酵液→过滤→电渗析→树脂交换→浓缩结晶→产品

其中过滤可为微滤和超滤的结合，若发酵液较纯可直接用超滤操作。
文献报道经过电渗析操作后柠檬酸的回收率可以达到
92.7%
。

3. EST分子量范围是多少

蛋白质种类很多，性质上的差异很大，既或是同类蛋白质，因选用材料不同，使用方法差别也很大，且又处于不同的体系中，因此不可能有一个固定的程序适用各类蛋白质的分离。但多数分离工作中的关键部分基本手段还是共同的，大部分蛋白质均可溶于水、稀盐、稀酸或稀碱溶液中，少数与脂类结合的蛋白质溶于乙醇、丙酮及丁醇等有机溶剂中。因此可采用不同溶剂提取、分离及纯化蛋白质和酶。蛋白质与酶在不同溶剂中溶解度的差异，主要取决于蛋白分子中非极性疏水基团与极性亲水基团的比例，其次取决于这些基团的排列和偶极矩。故分子结构性质是不同蛋白质溶解差异的内因。温度、pH、离子强度等是影响蛋白质溶解度的外界条件。提取蛋白质时常根据这些内外因素综合加以利用。将细胞内蛋白质提取出来。并与其它不需要的物质分开。但动物材料中的蛋白质有些可溶性的形式存在于体液（如血浆、消化硫等）中，可以不必经过提取直接进行分离。蛋白质中的角蛋白、胶原及丝蛋白等不溶性蛋白质，只需要适当的溶剂洗去可溶性的伴随物，如脂类、糖类以及其他可溶性蛋白质，最后剩下的就是不溶性蛋白质。这些蛋白质经细胞破碎后，用水、稀盐酸及缓冲液等适当溶剂，将蛋白质溶解出来，再用离心法除去不溶物，即得粗提取液。水适用于白蛋白类蛋白质的抽提。如果抽提物的pH用适当缓冲液控制时，共稳定性及溶解度均能增加。如球蛋白类能溶于稀盐溶液中，脂蛋白可用稀的去垢剂溶液如十二烷基硫酸钠、洋地黄皂苷（Digitonin)溶液或有机溶剂来抽提。其它不溶于水的蛋白质通常用稀碱溶液抽提。

不同结构的蛋白质及其溶解性质

蛋白质类别

溶解性质

简单蛋白质

溶于水及稀盐、稀酸、稀碱溶液，可被50%饱和度硫酸铵析出。

真球蛋白

一般在等电点时不溶于水，但加入少量的盐、酸、碱则可溶解。

拟球蛋白

溶于水，可为50%饱和度硫酸铵析出。

醇溶蛋白

溶于70～80%乙醇中，不溶于水及无水乙醇。

壳蛋白

在等电点不溶于水，也不溶于稀盐酸，易溶于稀酸、稀碱溶液。

精蛋白

溶于水和稀酸，易在稀氨水中沉淀。

组蛋白

溶于水和稀酸，易在稀氨水中沉淀。

硬蛋白质

不溶于水、盐、稀酸及稀碱。

缀合蛋白

蛋白质溶解性质随蛋白质与非蛋白质结合部分的不同而异，除脂蛋白外，一般可溶于稀酸、稀碱及盐溶液中，脂蛋白如脂肪部分露于外，则脂溶性占优势，如脂肪部分被包围于分子之中，则水溶性占优势。

注：缀合蛋白－包括磷蛋白、粘蛋白、糖蛋白、核蛋白、脂蛋白、血红蛋白、金属蛋白、黄素蛋白和氮苯蛋白等。

蛋白质的制备是一项十分细致的工作。涉及物理学、化学和生物学的知识很广。近年来虽然有了不少改进，但其主要原理仍不外乎两个方面：一是利用混合物中几个组分分配率的差别，把它们分配于可用机械方法分离的两个或几个物相中，如盐析、有机溶剂提取、层析和结晶等；二是将混合物置于单一物相中，通过物理力场的作用使各组分分配于不同区域而达到分离的目的，如电泳、超离心、超滤等。由于蛋白质不能溶化，也不能蒸发，所能分配的物相只限于固相和液相，并在这两相间互相交替进行分离纯化。制备方法可按照分子大小、形状、带电性质及溶解度等主要因素进行分类。按分子大小和形态分为差速离心、超滤、分子筛及透析等方法；按溶解度分为盐析、溶剂抽提、分配层析、逆流分配及结晶等方法；按电荷差异分为电泳、电渗析、等电点沉淀、离子交换层析及吸附层析等；按生物功能专一性有亲合层析法等。

