⑴ 我想买Merck默克液相色谱柱,但不清楚默克液相色谱柱具体有哪些类型产品,求解答,谢谢
1 液-固吸附色谱
固定相:固定吸附剂为,如硅胶、氧化铝等,较常使用的是5~10μm的硅胶吸附剂;
流动相:各种不同极性的一元或多元溶剂。
分离原理:组分在固定相吸附剂上的吸附与解吸;
适用于分离相对分子质量中等的油溶性试样,对具有官能团的化合物和异构体有较高选择性;
缺点:非线形等温吸附常引起峰的拖尾;
2 液-液分配色谱
固定相与流动相均为液体(互不相溶)
分离原理:组分在固定相和流动相上的分配
流动相:对于亲水性固定液,采用疏水性流动相,即流动相的极性小于固定液的极性(正相 normal phase),反之,流动相的极性大于固定液的极性(反相 reverse phase)。正相与反相的出峰顺序相反;
固定相:早期涂渍固定液,固定液流失,较少采用
化学键合固定相:(将各种不同基团通过化学反应键合到硅胶(担体)表面的游离羟基上。C-18柱(反相柱)
3 离子交换色谱
固定相:阴离子离子交换树脂与阳离子离子交换树脂
流动相:阴离子离子交换树脂作固定相,采用酸性水溶液;阳离子离子交换树脂作固定相,采用碱性水溶液
分离原理:组分在固定相上发生的反复离子交换反应;组分与离子交换剂之间亲和力的大小与离子半径、电荷、存在形式等有关。亲和力大,保留时间长;
阳离子交换:R-SO3H+M+ = R-SO3M+ H+
阴离子交换:R-NR4OH + X - =R-NR4X+ OH-
应用:离子及可离解的化合物,氨基酸,核酸等。
4 离子色谱
离子色谱是在20世纪70年代中期发展起来的一种技术,其与离子交换色谱的区别是其采用了特制的、具有较低交换容量的离子交换树脂作为柱填料,并采用淋洗液抑制技术和电导检测器,是测定混合阴离子的有效方法。
固定相:交换容量非常低的特制离子交换树脂
分离原理:离子交换原理
5 离子对色谱
分离原理:将一种(或多种)与溶质离子电荷相反的离子(对离子或反离子)加到流动相中使其与溶质离子结合形成疏水性离子对化合物,使其能够在两相之间进行分配
阴离子分离:常采用烷基铵类,如氢氧化四丁基铵或氢氧化十六烷基三甲胺作为对离子
阳离子分离:常采用烷基磺酸类,如己烷磺酸钠作为对离子
反相离子对色谱:非极性的疏水固定相(C-18柱),含有对离子Y+的甲醇-水或乙腈-水作为流动相,试样离子X-进入流动相后,生成疏水性离子对Y+X-后:在两相间分配
6 排阻色谱
固定相:凝胶(具有一定大小孔隙分布)
分离原理:按分子大小分离。小分子可以扩散到凝胶孔隙,由其中通过,出峰最慢。中等分子只能通过部分凝胶孔隙,中苏通过;而大分子被排斥在外,出峰最快;溶剂分子小,故在最后出峰。
全部在死体积前出峰;
可对相对分子质量在100-105范围内的化合物按质量分离。
7 亲和色谱
分离原理:利用生物大分子和固定相表面存在的某种特异性亲和力,进行选择性分离。
先在载体表面键合上一种具有一般反应性能的所谓间隔臂(环氧、联胺等),再连接上配基(酶、抗原等),这种固载化的配基将只能和具有亲和力特性吸附的生物大分子作用而被保留,改变淋洗液后洗脱。
具体信息请参考:http://www.labgou.com/ke/?p=247
⑵ 强阳离子交换和弱阳离子交换的区别
这是包含关系。质子交换膜是阳离子交换膜中的一种。阳离子交换膜可能透过除了质子的其他阳离子
⑶ 蛋白等电点怎么知道,比如是13左右,是选强阳离子交换柱吗
这个等电点挺高的,弱阳就行,太强容易使蛋白变性。
⑷ 强阳离子交换(SCX)色谱柱与以强阳离子交换键和硅胶为填充剂的柱子有什么区别
强阳离子交换(SCX)色谱柱与以强阳离子交换键和硅胶为填充剂的柱子有什么区别
⑸ 聚合物填料色谱柱适合分离什么样品
液相色谱柱的分类:(按色谱固定相基质分)
一.硅胶基质:
1.反相色谱柱:
反相色谱填料常是以硅胶为基础,表面键合有极性相对较弱的官能团的键合相。
反相色谱所使用的流动相极性较强,通常为水,缓冲液与甲醇,已腈等混合物。
样品流出色谱柱的顺序是极性较强组合最先被冲出,而极性弱的组份会在色谱柱上有更强的保留。
常用的反相填料有C18(ODS)、C8(MOS)、C4(B)、C6H5(Phenyl)等。
2.正相色谱:
正相色谱用的固定相通常为硅胶(Silica),以及其他具有极性官能团,如胺基团(NH2,APS)和氰基团(CN,CPS)的键合相填料。
由于硅胶表面的硅羟基(SiOH)或其他团的极性较强,因此,分离的次序是依据样品中的各组份的极性大小,即极性强弱的组份最先被冲洗出色谱柱。
正相色谱使用的流动相极性相对比固定相低,如:正乙烷(Hexane),氯仿(Chloroform),二氯甲烷(Methylene Chloride)等。
3.离子交换色谱柱:以磺化交联强阴/阳离子键合硅胶色谱柱,常用规格:强阴离子色谱柱(SAX),强阳离子交换色谱柱(SCX)
二 .聚合物基质:
聚合物调料多为聚苯乙烯-二乙烯基苯或聚甲基丙酸酯等,其主要优点是在PH值为1~14均可使用。相对与硅胶基质的C18填料,这类填料具有更强的疏水性;大孔的聚合物填料对蛋白质等样品的分离非常有效。现在的聚合物填料的缺点是相对硅胶基质填料,色谱柱柱效较低。
三.其他无机填料:
其它HPLC的无机填料色谱柱也已经商品化。由于其特殊的性质,一般仅限于特殊的用途。如石墨化碳也用于正逐渐成为反相色谱填料。这种填料的分离不同与硅胶基质烷基键合相,石墨化碳的表面即是保留的基础,不再需其它的表面改性,该柱填料一般比烷基键合硅胶或多孔聚合物填料的保留能力更强,石墨化碳可用于分离某些几何导构体,又由于HPLC流动相中不会被溶解,这类柱可在任何PH与温度下使用。氧化铝也可用于HPLC,
氧化铝微粒刚性强,可制成稳定的色谱柱柱床,其优点是可在PH高达12的流动相中使用。
但由于氧化铝与碱性化合物作用也很强,应用范围受到一定的限制,所以未能广泛应用,新型氧化锆填料也可用于HPLC,商品化的仅有聚合物涂层的多孔氧化锆微球色谱柱,应用PH范围1~14,温度可达100℃。由于氧化锆填料几年才开始研究,加之面临的实验难度,其重要用途与优势尚在进行中。
⑹ 反相色谱中,为什么要平衡色谱柱
如果你用的来是一般的液相色谱仪,自需要很长的时间平衡柱子和系统,因为离子交换柱对流动相中的离子很敏感,一般的液相色谱仪内壁是金属的,多会产生离子或静电荷,对分析造成干扰。推荐用离子色谱仪,或氨基酸分析仪,不过也要平衡一定的时间