超滤细菌内毒素

❶ 水厂是如何净化水的

通常来讲饮用水的原水杂质主要是泥沙（悬浮物）、有机颗粒（胶体）和盐类（如铁盐，属于溶解物质），成分相对单一，处理流程相对简单。最常规的一套流程便是“原水-投药-混凝-沉淀-过滤-消毒-用户”，对于特殊的原水水质（比如受到了污染），则可以在初期增加预氧化，在后期附加活性炭吸附、气浮等。
但需要注意的是，饮用水的出水指标要求是很严的，浊度、色度、臭阈值以及大肠菌群数、有机物浓度、重金属离子浓度、放射性等必须符合《生活饮用水卫生标准》（GB 5749-2006）。
污水的成分相对复杂得多，因而相应的处理流程也很繁琐。通常来讲，城市排水管网里的污水主要包括城市生活污水和工业废水。工业废水在出厂时就已进行了初级处理，水质必须符合国家颁布的工业废水排放标准；而城市生活污水里的杂质大到果皮等生活垃圾，小到含氮、含磷的小分子有机物，无所不包。可见，城市污水处理的重点集中在生活污水上。生活污水的含碳类有机物含量很高，氮、磷也不少，直接排放会导致河湖水体腐败，生物死亡以及富营养化等后果，必须进行处理。考虑到成本的因素，目前国内的污水厂主要采用生物处理法。
污水常见的一套处理流程便是“污水-格栅-沉砂池-初级沉淀池-曝气池-二级沉淀池-消毒-排放”，这便是传统的活性污泥法。此外，与之平行的还有生物膜法，原理都是利用微生物对污染物的降解来提高水质，只是具体的生物反应器有所不同。这些均是好氧生物处理，对于高浓度的有机废水，先进行厌氧生物处理往往会取得更好的效果。厌氧生物处理工艺有氧化塘、上升式厌氧污泥床（UASB）、厌氧流化床（AFB）等。
此外，脱氮除磷往往是污水处理中很重要的一个方面。国外对活性污泥法进行改进后，用以脱氮。如三级生物脱氮工艺“进水-BOD去除/氨化-沉淀-硝化-沉淀-反硝化-沉淀-出水”，二级脱氮工艺“进水-BOD去除/氨化/硝化-沉淀-反硝化-沉淀-出水”。对于脱氮，当然还有SHARON工艺、ANAMMOX工艺等新式工艺。除磷常用的有厌氧-好氧工艺（A/O法）“进水-厌氧池-好氧池-二沉池-出水”、厌氧-缺氧-好氧工艺（A2/O法）“进水-厌氧池-缺氧池-好氧池-二沉池-出水”，另外还有Phostrip、Phoredox、UCT、VIP等除磷工艺。
还需说明的是，与污水处理同时进行的是污泥的处置，这是两套系统。常用的流程是“/初沉池污泥-一级硝化-二级硝化-脱水-填埋/外运”。
总之，饮用水处理追求的是精益求精，出水水质要求高；污水处理面对的是高浓度污染物的问题，首要任务是有效地降低其浓度，两者的出发点是不同的。

❷ 细菌内毒素精密过滤器有什么要求

精密过滤是采用成型的滤材，原液通过滤材，滤渣留在滤材壁上，滤液透回过滤材流出，从答而达到过滤的目的。成型的滤材有：滤布、滤网、滤片、烧结滤管、线绕滤芯、熔喷滤芯、微孔滤芯及多功能滤芯。因滤材的不同，过滤孔径也不相同。保安精密过滤是介于砂滤（粗滤）与超滤之间的一种过滤，过滤孔径一般在0.1-120μm范围。同种形式的滤材，按外形尺寸又分为不同的规格。
过滤细菌内毒素对精密过滤器的要求主要在滤芯精度上，常规精密过滤器精度在5μm，细菌内毒素精密过滤器要求精度需要小于5μm，因此需要选择对应精度的滤芯，具体滤芯精度和滤芯材质的选择需要参考水质参数。

