反相色谱法为什么不用加纯水

❶ 液相色谱里面能只用水做流动相吗

这个得看你的色谱柱。
一般的反相色谱柱不耐纯水。如果用的话会特别费。专
我当初做过属一个实验，流动相是0.025mol/L的KH2PO4，色谱柱是C18柱，大概半个月换一根吧。
特殊的色谱柱可以耐受纯水，但是可能分离效果不好，峰型也不一定好。

另外，纯水很 容 易 长微生物。一般纯净水开瓶之后在25℃放置1天，过滤的速度就会缓慢，放三天就浑浊了。如果你的流动相是纯水，那么系统、色谱柱很容易堵塞。所以不建议使用。

❷ 苯基键合硅胶色谱柱柱为什么不能用纯水冲洗

这个问题比较难回答。因为注意的东西比较多，比如：
首先是色谱柱的方向问题。大多数色谱柱会标明方向。这个傻子都知道，安装的时候要顺着方向安装。不过也有一些色谱柱没有方向，这些是双相填料的色谱柱。第一次使用时的方向就是它的方向。不过所有的色谱柱都是，一旦开始使用，就不要转换方向。这样会损毁色谱柱。
第二个是柱压问题。一般的色谱柱压力最好不要超过20MPa，压力过高会加速损毁色谱柱。
第三，柱温。色谱柱温度最好不要超过45℃。也是会加速损毁色谱柱。
还有pH值。色谱柱的pH值范围是不同的。大多数色谱柱的pH值范围是4-7左右。有些偏向酸性，有些偏向碱性的，还有一些pH值广泛的。这些按照说明书操作即可。

除此之外，色谱柱还有别的一些需要注意的事情。
首先，键合硅胶色谱柱分成几种。比如C18、C8、苯基柱这些的使用方法都差不多。是反相色谱柱。它们的流动相中还有大量的水，还有无机盐。这个时候需要注意，无机盐是不能够长时间留在色谱柱里面的。色谱柱最好保存在纯甲醇或者纯乙腈里面。但是无机盐不能溶于纯甲醇或者纯乙腈。所以中间要过渡甲醇水或者乙腈水。
而有些色谱柱比较特殊，比如氨基柱、氰基柱。他们是可以用于正相，也可以用于反相。所以使用的时候注意区分。配置流动相的时候也避免使用大量的水相。

其他的暂时想不到。或者说你想问的问题可以提出来，大家讨论讨论。

❸ 何谓正相色谱和反相色谱在应用上有什么特点

1、正相色谱基本上可以被看做是液固吸附色谱，其柱填料是吸附剂，其表面上分布有活性吸附位点，溶剂和溶质分子均能被吸附于活性位点上。由于相互作用力有大有小，溶剂分子与溶质分子、溶质分子相互之间又存在竞争吸附，从而造成了在柱内保留时间的差异，使不同物质得到分离。

应用特点：正相色谱一般用来分离中性化合物和离子(或可电离的)化合物，而且以中性样品为主。适于分离样品如下：

①对于反相色谱法很难分离的异构体，可以采用以硅胶为固定相的正相色谱分离分析；

②根据被分离样品极性差别进行族类分离；

③易于水解样品的分离分析；

④分离分析高脂溶性样品，其在极性有机溶剂中溶解度很小；

⑤正相色谱也可以用于异构体分离(包括几何异构体和光学异构体)。

2、流渣丛动相极性大于固定相极性的情况，称为反相色谱。非极性键合相色谱可作反相色谱。在现代液相色谱中应用最广泛，现代液相色谱分析工作的70%以上是在非极性键合固定相上进行的。反相介质性能稳定。分离效率高，可分离蛋白质、肽、氨基酸、核酸等含有非极性基团的各种物质。

应用特点：反相介质性能稳定。分离效率高，可分离蛋白质、肽、氨基酸、核酸、甾类、脂类、脂肪酸、糖类、植物碱等含有非极性基团的各种物如迟樱质。

(3)反相色谱法为什么不用加纯水扩展阅读

原理：

反相色谱(RPC)是指利用非极性的反相介质为固定相，极性有机溶剂的水溶液为流动相，根据溶质极性(疏水性)的差别进行溶质分离与纯化的洗脱色谱法。

与HIC一样，RPC中溶质也通过疏水性相互作用分配于固定相表面，但是，RPC固定相表面完全被非极性基团所覆盖，表现出强烈的疏水性。因此，必须用极性有机溶剂(如甲醇、乙腈等)或其水溶液进行溶质的洗脱分离。

