⑴ 岛津液相色谱仪的问题。
目前液相色谱复只有极制少数可以用超纯水冲洗，一般的C8和C18柱都不能用纯水冲水，即使是说明书说可以用超纯水清洗，也不益这么做，这样易造成填料坍塌。泵压高，这是很正常，但不建议用大流量冲冼，一般情况不能超过泵能承受的压力，比泵的最高承受压力低10Mpa。即使用纯的甲醇和乙腈，虽压力不会过线，但最好不要这样用，因为这样容易造成柱的填料坍塌，
⑵ 大连江申液相色谱仪LC-10P使用说明书
高效液相色谱仪使用说明
型号：LC-10AT 产地 日本岛津 型号： L C - 10A T 高效液相色谱仪是日本岛津公司 1996 年的产品, 检测器为可变波长紫外检测 器, 色谱柱为岛津公司的 ODS - C18 。 2. 用途： 用途： 高效液相色谱法只要求样品能制成溶液, 不受样品挥发性的限制,流动相可选择的范围宽, 固定相的种类繁多,因而可以分离热不稳定和非挥发性的、 离解的和非离解的以及各种分子 量范围的物质。 与试样预处理技术相配合，HPL C 所达到的高分辨率和高灵敏度，使分离和同时测定 性质上十分相近的物质成为可能， 能够分离复杂相体中的微量成分。 随着固定相的发展, 有 可能在充分保持生化物质活性的条件下完成其分离。由于 HPL C 具有高分辨率、高灵敏 度、速度快、色谱柱可反复利用, 流出组分易收集等优点,因而被广泛应用到生物化学、食 品分析、医药研究、环境分析、无机分析等各种领域。高效液相色谱仪与结构仪器的联用 是一个重要的发展方向。 3. 测定原理 高效液相色谱仪的系统由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成。 储液器中的流动相被高压泵打入系统， 样品溶液经进样器进入流动相,被流动相载入色谱柱 (固定相) 内, 由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数, 在两相中作相对运 动时, 经过反复多次的吸附- 解吸的分配过程, 各组分在移动速度上产生较大的差别, 被 分离成单个组分依次从柱内流出, 通过检测器时, 样品浓度被转换成电信号传送到记录 仪，数据以图谱形式打印出来。 4. 使用方法 4.1 系统组成：本系统由 1 个 LC-10ATvp 溶剂输送泵、Rheodyne 7725i 手动进样阀、 SPD-10Avp 紫外-可见检测器、色谱数据工作站和电脑等组成，另外还包括打印机、不间 断电源等辅助设备。 4.2 准备 4.2.1 准备所需的流动相，用合适的 0.45?m 滤膜过滤，超声波脱气 20min。 4.2.2 根据待检样品的需要更换合适的洗脱柱（注意方向）和定量环。 4.2.3 配制样品和标准溶液（也可在平衡系统时配制） ，用合适的 0.45?m 滤膜过滤。 3.2.4 检查仪器各部件的电源线、数据线和输液管道是否连接正常，特别注意输液管道内 是否有气泡。 4.3 开机：接通电源，依次开启不间断电源、溶剂输送泵、先将机器预热半小时，这时 的流动相用 85％甲醇溶液（已脱气） ，而且要时刻注意输液管道内是否有气泡，如有气泡 要进行排气。预热半小时后，开启检测器，待检测器自检结束后，打开打印机、电脑显示 器、主机，最后打开色谱工作站。 4.4 各种参数设定 4.4.1 波长设定：在检测器显示初始屏幕时，按[func]键，用数字键输入所需波长值，按 [Enter]键确认。按[CE]键退出到初始屏幕。 4.4.2 流速设定：在输送泵显示初始屏幕时，按[func]键，用数字键输入所需的流速（柱在 线时流速一般不超过 1ml/min） ，按[Enter]键确认。按[CE]键退出。 4.5 更换流动相并排气泡 4.5.1 将输送管道的吸滤器放入装有准备好的流动相的储液瓶（已排气）中； 4.5.2 逆时针转动泵的排液阀 180 度，打开排液阀； 4.5.3 按泵的[purge]键，pump 指示灯亮，泵大约以 2ml/min 的流速冲洗，3min（可设定） 后自动停止； 4.5.4 将排液阀顺时针旋转到底，关闭排液阀。 