由于不同生物大分子结构及理化性质不同，分离方法也不一样。即同一类生物大分子由于选用材料不同，使用方法差别也很大。因此很难有一个统一标准的方法对任何蛋白质均可循用。因此实验前应进行充分调查研究，查阅有关文献资料，对欲分离提纯物质的物理、化学及生物学性质先有一定了解，然后再着手进行实验工作。对于一个未知结构及性质的试样进行创造性的分离提纯时，更需要经过各种方法比较和摸索，才能找到一些工作规律和获得预期结果。其次在分离提纯工作前，常须建立相应的分析鉴定方法，以正确指导整个分离纯化工作的顺利进行。高度提纯某一生物大分子，一般要经过多种方法、步骤及不断变换各种外界条件才能达到目的。因此，整个实验过程方法的优劣，选择条件效果的好坏，均须通过分析鉴定来判明。

另一方面，蛋白质常以与其他生物体物质结合形式存在，因此也易与这些物质结合，这给分离精制带来了困难。如极微量的金属和糖对巨大蛋白质的稳定性起决定作用，若被除去则不稳定的蛋白质结晶化的难度也随之增加。如高峰淀粉酶A的Ca2+，胰岛素 Zn2+等。此外，高分子蛋白质具有一定的立体构象，相当不稳定，如前所述极易变性、变构，因此限制了分离精制的方法。通常是根据具体对象联用各种方法。为得到天然状态的蛋白质，尽量采用温和的手段，如中性、低温、避免起泡等，并还要注意防腐。

注意共存成分的影响。如蝮蛇粗毒的蛋白质水解酶活性很高，在分离纯化中需引起重视。纯化蝮蛇神经毒素时，当室温超过20℃时，几乎得不到神经毒素。蝮蛇毒中的蛋白水解酶能被0.1mol/L EDTA完全抑制，因此在进行柱层析前先将粗毒素 0.1mol/LEDTA溶液处理，即使在室温高于20℃，仍能很好的得到神经毒素。

整个制备过程一般可分为5个阶段：①材料的选择和预处理，②细胞的破碎（有时需进行细胞器的分离），③提取，④纯化（包括盐析，有机溶剂沉淀，有机溶剂提取、吸附、层析、超离心及结晶等），⑤浓缩、干燥及保存。以上5个阶段不是要求每个方案都完整地具备，也不是每一阶段截然分开。

不论是哪一阶段使用哪一种方法，均必须在操作中保存生物大分子结构的完整性。保存活性防止变性及降解现象的发生。因空间结构主要依靠氢键、盐键和范德华力的存在，遇酸、遇碱、高温、剧烈的机械作用及强烈的辐射等均可导致活性丧失。因此选择的条件应为十分温和。同时应注意防止系统中重金属离子、细胞自身酶系及其他有毒物质的污染。

一、原料的选择

早年为了研究的方便，尽量寻找含某种蛋白质丰富的器官从中提取蛋白质。但至目前经常遇到的多是含量低的器官或组织且量也很小，如下丘脑、松果体、细胞膜或内膜等原材料，因而对提取要求更复杂一些。