溶质在反相介质上的分配系数取决于溶质的疏水性，一般疏水性越大，分配系数越大。当固定相一定时，可以通过调节流动相的组成调整溶质的分配系数。

RPC主要应用于相对分子质量低于5000，特别是1000以下的非极性小分子物质的分析和纯化，也可以用于蛋白质等生物大分子的分析和纯化。

由于反相介质表面为强烈疏水性旦仔，并且流动相为低极性的有机溶剂，生物活性大分子在RPC分离过程中容易变性失活，所以，以回收生物活性蛋白质为目的时，应注意选用适宜的反相介质。

❹ 反相硅胶柱色谱为什么不直接采用去离子水装柱

会造成硅胶填料的破坏。色谱柱由高压匀浆法装填，绝塌能并哪圆承受较高压力。为获得最佳分离效果，使用时请不要超过缓扮200kgf，而且避免压力突然上升或变化，否则会造成硅胶填料的破坏，减少色谱柱的使用寿命。除特殊要求外最高操作温度不要超过60℃。

❺ 反相柱层析分离皂苷以甲醇水为洗脱剂为什么

反相柱层析分离皂苷，以甲醇水为洗脱剂时悄坦，甲醇的比例增大，洗脱能力增强雀瞎。
因为水的极性最高，甲醇也是强极性的，如果你是做反相色谱（流动相极性强于固定相）通常就是用甲醇和水做流动相，如果是正相色谱可以使用极性较低的溶剂顷运空，如乙酸乙酯、苯之类的，一般来讲液相色谱法大多数是反相色谱，所以使用甲醇水做流动相很常见，流动相可以100%的甲醇，但是没办法100%的水，因为纯水做流动相压力过大，仪器承受不住。

❻ 反相硅胶柱色谱为什么不直接采用去离子水装柱

出现残留物。反相硅胶是在正相硅胶的基础上进行化学反应把OH取代为OR的硅胶。反相硅胶柱色谱因在使用离子水柱时会出现残留物，不直接采用去离子水装柱。一般色谱柱的材质不允许长时间被纯水冲洗。

❼ 碳十八色谱柱能进水吗

可以。不知道你说的“进水”是用水做流动相还是用水作为样品，不过都是版可以的。
C18是最常见的反相色谱柱权。反相的色谱柱都是可以用水作为流动相的。
不过一般来说，至少要有10%的有机相，也就是流动相里最好加入至少10%的甲醇或者乙腈。也有色谱柱的厂家说可以耐受100%的纯水相，不过如果用100%的水作为流动相，对色谱柱和的损伤有点大，会减少寿命。

样品进水溶液就更没有问题了，流动相那么大体积的水溶液都可以进柱子，进样不过几微升的体积而已，当然也是可以的。

❽ 反相与正相色谱法有何区别

反相还是正相，是根据流动相相对于固定相的极性而言的。 流动相极性强于固定相的，称作反相色谱；流动相极性弱于固定相的，称作正相色谱。

反相色谱流动相的极性强，容易带着极性分子走，而留下非极性分子。这主要用于非极性样品的分离。常用的高压液相色谱都是这种，也有人喜欢说反相液相色谱，其实是一个意思，就是显得博学一点。
正相色谱固定相极性强，容易把极性分子留下，故主要用于极性样品的分离。如离子色谱。

实际应用好像没有太注意正相还是反相，倒是都很注意柱子能承受什么样极性的物质。反相液相色谱柱不可以用强极性的纯水，都是要加入至少5%的有机溶剂来弱化水的极性。 正相的离子色谱柱则坚决不可以进入有机物质。但是气相色谱实际也是一种正相色谱，却往往要求不可以有水进入。

❾ 为什么普通C18色谱柱不能用纯水冲洗

容易引起疏水坍塌，把强保留物质冲出来，会毁了柱子的，所以水相不能超过95%，最开始的梯度淋洗也是高有机相到高水相，但是不是纯水相。

❿ 在冲洗高效液相C18反相柱的时候，为什么不能用纯水

相C18色谱柱（即憎水柱子）如果用纯水冲洗后，如果立即停泵则由于其憎水（疏水专）的缘故使得柱子内属的水因而流失掉，长时间停泵使得柱子干掉（变干），会造成柱子内固定相填料表面键合的硅烷基结构塌陷（也说成是失去支撑倒下），柱子就这样报废了。那么一旦冲洗柱子用了纯水相怎么办呢？诶！不要惊慌，只要你不停泵，上述情况不会立即发生，我们只要保证最后用有机相冲洗柱子，停泵后使柱子内留存的是有机相，就无大碍，