❸ 如何去除内毒素

问题一：如何去除质粒中的内毒素 内毒素，即脂多糖或LPS，是革兰氏阴性菌（如大肠杆菌）细胞膜的组成部分。细菌外膜的外层脂质部分是完全由内毒素分子所构成的。单个大肠杆菌细胞约包含两百万个LPS分子，每个LPS分子由疏水的脂质A（lipid A）部分、复杂的糖类残基阵列部分及负电性的磷酸基团所组成。因此，每个内毒素分子都具有疏水域、亲水域和电荷域，这使它在与其他分子相互作用时具有其独特的自身性质。细菌在其活性生长期向其周围微环境中散布少量的内毒素，在死亡时则释放大量内毒素。
在质粒制备的细菌细胞裂解过程中，内毒素分子被从外膜释放到溶菌液中。

去除内毒素

获得专利的EndoFree Pla *** id制备方法在标准的QIAGEN Pla *** id纯化方案中整合了对内毒素的去除步骤。使用QIAfilter Cartridge过滤中性的细菌裂解液，并加入专门的不含内毒素缓冲液（缓冲液ER）在冰上进行共同孵育。不含内毒素缓冲液能够避免LPS分子与QIAGEN-tip中散悄态的树脂结合，从而使每微克质粒DNA中含有的内毒素少于0.1EU。

问题二：怎样去除内毒素 您好，去除内毒素的方法很多，但要结合实际情况采用不同的方法，您是什么东西要除内毒素呢，比如玻璃试管，金属制品等可采用干热法（如250度干烤3场分钟），如果是液体的，可采用强酸强碱等处理，或根据内毒素的带点性及分子量等，可采用些特殊的方法。当然采用这些方法去除内毒素时的工艺等也还是有讲究的。

问题三：细菌内毒素引入途经及消除方法 细菌内毒素主要来自于细菌污染。也有可能是采购的原料被污染后灭菌处理残留。
消除的方法一般是高温处理，玻璃器皿250度或者180度处理。如果是样品珍贵的，也可以用去除内毒素的凝胶颗粒吸附。

问题四：怎样能去除水的的内毒素(求助) 去除水中的内毒素（热源），可以选用超纯水系统来去除。特别是在做细胞和组织培养、蛋白质分析和蛋白质纯化等实验时，内毒素（热源）的存在会直接导致培养物的污染而失败，为此，应该用超纯水系统来除实验室用水中的热源。如果进水为自来水，则一般的顺序是：1、预处理 2、RO（反渗透）3、初级纯化（离子交换）4、双波长UV灯消毒 5、超滤柱（去内毒素）6、终端过滤器（最后一道过滤）。这样得出的水就是实验室级超纯水，一定会符合你的需要。 现在生产超纯水的厂家很多，论售后服务等，比较优秀的 HEAL FORCE品牌，你可以运灶考虑考虑。

问题五：含蛋白溶液里面的内毒素如何去除 如果是大肠杆菌发酵后的蛋白溶液中内毒素的含量非常高，要去除需要进行多步处理，而且具体不同的蛋白处理的方法也不一样。

问题六：缓冲液如何去除内毒素 可以用以下2种方法:（仅供参考）
1) 先配好缓冲液,然后用超滤的方法(截留分子量一般10万,而且常以聚体形式存在.
2) 干烤>180度(通常选250度) 2-4小时,可以去除内毒素; 如果你的缓冲物质耐高温,可以考虑先干烤,再用无热源水配制缓冲液.

问题七：如何去除塑料制品中的内毒素 1用无水酒精清洗（无水乙醇），用布沾酒精轻轻擦拭便可去除。2找一块软质的绘图橡皮就可以搞定，用橡皮在有污迹的地方来回轻轻的擦，可擦得很干净。3用风油精倒一点到布上，就可以冲源清除了，对许多种不干胶的清除效果很好，你也可以试试。4用布蘸上防蚊用的“六神花露水”，擦起来很容易。5也可用指甲水擦拭试试，一般也很有效。

❹ 如何建立新药的细菌内毒素检查方法

[摘要] 目的：建立新药的细菌内毒素检查方法。方法：采用鲎试验检查法对新药中的细菌内毒素进行检查。结果：介绍了如何建立新药的细菌内毒素检查方法，重点是细菌内毒素检查限值的确认以及如何进行干扰试验。结论：细菌内毒素检查法为新药的质量控制以及应急检验提供了有益的基础。