原料的选择主要依据实验目的定。从工业生产角度考虑，注意选含量高、来源丰富及成本低的原料。尽量要新鲜原料。但有时这几方面不同时具备。含量丰富但来源困难，或含量来源均理想，但分离纯化操作繁琐，反而不如含量略低些易于获得纯品者。一般要注意种属的关系，如鲣的心肌细胞色素C较马的易结晶，马的血红蛋白较牛的易结晶。要事前调查制备的难易情况。若利用蛋白质的活性，对原料的种属应几乎无影响。如利用胰蛋白酶水解蛋白质的活性，用猪或牛胰脏均可。但若研究蛋白质自身的性质及结构时，原料的来源种属必须一定。研究由于病态引起的特殊蛋白质（本斯.琼斯氏蛋白、贫血血红蛋白）时，不但使用种属一定的原料，而且要取自同一个体的原料。可能时尽量用全年均可采到的原料。对动物生理状态间的差异（如饥饿时脂肪和糖类相对减少），采收期及产地等因素也要注意。

二、前处理

1、细胞的破碎

材料选定通常要进行处理。要剔除结缔组织及脂肪组织。如不能立即进行实验，则应冷冻保存。除了提取及胞细外成分，对细胞内及多细胞生物组织中的蛋白质的分离提取均须先将细胞破碎，使其充分释放到溶液中。不同生物体或同一生物体不同的组织，其细胞破坏难易不一，使用方法也不完全相同。如动物胰、肝、脑组织一般较柔软，作普通匀浆器磨研即可，肌肉及心组织较韧，需预先绞碎再制成匀桨。

⑴机械方法

主要通过机械切力的作用使组织细胞破坏。常用器械有：①高速组织捣碎机（转速可达 10000rpm，具高速转动的锋利的刀片），宜用于动物内脏组织的破碎；②玻璃匀浆器（用两个磨砂面相互摩擦，将细胞磨碎），适用于少量材料，也可用不锈钢或硬质塑料等，两面间隔只有十分之几毫米，对细胞破碎程度较高速捣碎机高，机械切力对分子破坏较小。小量的也可用乳钵与适当的缓冲剂磨碎提取，也可加氧化铝、石英砂及玻璃粉磨细。但在磨细时局部往往生热导致变性或pH显著变化，尤其用玻璃粉和氧化铝时。磨细剂的吸附也可导致损失。

⑵物理方法

主要通过各种物理因素的作用，使组织细胞破碎的方法。

Ⅰ反复冻融法

于冷藏库或干冰反复于零下15～20℃使之冻固，然后缓慢地融解，如此反复操作，使大部分细胞及细胞内颗粒破坏。由于渗透压的变化，使结合水冻结产生组织的变性，冰片将细胞膜破碎，使蛋白质可溶化，成为粘稠的浓溶液，但脂蛋白冻结变性。

Ⅱ冷热变替法

将材料投入沸水中，于90℃左右维持数分钟，立即置于冰浴中使之迅速冷却，绝大部分细胞被破坏。

Ⅲ超声波法

暴露于9～10千周声波或10～500千周超声波所产生的机械振动，只要有设备该法方便且效果也好，但一次处理量较小。应用超声波处理时应注意避免溶液中气泡的存在。处理一些超声波敏感的蛋白质酶时宜慎重。

Ⅳ加压破碎法

加一定气压或水压也可使细胞破碎。

⑶化学及生物化学方法

Ⅰ有机溶媒法

粉碎后的新鲜材料在0℃以下加入5～10倍量的丙酮，迅速搅拌均匀，可破碎细胞膜，破坏蛋白质与脂质的结合。蛋白质一般不变性，被脱脂和脱水成为干燥粉末。用少量乙醚洗，经滤纸干燥，如脱氢酶等可保存数月不失去活性。

Ⅱ自溶法

将待破碎的鲜材料在一定pH和适当的温度下，利用自身的蛋白酶将细胞破坏，使细胞内含物释放出来。比较稳定，变性较难，蛋白质不被分解而可溶化。利用该法可从胰脏制取羧肽酶。自体融解时需要时间，需加少量甲苯、氯仿等。应防止细菌污染。于温室 30℃左右较早溶化。自体融解过程中PH显著变化，随时要调节pH。自溶温度选在0～4℃，因自溶时间较长，不易控制，所以制备活性蛋白质时较少用。

