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美国chewyEDI系统

发布时间:2021-12-06 04:31:16

① chew back啥意思

不知道是不是DNA连接方面的,Chew-back是一种DNA的组装方式。
单链退火拼接技术,即所谓的Chew-back组装,是指创造DNA分子之间的重叠区,通过连接或聚合的思想实现分子间的拼接。这种技术既跳出了限制酶的使用,利用DNA外切酶产生了较长的黏性末端;又应用等级化组装模式很好地规避了逐级添加的耗时耗力与一次性组装可能不正确的拼接,使得无论在组装的DNA片段数目还是尺度上变得更为高效。例如目前最常用的Gibson
assembly和SLIC技术。
在2008年,Gibson等在构建生殖道支原体基因组时,首先采用自创的体外变温两步组装法获得了支原体1/4大小基因组,然后对该技术进行改进,将这4个超过100
kb的片段在体外组装成了完整的583 kb的生殖支原体基因组。2010年,Gibson研究组又通过条件优化将600个带有20 bp重叠序列的60
bp的寡核苷酸在体外成功人工组装合成了16.3 kb的小鼠线粒体基因组。

由此可见,Gibson拼接技术可以简单快速地实现多个DNA片段的一次性无缝组装,而且组装尺度非常可观,现已成功组装的最大的DNA分子大小为1.08
Mb。但是随着一次组装的DNA片段的增多,其效率和正确率也会随之降低,而且需要的重叠序列也较长,引物合成的费用也相应增加。
SLIC是一种不依赖于序列和连接反应的克隆方法,主要利用T4
DNA聚合酶在无dNTPs存在的情况下发挥3′→5′核酸外切酶活性,将DNA片段消化产生含有末端重叠序列的5′黏性末端,然后DNA片段之间或DNA片段与载体之间依靠重叠序列退火(Rec
A可提高重组效率),形成环状中间体,最后直接转化大肠杆菌感受态细胞,利用大肠杆菌本身的修复系统修复成完整的环状重组质粒
。2009年,美国哈佛医学院的StephenElledge研究组利用SLIC实现了9个含40 bp末端重叠序列的DNA片段(275-980
bp)的一步拼接。
SLIC拼接法不需要连接酶,也不需要考虑插入的DNA片段本身的序列,可以实现多个DNA片段的一次性组装,是构建生物合成途径的一个有效技术。目前,国外许多公司已经将其商业化,例如Novagen公司的RadianceTM系统和Invitrogen公司的GatewayTM系统都是基于此技术开发出来的。相对于上述Gibson
assembly技术而言,SLIC只需要一种酶(T4 DNA聚合酶)即可完成多片段组装,而Gibson
assembly则需要T5核酸外切酶、DNA聚合酶及Taq连接酶的协同作用。但是该技术只能组装中等尺度的DNA片段,而Gibson
assembly则可以组装高达580 kb的DNA大片段。

此外,In-FusionTM Cloning也是一种与SLIC类似的不依赖于连接反应的组装技术,不同的是In-FusionTM
Cloning使用的是一种功能类似的牛痘DNA聚合酶而非T4 DNA聚合酶,而且它只需要15 bp的重叠序列,而SLIC则需要至少40 bp的重叠序列。目前Gibson有商业化的试剂盒。
详细内容可见网址:
http://journals.im.ac.cn/html/wswxtbcn/2015/11/tb15112229.htm

② Yeti,Bigfoot and the wild man of shennongjia全文翻译

雪人,大脚和几个世纪以来神农架的野蛮人,有人报告说看到一个野生生物在喜马拉雅山叫做雪人。雪人是说是一个巨大的,毛茸茸的动物,用两只脚走路像个人类。人们相信雪人有时从山上下来袭击村民。1998,美国登山者说,他看到在喜马拉雅山脉的中国一侧的雪人。“它走路像人类,但它有厚厚的黑色的皮毛,大约有六英尺高,具有巨大的肩膀,很长的臂和大的手,”他说。2007,美国电视团队看到雪人轨道33厘米长在珠穆朗玛峰附近的雪。他们把这些轨道的副本,有一位科学家在美国。他说他们看起来像一个类似的生物,轨道叫大脚研究,一些人相信在美国西北部森林大脚雪人和生活是类似于一个被称为神农架的野蛮人。有报道说,有人在湖北省西部的神农架自然保护区野生几十个中国人看见。在一个案例中,一组工程师追赶野人,走以惊人的速度和体力。大型轨道也被发现,有些人说属于野生人。由于这些报告和跟踪,已经有几个组织寻找这种生物,但它的存在没有强有力的证据已被发现。Grover Krantz博士,华盛顿州立大学的一名科学家,研究了许多年这样的奇怪生物的报告。他确信他们的存在。他认为,这些生物都连接到一个共同的祖先,一种生活在300000年前的亚洲。在他看来,这种动物的方式作出了世界的其他部分,并继续生存,即使在今天。科学家们希望有一天能够解决的谜。如果这种生物真的存在,我们或许有机会亲眼看见。

③ chew 和chaw用法有什么不同吗

在名词以及动词形式上以chaw 代替 chew 的用法, 在美国分得尤为普遍,就发音上来说出现在从新英格兰南到海湾各州,整个中西部地区,以及往西直到科罗拉多和加利福尼亚。Chaw 在地区用法上意义范围很广。 动词的一个意义是“痛骂,大声训斥”: 他把她狠狠了骂了一顿。 在南部它指“在互相取笑中占了某人的上风”或者简单地指“使难堪”: “那句称赞让我有些难堪” (美国方言协会出版物)。Chaw 用作名词可以指“一撮咀嚼的烟草”或者“(对某人的)爱慕或占有”; 例如,一个中南部的卖弄风情的女人 “设法让一个小伙子迷上她” (方言笔记)。在本世纪初爱尔兰移民们寻找工作的地区,chaw 是对爱尔兰人的贬称

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