[关键词] 新药；细菌内毒素检查法；干扰试验
[中图分类号] R927.12 [文献标识码] B [文章编号] 1673-7210（2011）11（b）-159-03

How to establish the method of bacterial endotoxin test for new drugs
XIAO Guinan, SUN Qingping, SHENG Yingmei
Guangdong Institute for Drug Control in Guangdong Province, Guangzhou 510180, China
[Abstract] Objective: To establish the method of bacterial endotoxin test for new drugs. Methods: Tachepleus amebocyte lysate test was applied to detect bacterial endotoxins in new drugs. Results: How to establish the method of bacterial endotoxin test for new drugs was introced, and especially focused on how to define the limit of bacterial endotoxins and carry out the interference test. Conclusion: Bacterial endotoxin test provides useful bases in quality control and emergency test for new drugs.
[Key words] New drugs; Bacterial endotoxin test; Interference test

新药以细菌内毒素检查方法代替既往的家兔热原检查法是一个趋势，在药害事件的应急处理中有一定的应用价值，这也符合国际上对动物实验的“3R”原则（优化、减少、替代）的要求。现行细菌内毒素检查方法是1968年美国科学家Levin和Bang所建立的鲎试验法[1]。从开展内毒素检查的现状来看，部分单位未能参照《中国药典》2010年版二部的要求进行实验和设计，本文着重介绍在建立新药细菌内毒素检查法中容易出现问题的细菌内毒素限值的确定及干扰试验这两个环节，力图为新药的质量控制以及应急检验提供有益的参考依据。
1 新药细菌内毒素检查限值的确认
1.1 细菌内毒素检查限值的计算公式
新药细菌内毒素检查限值（L）的确定是整个方法学建立的前提和基础，现在一般按照《中国药典》2010版二部附录XI E进行确定[2]。计算公式为L=K/M，K为人每千克体重每小时最大可接受的内毒素剂量，以EU/（kg・h）表示，非放射性注射剂K=5 EU/（kg・h），放射性注射剂K=2.5 EU/（kg・h），鞘内用注射剂K=0.2 EU/（kg・h）；M为人用每千克体重每小时的最大供试品剂量，成人体重按60 kg计算，体表面积为1.62 m2。部分抗肿瘤药物及抗生素的使用剂量以体表面积描述时，可将每平方米体表面积剂量乘以0.027，即可转换为每千克体重剂量。
1.2 细菌内毒素检查限值的确认程序
首先根据所研究的新药品种说明书，通过查阅最新版《临床用药须知》等相关权威资料，得到人用每千克体重每小时的最大供试品剂量（M值）并求出L值，将所求得的L值与相关的质量标准（《美国药典》、《英国药典》、《日本药局方》、《欧洲药典》）以及国家食品药品监督管理局颁布的转正标准或注册标准散件中关于该品种的细菌内毒素限值进行参考对比。
还有一种方法是参考该品种的热原检查剂量（可视为M值），因为热原剂量的设置一般为成人临床用量的1～3倍，与常用的安全系数3～10倍较为接近，这种参考热原检查剂量的做法在以前颇为盛行，现在已逐渐少用。
1.3 细菌内毒素限值计算的常见误区
1.3.1 将成人日均用量误作最大用量 大多数情况下，说明书或资料往往只提供了某药的单次或每日用量，实践中不少人往往将单次用量误作最大用量进行限值计算，所得限值明显偏宽。众所周知，除极少数情况（急性、重症患者用药）下的单次用量可作为最大用量外，多数情况的日常用量换算成最大用量，还需考虑一定的安全系数（一般取3～10倍）。
1.3.2 误将每日总用量当成每次最大用量 只根据说明书或资料提供的某药的每日总用量，未考虑该药品总量的静脉滴注时间已经远不止1 h，这样求得的限值难于真实反映实际限值，因为M值是反映人用每千克体重每小时能接受的最大供试品剂量，而非全日的总用量。
1.3.3 对于大输液的细菌内毒素限值确定过于按部就班 没有考虑大输液的特殊要求，大输液的主药成分只占其中很少的一部分，实际多为葡萄糖注射液或生理盐水注射液，如果按主药成分计算细菌内毒素限值的话，容易偏宽，因而如无特殊情况一般将热原检查剂量10 ml/kg视为最大临床用量，将大输液细菌内毒素限值定为0.5 EU/ml。
1.3.4 忽视滴注时带入的外源性细菌内毒素 某些新药在临床使用时是溶于大输液进行滴注的。假设某抗生素药品的规格是1 g/支，其使用方法是溶于5%葡萄糖注射液250 ml，在1 h内滴注完毕。可参照下述方法计算该抗生素细菌内毒素限值，此时K=5 EU/（kg・h），因而60 kg的成人每小时体内可以接受细菌内毒素的最大量为300 EU，而在1 h内250 ml的5%葡萄糖注射液最大可带来125 EU的细菌内毒素，1 g的该药最多只能带入175 EU（125～300 EU）的细菌内毒素，因而该抗生素其细菌内毒素限值可定为0.175 EU/mg。如果按常规计算的话，求得限值为0.300 EU/mg。
1.3.5 没有考虑到主药外的其他成分 在细菌内毒素限值的确定过程中，特别是原料，要注意扣除主药外的其他成分（如金属离子：头孢噻肟钠中的钠，西司他丁钠中的钠），因为标准一般规定为每毫克中头孢噻肟或西司他丁所含的细菌内毒素量不得过多少EU，而制成的原料往往是含钠等其他成分的。
2 鲎试剂灵敏度复核试验
2.1 前期准备工作
试验所用的器皿需经处理，以去除可能存在的外源性内毒素。若使用塑料器械，如微孔板和与微量加样器配套的吸头等，应选用标明无内毒素并且对试验无干扰的器械。耐热器皿常用干热灭菌法（250℃，30 min以上）去除，部分物品也可采用其他确证不干扰细菌内毒素检查的适宜方法（如强酸强碱浸泡法），但需经过确证不干扰鲎试验检查。
2.2 灵敏度复核试验