Ⅲ酶法

与前述的自体融法同理，用胰蛋白酶等蛋白酶除去变性蛋白质。但值得提出的是溶菌酶处理时，它能水解构成枯草菌等菌体膜的多糖类。能溶解菌的酶分布很广。尤其卵白中含量高，而多易结晶化。1g菌体加1～10mg溶菌酶， pH6.2～7.01h内完全溶菌。于生理食盐水或0.2mol蔗糖溶液中溶菌，虽失去细胞膜，但原形质没有脱出。除溶菌酶外，蜗牛酶及纤维素酶也常被选为破坏细菌及植物细胞用。

表面活性剂处理

较常用的有十二烷基磺酸钠、氯化十二烷基吡淀及去氧胆酸钠等。

此外一些细胞膜较脆弱的细胞，可把它们置于水或低渗缓冲剂中透析将细胞胀破。

2、细胞器的分离

制备某一种生物大分子需要采用细胞中某一部分的材料，或者为了纯化某一特定细胞器上的生物大分子，防止其他细胞组分的干扰，细胞破碎后常将细胞内各组分先行分离，对于制备一些难度较大需求纯度较高的生物大分子是有利的。尤其近年来分子生物学、分子遗传学、遗传工程等学科和技术的发展，对分布在各种细胞器上的核酸和蛋白质的研究工作日益增多，分离各种细胞器上的各类核酸和特异性蛋白质已成为生物大分子制备工作重要内容之一。各类生物大分子在细胞内的分布是不同的。DNA几乎全部集中在细胞核内。RNA则大部分分布于细胞质。各种酶在细胞内分布也有一定位置。因此制备细胞器上的生物大分子时，预先须对整个细胞结构和各类生物大分子在细胞内分布匹有所了解。以肝细胞为例整理如表1

表1 蛋白质、酶及核酸在肝细胞内分布情况

细胞器名称

主要蛋白质及酶类、核酸类

核酸类

细胞核

细胞核 精蛋白、组蛋白、核酸合成酶系

RNA占总量10%左右，DNA几乎全部

线粒体

电子传递、氯化磷酸化、三羧酸循环、脂肪酸氧化、氨基酸氧化、脲合成等酶系。

RNA占总量5%左右，DNA微量

内质网（微粒体）

蛋白质合成酶系、羟化酶系。

RNA占总量50%左右

溶酶体

水解酶系（包括核酸酶、磷酸脂酶、组织蛋白酶及糖苷及糖苷酶等）。

细胞膜

载体与受体蛋白、特异抗蛋、ATP酶、环化腺苷酶、5’-核苷酸酶琥珀酸脱氢酶、葡萄糖-6-磷酸酶等。

细胞液

嘧啶和嘌呤代谢、氨基酸合成酶系、可溶性蛋白类。

RNA（主要为tRNA）占总量30%

高尔基氏体

糖苷转移酶、粘多糖及类固醇合成酶系。

细胞器的分离一般采用差速离心法。细胞经过破碎后，在适当介质中进行差速离心。利用细胞各组分质量大小不同，沉降于离心管内不同区域，分离后即得所需组分。细胞器的分离制备、介质的选择十分重要。最早使用的介质是生理盐水。因它容易使亚细胞颗粒发生聚集作用结成块状，沉淀分离效果不理想，现一般改用蔗糖、Ficoll（一种蔗糖多聚物）或葡萄糖-聚乙二醇等高分子溶液。

2.1水溶液提取

大部分蛋白质均溶于水、稀盐、稀碱或稀酸溶液中。因此蛋白质的提取一般以水为主。稀盐溶液和缓冲溶液对蛋白质稳定性好、溶度大，也是提取蛋白质的最常用溶剂。以盐溶液及缓冲液提取蛋白质进常注意下面几个因素。

2.2盐浓度

等渗盐溶液尤以0.02～0.05mol/L磷酸盐缓冲液和碳酸盐缓冲液常用。 0.15mol/L氯化钠溶液应用也较多。如6-磷酸葡萄糖脱氢酶用0.1mol/L碳酸氢钠液提取等。有时为了螯合某些金属离子和解离酶分子与其他杂质的静电结合，也常使用枸橼酸钠缓冲液和焦磷酸钠缓冲液。有些蛋白质在低盐浓度下浓度低，如脱氧核糖核蛋白质需用1mol/L以上氯化钠液提取。总之，只要能溶解在水溶液中而与细胞颗粒结合不太紧密的蛋白质和酶，细胞破碎后选择适当的盐浓度及PH，一般是不难提取的。只有某些与细胞颗粒上的脂类物质结合较紧的，需采用有机溶剂或加入表面活性剂处理等方法提取。