4.5.5 如管路中仍有气泡，则重复以上操作直至气泡排尽。 4.5.6 如按以上方法不能排尽气泡，从柱入口处拆下连接管，放入废液瓶中，设流速为 5ml/min，按[pump]键，冲洗 3min 后再按[pump]键停泵，重新接上柱并将流速重设为规定 值。 4.6 平衡系统 4.6.1 按《大连江申色谱数据工作站操作规程》打开“在线色谱工作站”软件，输入实验信 息并设定各项方法参数后，按下“数据收集”页的 [查看基线] 按钮。 4.6.2 等度洗脱方式 4.6.2.1 按输送泵的[pump]键，泵启动，pump 指示灯亮。用检验方法规定的流动相冲洗系 统，一般最少需 6 倍柱体积的流动相。 4.6.2.2 检查各管路连接处是否漏液，如漏液应予以排除。 4.6.2.3 观察泵控制屏幕上的压力值，压力波动应不超过 1MPa。如超过则可初步判断为柱 前管路仍有气泡，按 3.5 操作。 4.6.2.4 观察基线变化。如果冲洗至基线漂移<0.01mV/min，噪声为<0.001mV 时，可认为 系统已达到平衡状态，可以进样。 4.7 测定步骤 4.7.1 计算校正因子 4.7.1.1 用编辑∈实验参数编辑实验参数在编辑实验参数时， 纪录图谱名要按照校正文件名 的格式输入 xxxx0101. 4.7.1.2 用编辑∈积分定量参数对话框，选择单点外标法 4.7.1.3 用编辑∈报告参数对话框编辑好相应的参数，选择校正实验检查框 4.7.1.4 用编辑∈校正∈校正实验参数对话框编辑相应的校正参数及方式， 校正文件名前缀 必须与编辑∈实验参数的文件名前 4 位一致 4.7.1.5 用编辑∈校正编辑定量峰表对话框编辑需要的校正的色谱峰的保留时间、样品名、 每点的含量、峰标志及误差，编辑完成后确认，以后∈校正∈计算校正因子命令利用定量 峰表进行峰的匹配及计算。 4.7.1.6 用∈操作∈数据采集功能进行求校正因子的实验，将标准样品进样，进样前按检测 器[zero]键调零，按软件中 [零点校正] 按钮校正基线零点，再按一下 [查看基线] 按钮使 其弹起。 4.7.1.7 用∈操作∈峰检测功能对图谱进行峰检测， 完成后用∈操作∈校正∈计算校正因子 及绘制标准曲线。 4.7.2 进样 4.7.2.1 进样前按检测器[zero]键调零，按软件中 [零点校正] 按钮校正基线零点，再按一 下 [查看基线] 按钮使其弹起。用试样溶液清洗注射器，并排除气泡后抽取适量 4.7.2.2 进行样品分析，用∈操作∈数据采集对样品进行数据采集，并把编辑∈报告参数把 校正文件名填入校正文件名编辑框，然后进测定样。 4.7.2.3 用∈操作∈峰检测， 对采集的色谱峰进行检测， 之后工作站自动装入外标因子文件， 计算出含量。 4.7.2.4 打印报告 用∈打印∈打印分析报告，打印机输出分析报告。 4.8 关机 样品测定结束后，将检测器关机，将输送管道的吸滤器放入装有 85％甲醇溶液（已脱气） 的储液瓶，进行测定系统清洗，半小时后关机。 5. 注意事项 5.1 流动相内有气泡, 关闭泵, 打开泄压阀, 打开 purge 键, 清洗脱气, 气泡不断从过滤器冒 出, 进入流动相, 无论打开 purge 键几次,都无法清除不断产生的气泡。 原因过滤器长期沉浸于乙酸铵等缓冲液内, 过滤器内部由于霉菌的生长繁殖,形成菌团, 阻塞了过滤器,缓冲液难以流畅地通过过滤器,空气在泵的压力作用下经过滤器进入流动 相。 处理过滤器浸泡于 5 %硝酸溶液中,超声清洗几分钟即可;亦可将过滤器浸泡于 5 %硝酸 溶液中 12～36 小时, 轻轻震荡几次, 再将过滤器用纯水清洗几次, 打开泄压阀, 打开 p urge 键,清洗脱气, 如仍有气泡不断从过滤器冒出, 继续将过滤器浸泡于 5 %硝酸溶液中, 如没有气泡不断从过滤器中冒出,说明过滤器内部的霉菌菌团已被硝酸破坏, 流动相可以 流畅地通过过滤器。