当使用新批号的鲎试剂或试验条件发生了任何可能影响检验结果的改变时，应进行鲎试剂灵敏度复核试验。需要注意的是，当实测灵敏度λc在0.5λ～2.0λ（包括0.5λ～2.0λ，λ为鲎试剂灵敏度的标示值）时，方可用于细菌内毒素检查，并以标示灵敏度λ为该批鲎试剂的灵敏度，日常检验中部分检验者误将实测的灵敏度作为批鲎试剂的灵敏度来进行常规检查或干扰试验。
3 鲎试验检查的干扰试验
3.1 最大有效稀释倍数（MVD）的确认
MVD是指在试验中供试品溶液被允许达到稀释的最大倍数，计算公式为MVD=C・L/λ，式中L为供试品的内毒素限值，λ为鲎试剂的标示灵敏度（EU/ml），或是在光度测定法中所使用的标准曲线上最低的内毒素浓度；C为供试品液的浓度，当L以EU/ml表示时，则C等于1.0；如供试品为注射用无菌粉末或原料药，则MVD取1，可计算供试品的最小有效稀释浓度C=λ/L。
此处往往根据市售主要的鲎试剂灵敏度范围（0.03～1.00 EU/ml）来计算干扰试验中的有效浓度稀释范围。
3.2 干扰预试验
取本品1支（原料精密称取不低于10 mg的量），按照拟定内毒素限值，原料或注射用粉针加内毒素检查用水溶解并稀释至不超过MVD规定的系列浓度，注射液直接稀释至不超过最小有效稀释浓度的系列浓度，预试验时一般可取一个厂家灵敏度为0.125 EU/ml或0.250 EU/ml的鲎试剂，对供试品原液及其系列稀释液（供试品阴性对照，NPC）进行干扰检验，另外设立阳性对照（PC）、阴性对照（NC）、供试品阳性对照（PPC），每个浓度平行做两管，最终得出供试品（批号：20100802）在某浓度及以下浓度对鲎试验检查不产生干扰作用（PPC首次出现“++”的浓度）的结论。供试液的干扰预试验结果，见表1。
由表1可以看出，供试品在不高于20 mg/ml的浓度下不干扰鲎试验的检查。
3.3 正式干扰试验
按表2制备各系列溶液，使用的供试品溶液应为未检验出内毒素且不超过MVD的溶液，参照鲎试剂灵敏度复核试验项下操作，记录供试液的干扰情况。