2.3PH值

蛋白质提取液的PH值首先应保证在蛋白质稳定的范围内，即选择在偏离等电点两侧。如碱性蛋白质则选在偏酸一侧，酸性蛋白质选择偏碱一侧，以增大蛋白质的溶解度，提高提取效果。如细胞色素C属碱性蛋白质，常用稀酸提取，肌肉甘油醛-3-磷酸脱氢酶属酸性蛋白质，用稀碱提取。某些蛋白质或酶与其分物质结合常以离子键形式存在，选择PH3～6范围对于分离提取是有利的。

2.4温度

多数酶的提取温度在5℃以下。少数对温度耐受性较高的蛋白质和酶，可适当提高温度，使杂蛋白变性分离且也有利于提取和进一步纯化。如胃蛋白酶等及许多多肽激素类，选择37～50℃条件下提取，效果比低温提取更好。

4. 分析化学实验的4图书信息

书名:分析化学实验/高等院校化学课实验系列教材
ISBN:730703753
作者:武汉大学化学与分子科学学院实验中心编
出版社:中国中医药出版社
定价:12
页数:250
出版日期:2003-5-1
版次:1
开本:大32开
包装:平装
简介:本书是《普通高等教育“十五”国家级规划教材》之一。
本书由上篇(化学定量分析)、下篇(仪器分析)、附篇(常用分析仪器等)及附录4部分组成。本书共含各种实验101个，其中上篇化学定量分析实验32个(含英文实验2个)；下篇仪器分析实验69个(含英文实验2个)；附篇包括分析天平、常用分光光度计、常用色谱分析仪器及萨特勒标准光谱的查阅方法等内容。
本书贯彻“三基”、“五性”的精神，符合分析化学的教学需要，系统性强，内容全面、新颖、简洁明了。
本书与《分析化学》、《仪器分析选论》、《分析化学简明教程》、《分析化学习题集》及《分析化学多媒体教学软件》等构成分析化学立体化系列教材。
本书可作为高等院校药学、制药工程、中药学、药物制剂、生物化工、化学及化工等专业本科生分析化学实验教材，也可作为分析工作者的参考用书。
目录:
上篇 化学定量分析
第1章 分析化学基本操作
实验1·1 滴定分析基本操作
实验1·2 重量分析基本操作
第2章 分析天平与称量
实验2·1 称量练习
实验2·2 天平性能的检查
第3章 酸碱滴定法及非水滴定法
实验3·1 滴定分析操作练习
实验3·2 容量仪器的检定
实验3·3 HCl标准溶液(0.1mol/L)的配制与标定
实验3·4 药用硼砂的含量测定
实验3·5 药用NaOH的含量测定
实验3·6 NaOH标准溶液(0.1mol/L)的配制与标定
Experiment 3.7 Preparation and Standardization of Sodium Hydroxide Solution
实验3·8 乙酸的含量测定
实验3·9 苯甲酸的含量测定
实验3·10 混合酸(HCl+ )的含量测定
实验3·11 高氯酸标准溶液(0.1mol/L)的配制与标定
Experiment 3.12 Preparation and Standardization of Perchloric Acid
实验3·13 水杨酸钠的含量测定
实验3·14 盐酸苯海拉明含量测定
实验3·15 盐酸麻黄碱的含量测定
第4章 络合滴定法
实验4·1 0.05mol/L EDTA标准溶液的配制与标定
实验4·2 水硬度的测定
第5章 氧化还原滴定法
实验5·1
标准溶液(0.05mol/L)的配制与标定
实验5·2
标准溶液(0.1mol/L)的配制与标定
实验5·3 维生素C含量的测定(直接碘量法)
实验5·4 铜盐的含量测定(置换碘量法)
实验5·5 葡萄糖的含量测定(间接碘量法)
实验5·6
标准溶液(0.02mol/L)的配制与标定
实验5·7 过氧化氢的含量测定
第6章 沉淀滴定法与重量分析法
实验6·1 氯化物中氯含量的测定( 指示剂法)
实验6·2 氯化物中氯含量的测定(铁铵矾指示剂法)
