❶ 離子色譜柱能用純水沖洗嗎,這樣是否會影響柱子的性能。
按看說明書或咨詢色譜柱廠商,防止損害色譜柱,離子柱都不便宜,小心為上。
用純水短時間內沖洗色譜柱,通常不會對色譜柱造成較大的損傷,但如果長時間用水沖洗色譜柱則
可能引起固定相流失和相塌陷現象,所以若非必要請盡量避免用純水沖洗色譜柱,建議在水中加入一定
量的甲醇或乙腈進行沖洗,通常水的含量<90%不會對色譜柱造成任何影響。
原因分析:
首先,由於目前所用的色譜柱大多以硅膠為基質,硅膠的溶解特點是在純水中的溶解度比在含有一
定濃度有機溶劑的流動相中要大得多,所以長時間的用純水沖洗會導致固定相的流失,引起柱效下降。
其次,對於常規的 C18 柱而言,由於C18 長鏈與水是不互溶的,C18 長鏈之間的相互作用力大於
C18 與水分子的作用力,長時間的用水沖洗,使得C18 長鏈之間相互靠近,水流的沖刷,導致相互聯結
的C18 長鏈倒伏在硅膠基質的表面,對疏水性物質的保留能力下降,即相塌陷。針對用純水沖洗容易出
現相塌陷的現象,有些廠家推出了純水柱(如我公司的UltimateTM AQ-C18 柱),這種純水柱可以用純
水作流動相而不會產生相塌陷,這對只溶於純水的樣品的分析提供了一個很好的選擇。
第三,如使用過含緩沖鹽的流動相的色譜柱,用純水沖洗,並一定能將緩沖鹽完全洗去。因為,由
於緩沖鹽難溶於有機溶劑,C18 反相柱中用的填料是在硅膠表面上接上許許多多的C18 長鏈,相當於一
個疏水的有機相,而硅膠基體被有機物質包裹著,所以用純緩沖鹽水溶液做流動相時也許緩沖鹽不容易
到達硅膠基質,不至損害基體。但所用的流動相通常會含一部分有機溶劑,而且這些有機溶劑與C18
長鏈是互溶的,因此有機溶劑的加入增強了流動相滲入硅膠基質的能力,能使部分緩沖鹽達到硅膠基質。
同樣的道理,用純水沖洗只能洗掉表面的緩沖鹽,而滲入深處的緩沖鹽則仍然殘留在那裡。所以最好在
水中加入部分有機溶劑進行沖洗,一般的C18 柱通常用含水20%~90%都可以,含水的比例要視分析
時使用的流動相來定,原則上,用於沖洗的流動相中水的比例應該等於或高於(緩沖鹽用後清洗的情況,
推薦使用「等於」)分析時所用流動相中水的比例。
❷ 正相色譜柱可不可以用水沖
不可以的,硅膠在水裡水解,變成水玻璃了,壓力很大的
❸ 正相色譜進了點水會帶出硅膠嗎 粗的正相硅膠柱子 不小心可能進了點水 之後流出液濃縮後有不溶的物質
您好,正相硅膠有水不會帶出硅膠,有不溶物可能是水將柱子上以前殘留的水溶性物質洗脫下來了
❹ 柱子堵了,為什麼要用低流速沖
因為沖洗的時候可以將柱溫略微設高一點,有利於鹽溶解,或是先用100%水沖(只能短時間沖,二三十分鍾,時間長會損壞柱子),再用含有機相的水沖。如果是長時間走樣,樣品中的固體小顆粒堵了柱子,也只能反沖了。
有些柱子反沖之後就只能倒過來用了,所以需謹慎,最好打電話咨詢下工程師(最好平時使用時加上保護柱,相對於色譜柱,濾芯還是便宜很多的)。
相關知識
作為普通C18柱,尤其是硅膠基質的普通C18柱,對酸鹼鹽以及水,都是造成柱子的損壞的流動相構成。水不能過多(除了帶AQ的純水柱,一般各家品牌都有這款防水柱)我個人認為只要超過80%的水的流動相,都會造成C18的壽命縮短。所以做高水相的流動相分析時請注意選合適的柱子。
酸對柱子的損傷是不可逆的,一定要控制PH,PH在2以下的都要做好費柱子的准備。鹼性條件是對於硅膠基質的C18的弱項,一般的硅膠基質的C18鹼性條件都不太耐用,但現在也有鹼性PH11的柱子,但比較貴。鹽對色譜柱的影響主要是鹽析造成的,而且是致命。
以上內容參考:網路--柱子
❺ 安捷倫高效液相色譜c18柱的洗柱方法是什麼
第一、安捷倫的色譜柱有很多種,所以要分清類型去沖洗。
第二、作為普通C18柱,尤其是硅膠基質的普通C18柱,對酸鹼鹽以及水,都是造成柱子的損壞的流動相構成。水不能過多(除了帶AQ的純水柱,一般各家品牌都有這款防水柱)我個人認為只要超過80%的水的流動相,都會造成C18的壽命縮短。所以做高水相的流動相分析時請注意選合適的柱子。酸對柱子的損傷是不可逆的,一定要控制PH,我個人認為PH在2以下的都要做好費柱子的准備。鹼性條件是對於硅膠基質的C18的弱項,一般的硅膠基質的C18鹼性條件都不太耐用,但現在也有鹼性PH11的柱子,但比較貴。鹽對色譜柱的影響主要是鹽析造成的,而且是致命。
第三沖洗方法的問題。沖洗方法根據使用的流動相和樣品的不同沖洗方法要加以區分。一般不加酸鹼鹽,水相也不高的情況(如甲醇水60:40),無需太過沖洗,沖洗的目的就是為了把樣品的雜質沖出即可。保存流動相保存即可。酸和鹼的條件下,原則上是將酸鹼沖出色譜柱,保存在甲醇水即可(如60:40比例可根據要使用的流動相,只要水相不高即可)。鹽的條件比較麻煩,處理不好,不僅僅色譜柱出問題而且儀器也比較麻煩。常用的就是高水相流動相甲醇-水(10:90)將鹽沖出(注意壓力),然後用純甲醇沖洗(這一步是恢復高水相對色譜柱的損傷),最後保存在一般的甲醇水體系即可。
第四點,沖洗的時候注意是壓力,最好是從小流速開始慢慢提升流速到壓力許可的范圍。沖洗的時間,准確的是流量一般色譜柱的沖洗都要達到10-20倍的柱體積。
❻ 為什麼HPLC中不可用純水洗色譜柱
一般液相柱的固定相C18、C8等鍵合相在水中容易發生水解從而與硅膠基質分離,在強酸專性或強鹼性下水解得更快,屬所以一般盡量不要用100%的水洗,可以用95%的水+5%甲醇或乙腈
如必須用100%的水來洗去某種鹽的話,時間不要長,不要斷流,並逐步過渡到有機相