打开泄压阀,打开泵,流速调至 1. 0～3. 0ml/ min ,纯水冲洗过滤器 1 小 时左右。即可将过滤器清洗干净。关闭泄压阀,纯甲醇冲洗半小时即可。 5.2 柱压高原因(1) 缓冲液盐分如(乙酸铵等) 沉积于柱内; (2) 样品污染沉积。 处理对于第一种情况先用 40～50 ℃的纯水,低速正向冲洗柱子, 待柱压逐渐下降后, 相 应提高流速冲洗, 柱压大幅度下降后, 用常温纯水冲洗, 之后用纯甲醇冲洗柱子 30 分钟; 对于第二种情况,由样品的沉积引起污染的 C18 柱,和纯水反向冲洗柱子, 然后换成甲醇冲 洗, 接着用甲醇+ 异丙醇(4 + 6) 冲洗柱子(冲洗时间的长短由样品污染的情况而定) , 再用 换成甲醇冲洗, 然后用纯水冲洗, 最后甲醇冲洗正向冲洗柱子 30 分钟以上。 5.3 既无压力指示,又无液体流过 原因(1) 泵密封垫圈磨损; (2) 大量气泡进入泵体。 处理对于第一种情况,更换密封垫圈;对于第二种情况,在泵作用的同时, 用一个 50ml 的 玻璃针筒在泵的出口处帮助抽出空气。 5.4 压力波动大,流量不稳定. 原因系统中有空气或者单向阀的宝石球和阀座之间夹有异物,使得两者不能密封。 处理工作中注意观察流动相的量, 保证不锈钢滤器沉入储液器瓶底,避免吸入空气,流动 相要充分脱气[2 >。 如为单向阀和阀座之间夹有异物, 拆下单向阀, 放入盛有丙酮的烧杯用 超声波清洗. 5.5 出峰不佳,峰分叉。 原因(1) 色谱柱被污染; (2) 柱头填料塌陷。 处理对于第一种情况, 先用纯水反向冲洗柱子, 然后换成甲醇冲洗, 接着用甲醇+ 异丙 醇(4 + 6) 冲洗柱子(冲洗时间的长短由样品污染的情况而定) , 再换成甲醇冲洗, 然后用纯 水冲洗,最后甲醇冲洗正向冲洗柱子 30 分钟以上。 如冲洗后依然出峰不佳,则考虑第二种情 况。对于第二种情况,拧开柱头,检查柱填料是否硬结或塌陷。去除硬结部分(污染的填料) , 装入新填料, 滴一滴甲醇, 填料下陷, 再填, 用与柱内径相同的顶端平滑的不锈钢杆压紧, 再填平, 滴甲醇, 再压紧反复几次, 直至装满填平[2 >。柱头用甲醇冲洗干净, 擦净柱外壁 的填料, 拧紧柱头,用纯甲醇冲洗 30 分钟以上。 5.6 峰面积重复性不佳。 原因(1) 进样阀漏液; (2) 加样针不到位。 处理对于第一种情况更换进样阀垫圈; 对于第二种情况保证加样针插到底,注射样品溶 液后须快速、平稳地从 LOAD 状态转换到 INJ EC T 状态,以保证进样量的准确。日常工 作中, 液相色谱仪的保养非常重要, 如要注意不要让空气进入输液系统和高压泵中, 储液 器内的溶液如长时间未用应清洗储液器并更换溶液, 每次用完色谱仪后缓冲液要用纯水冲 洗干净,防止无机盐析出或沉积; 样品的前处理也很重要,任何样品都要尽可能地去除杂质, 完全溶解, 尽量减少对色谱柱的污染, 以延长色谱柱的使用寿命, 同时避免注射过浓的样 品溶液, 以免残留液在进样阀内析出固体引起堵塞; 色谱柱作好标记,用于不同分析目的 的色谱柱不要混用等。
⑶ 高效液相色谱比例阀堵了，工程师让用异丙醇冲，想问是冲有问题的通道还是怎么做，求具体操作步骤
首先说一下原理：异丙醇的粘度比较高。如果是不溶性微粒，或者气泡之类的东西堵住了管路，异丙醇可以把他们粘下来。
第二，如果是比例阀堵了。建议四个管路都冲，每个管路25%。如果是某一个管路堵了，那就单独冲洗这一个通道就可以。
第三，冲洗方法：先把色谱柱卸下来，换上两通。异丙醇对色谱柱有伤害。最好不要过柱子。如果系统中有流动相，先用10%的甲醇水冲洗掉，免得无机盐遇到异丙醇之后盐析。然后排气，慢慢地升高流速。有可能柱压会很高，要冲一会儿才能提高流速。我不知道工程师是怎么说的，要多少的流速，冲多久，记得注意压力变化。如果压力下降了，那么可能就是冲开了。