实验6·3 氯化钡结晶水的测定
实验6·4 硫酸钠的含量测定
下篇 仪器分析
第7章 电位法与伏安法
实验7·1 用pH计测定溶液的pH
【附一】 pHS-2C型酸度计测定溶液pH方法
【附二】 25型pH计测定溶液pH的方法
【附三】 PXSJ-216型离子分析仪测定溶液pH的方法
实验7·2 用氯离子选择性电极测定氯离子浓度
【附一】 氯离子选择性电极的制备方法
【附二】 25型pH计测量电动势的使用方法
实验7·3 氟离子选择性电极的性能检验及水样中氟离子的含量测定
实验7·4 磷酸的电位滴定
实验7·5 永停滴定法标定12标准溶液(0.005mol/L)
实验7·6 磺胺嘧啶的重氮化滴定(永停滴定法)
实验7·7 卡尔费休法测定水分(永停滴定法)
实验7·8
/ 电对条件电位的测定(作图法)
第8章 紫外-可见分光光度法
实验8·1 吸收曲线的测绘
【附】 721型分光光度计的使用方法
实验8·2 邻二氮菲吸光光度法测定水中铁含量(标准曲线法和标准比较法)
实验8·3 紫外-可见分光光度计的性能检定及使用方法
实验8·4 维生素 注射液的含量测定
实验8·5 原料药品的吸光系数测定
实验8·6 双波长分光光度法测定复方磺胺甲恶唑片中磺胺甲恶唑及甲氧苄啶含量
实验8·7 双波长计算分光光度法测定银黄注射液中黄芩苷和绿原酸的含量
实验8·8 导数光谱法测定安钠咖注射液中咖啡因的含量
Experiment 8.9 Determination of Quinine and Sodium Benzoate in Tonic Water by UV Absorbance Spectros
第9章 荧光分析法
实验9·1 荧光法测定维生素 的含量
实验9·2 荧光法测定硫酸奎宁的含量
【附】 930型荧光光度计及其操作方法
第10 章红外分光光度法
实验10·1 红外分光光度计的性能检查
实验10·2 样品的红外吸收光谱的测绘
第11章 原子吸收分光光度法
实验11·1 肝素钠中杂质钾盐的限量检查
实验11·2 原子吸收分光光度法测定饮用水中镁的含量
实验11·3 头发中锌的含量测定
实验11·4 火焰原子吸收光谱法测定水中的钙——标准加入法
第12章 核磁共振波谱法(示教)
实验12·1 核磁共振波谱仪的性能检查
实验12·2 薄荷醇核磁共振氢谱的测绘
实验12·3 核磁共振法测定乙酰乙酸乙酯互变异构及含量
实验12·4 薄荷醇的核磁共振碳谱(COM与DEPT谱)的测绘
第13章 质谱法(示教)
实验13·1 质谱仪的性能检查
实验13·2 非那西汀的质谱测绘
实验13·3 有机未知物的质谱测绘
实验13·4 甲苯、氯苯和溴苯混合物的GC-MS分析
实验13·5 川芎挥发油的GC-MS分析
第14章 经典液相色谱法
实验14·1 氧化铝的活度测定法(柱色谱法)
实验14·2 离子交换色谱法测定枸橼酸钠的含量(柱色谱法)
实验14·3 氧化铝的活度测定(薄层色谱法)
实验14·4 硅胶(黏合板)的活度测定
实验14·5 乙酸曲安奈德的杂质检查(薄层色谱法)
实验14·6 纸色谱法测定肌苷注射液的含量(上行展开法)
实验14·7 盐酸苯乙双胍杂质限度检测(纸色谱下行展开法)
实验14·8 脯氨酸与羟脯氨酸的分离与鉴定
实验14·9 薄层扫描法测定六味地黄丸中熊果酸的含量
第15章 气相色谱法
实验15·1 气-液填充色谱柱的制备
实验15·2 气相色谱仪的性能检查
实验15·3 常用色谱定性参数的测定和归一化法含量测定
实验15·4 苯、甲苯、二甲苯的分离与鉴别及色谱系统适用性试验
实验15·5 内标法测定酒或酊剂中乙醇含量
实验15·6 微量水分测定
实验15·7 两种丁醇异构体相对含量的测定