只有当供试品溶液和阴性对照溶液的平行管都为阴性，且鲎试剂标示灵敏度的对照系列溶液的结果在鲎试剂灵敏度范围内时，试验方为有效，计算系列鲎试剂标示灵敏度的对照系列溶液和干扰试剂系列溶液的反应终点浓度的几何平均值（Es和Et）。当Es在0.5λ～2.0λ及Et在0.5Es～2.0Es时，认为供试品在该浓度下无干扰作用。若供试品溶液在小于MVD的稀释倍数下对试验有干扰，应将供试品溶液进行不超过MVD的进一步稀释，再重复干扰试验。
当进行新药的内毒素检查试验前或无内毒素检查项的品种建立内毒素检查法时，须进行干扰试验；当鲎试剂、供试品的处方、生产工艺改变或试验环境中发生了任何有可能影响试验结果的变化时，须重新进行干扰试验。
4 排除供试液干扰的方法[3]
4.1 样品稀释法
选用较高灵敏度的鲎试剂，将供试品进一步稀释（低于最大有效稀释倍数）后进行干扰试验，一般情况下大部分的干扰作用均能得到有效控制。
4.2 调节pH法
测定供试液的pH值，若不在鲎试剂的有效缓冲pH范围（6.0～8.0），可选用一定浓度的HCl或NaOH将pH值调节至6.0～8.0，但要注意应进行方法学验证（干扰试验），确保不干扰鲎试验检查，且对内毒素检查结果无影响。
4.3 超滤法
通过专用超滤系统，将影响内毒素检查的药物小分子杂质滤除，内毒素则留存于滤器内，滤器内加入相应的内毒素检查用水进行检查，可在几乎不影响内毒素浓度的前提下尽量避免小分子药物的干扰作用。
4.4 其他方法
微温保持加热法；使用去G因子鲎试剂或厂家提供的专用抗增液对样品进行稀释（此时须进行干扰试验）。
5 常规检查
使用最大有效稀释倍数（MVD） 并且已经排除干扰的供试品溶液来制备溶液供试品溶液和供试品阳性对照溶液，进行细菌内毒素的常规检测。
6 讨论
建立新药品种的细菌内毒素检查法，首先要结合临床最大用量确定其细菌内毒素限值，应用两个厂家的鲎试剂对3批样品进行鲎试验检查（普通凝胶法或动态浊度法定量试验），如结果能证实样品在不低于最大有效稀释浓度时对细菌内毒素检查无干扰作用，且样品的细菌内毒素常规检查结果为阴性，此时方可建立该品种的细菌内毒素检查法[4-7]。
根据临床最大用量规定及实验结果，将所研究的新药细菌内毒素限值定为每毫克主药（或每毫升）中含内毒素的量应小于若干EU。经干扰实验确证，该新药在某个浓度或低于该浓度时（但不低于最大有效稀释浓度MVC）对细菌内毒素检查无干扰作用。取本品3批，按拟定的标准检验，其内毒素检查结果均符合规定。

❺ 内毒素去除方法

注射用水内毒素超标的因素有三个：1、注射用水管道受污染：2、注射用水管道不密封：3、出水口污染未清洗干净

❻ 0.22除菌级滤膜能不能除去细菌内毒素

能去除一部分，0.22微米的滤膜孔径是正态分布的不是绝对的过滤孔径，因此会有一些内毒素会透过！建议采用6000道尔顿的超滤膜来去除

❼ 举例几种热原的去除方法

使用UF法的注射用水生产设备：

使用UF法生产注射用水的设备，可通过截留分子量6,000以下的UF膜组件对精制水进行过滤，从而获取注射用水3）（图1）。在UF系统中，精制水以十字流过滤方式3）（交叉流动过滤，图2）在UF膜组件中循环，精制水中的微生物以及热原物质通过UF膜表面的微孔进行阻隔。