实验15·8 最佳载气流速的测定
实验15·9 毛细管气相色谱法测定羌活挥发油
第16章 高效液相色谱法
实验16·1 高效液相色谱仪的性能检查与色谱参数的测定
实验16·2 用内标对比法测定泼尼松龙的含量
实验16·3 用内标对比法测定扑热息痛的含量
实验16·4 用校正因子法测定复方炔诺酮片中炔诺酮和炔雌醇的含量
实验16·5 用外标法测定头孢克洛的含量
实验16·6 归一化法检查盐酸环丙沙星的杂质限量
Experiment16·7
实验16·8 流动相的四面体优化法
第17章 毛细管电泳法(示教)
概述
实验17·1 毛细管电泳仪的性能检查
实验17·2 皲裂平酊剂的定性分析
实验17·3 冬虫夏草主要成分的定性分析
实验17·4 复方降压片中三组分的定量分析
第18章 流动注射分析法
实验18·1 流动注射分析仪的性能检查
实验18·2 自来水中的铁含量测定
实验18·3 盐酸肾上腺素注射液的含量测定
实验18·4 磺胺嘧啶的含量测定
第19章 热分析法
实验19·1 用DSC热分析技术测定药物硝本地平的纯度
附篇 常用分析仪器及萨特勒标准光谱查阅方法
第20章 分析天平
20·1 分析天平的称量原理
20·2 分析天平的分类
20·3 分析天平的结构
20·4 光电分析天平的安装和调整
20·5 分析天平的计量性能
20·6 分析天平的使用规则和称量方法
20·7 砝码的校正
20·8 微量天平
20·9 电子天平
20·10 天平室规则
第21章 常用分光光度计
21·1 722型可见分光光度计
21·2 751G型紫外-可见分光光度计
21·3 752型紫外-可见光栅分光光度计
21·4 756MC型紫外-可见分光光度计
21·5 UV-9100型紫外-可见分光光度计
21·6 WFZ800- 型紫外-可见分光光度计
21·7 MPF-4型荧光分光光度计
21·8 960型荧光分光光度计的使用方法
21·9 7650型红外分光光度计
21·10 1703型傅里叶变换红外分光光度计
21·11 WFX-1D型原子吸收分光光度计
21·12 P-E2100型原子吸收分光光度计
21·13 岛津AAS-670型原子吸收分光光度计
第22章 常用色谱仪器
22·1 CS-930型薄层扫描仪
22·2 CS-9301PC型薄层扫描仪简介
22·3 通用型气相色谱仪的使用方法
22·4 天美7890型气相色谱仪
22·5 102G型气相色谱仪
22·6 Agilent6890N型气相色谱仪
22·7 通用型高效液相色谱仪的使用方法
22·8 日立L-7100型液相色谱仪的使用方法
22·9 Agilent1100型高效液相色谱仪
22·10 简易毛细管电泳仪简介
22·11 GCMS-QP5050A型气相色谱-质谱联用仪简介
第23章 萨特勒标准光谱的查阅方法
23·1 萨特勒标准光谱与索引的分类
23·2 名称字顺索引
23·3 分子式索引
23·4 化学分类索引
23·5 谱线索引
23·6 化学位移索引
23·7 C-13核磁共振波谱峰位索引
附录
附录Ⅰ 国际相对原子质量表(1999)
附录Ⅱ 常用相对分子质量表
附录Ⅲ 常用指示剂
附录Ⅳ 常用缓冲溶液的配制
附录Ⅴ 标准缓冲溶液的pH
附录Ⅵ 常用酸碱的密度和浓度
附录Ⅶ 常用基准物的干燥及应用
附录Ⅷ 难溶化合物的溶度积( )
附录Ⅸ 标准电极电位及氧化还原电对条件电位表
附录Ⅹ 常用溶剂的截止波长
附录Ⅺ 原子吸收分光光度法中常用的分析线
附录Ⅻ 常用氘代溶剂的残留氢的化学位移
附录ⅩⅢ 薄层色谱固定相
附录ⅩⅣ 气相色谱常用固定液
附录ⅣⅤ 气相色谱相对质量校正因子(f)
附录ⅩⅥ 高效液相色谱固定相与应用
附录ⅩⅧ 高效液相色谱法常用流动相的性质

5. 柠檬酸生产工艺流程

1、柠檬酸是世界上产量较高的有机酸，是一种无水物质。柠檬酸的生产工艺主要有生物发酵、水果提取和化学合成。以玉米粉为原料生产柠檬酸，有利于实现低能耗、低污染、高效益的目标。

过滤后玉米渣和多余的蛋白质发酵过程，压力和糖混合通风与无菌空气深层发酵，发酵槽保持适当的生长温度35～37℃环境中，与传统的干土豆为原料相比，用玉米作为新兴的柠檬酸生产的原材料和生产酸快，发酵周期短，成本低，在溶氧能力强等。总的来说，产酸产量可以提高10％左右。

2、为了提高传统玉米面粉发酵柠檬酸的生产过程生产干土豆为原料，通过发酵和钙盐提取技术，该方法生产的产品质量差，成本高，严重的环境污染，为了进一步扩大经济效益，提高生产效率，实现清洁、无污染的生产，需要提高柠檬酸生产的提取工艺。

3、在原材料方面，本研究的玉米面粉、大米和稻草，等等，针对工业过程的离子色谱法，母液净化处理和回收废液糖技术，不仅有效地降低成本，而且对柠檬酸生产的副产品，理性地通过优化技术、废弃物排放少有利于环境保护。

当玉米产生柠檬酸时，只使用玉米中的淀粉。玉米中的其他营养素可在生产过程中回收、纯化和开发，生产玉米蛋白粉、纤维饲料和高附加值玉米油等副产品。“吃了就挤”的生产理念有效地提高了经济效益。

4、 为了提高培养基的溶解氧效果，在生产过程中应及时去除培养基中的杂质(固体)和过量营养素，使培养基呈现出清晰的液态，增强溶解氧能力，缩短发酵周期。

此外，经过合理调整后，不需要添加微量元素、生长素、氮源、无机盐等，使各种成分比例适当的培养基可以大大提高转化率和产酸率。在常压条件下采用低温液化技术，既能保证介质的质量，又能满足完全液化的要求。

5、当种植玉米，诱变育种的方法，选择合适的生产柠檬酸（如淀粉含量高的突变品种）的玉米品种和大量繁殖，使用高浓度的玉米面粉柠檬酸高新技术的平板驯化，培育和选择转化率高、发酵周期短的速度和高酸菌株质量。将高新技术方法应用于大规模发酵过程中，实现了经济效益和环境效益的双丰收。

(5)离子交换法枸橼酸钠的含量测定扩展阅读：

电渗析技术电渗析：

是一种高效的膜分离技术，其原理是利用阴阳离子交换膜的选择透过性的电场力的作用下，使柠檬酸根和氢离子结合为柠檬酸，整个过程中柠檬酸的损失少，平均收率达到92．7％。

相对于传统柠檬酸提取工序中酸化沉淀的柠檬酸钙方法而言，这种改进后的工艺不需要添加钙成分，更加简单，便于实现自动化生产，对环境影响小，生产周期短容易进行自动化生产。其缺点在于会增加柠檬酸的生产成本（电渗析的膜费较高），消耗的电能较多。

传统工艺使用粗玉米粉生产柠檬酸时，由于粗玉米粉中的蛋白质含量丰富，在发酵时无用成分较多且易于造成菌体疯长，不利于产酸。而用玉米清夜进行柠檬酸的发酵时有明显的优势。