⑴ 安捷倫zorbax sb c18色譜柱能用水沖么
最好不要,色譜柱這款柱子我記得是不耐受純水的,就用乙腈或者甲醇沖吧
⑵ 安捷倫ZORBAX SB-C18能用100%純水做流動相么
產生的原因有很多,需要一個個排除尋找原因。
1、請先檢查一下進樣隔墊是不是漏氣了
2、打開進樣器,將襯管取出,用丙酮浸泡清洗,再將襯管活化、乾燥,重新裝入進樣器中
3、檢查色譜柱前端是否平齊,是否已經沾污,若有,切除一小段,重新安裝色譜柱。
4、微量器使用時是否做好了清洗和潤洗?進樣技術是否不夠熟練?
⑶ 安捷倫液相出口閥滴的慢柱壓上不去
一、壓力太大,這是 HPLC 使用中的常見問題,是指壓力突然升高。
解決方法:
1、一般是由於流路堵塞造成的。 在這一點上,我們應該檢查部分。
2、首先斷開真空泵的入口。 此時PEEK管內充滿液體,使PEEK管低於溶劑瓶,看液體是否自由滴落。 如果液體不滴落或滴落緩慢,則溶劑過濾頭堵塞。 處理方法:用30%的硝酸浸泡半小時,然後用超純水沖洗干凈。 如果液體自由滴落,則溶劑濾頭正常,檢查;
3、打開吹掃閥,使流動相不通過色譜柱。 如果壓力沒有明顯下降,則過濾器白頭被阻塞。 處理方法:取出過濾後的白頭粉刺,用10%異丙醇超聲半小時。 如果壓力降到100PSI以下,過濾白頭正常,檢查;
4、拆下色譜柱的出口端。 如果壓力沒有下降,則色譜柱被堵塞。 處理方法:如果緩沖鹽堵塞,用95%的水沖洗,直至壓力正常。 如果某些強保留物質導致堵塞,請用比當前流動相更強的流動相沖洗,直到壓力正常為止。如果按上述方法沖洗壓力長時間沒有下降,可以考慮將色譜柱的進出口反接儀器,用流動相沖洗色譜柱。 這時候如果柱壓還是不下降,只能更換柱入口篩板,但一旦不操作,很容易造成柱效下降,盡量少用。 如果問題無法解決,請考慮更換色譜柱。流量設置不正確:可以重新設置正確的流量。流動相配比不正確:不同配比的流動相粘度系數不同,粘度較高的流動相對應的系統壓力也較大。 如果可能,更換粘度較低的溶劑或重新設置比率。系統壓力零漂:調整壓力感測器的零點。
二、壓力過低
解決方法:
1、通常由於系統泄漏,處理方法:找到各個介面,尤其是色譜柱兩端的介面,將泄漏處擰緊。 取下色譜柱並用適當的力將其擰緊或用 PTFE 薄膜襯里。
2、空氣已進入泵內,但此時壓力往往不穩定、波動,甚至更嚴重的泵將無法吸出液體。 處理方法:打開Purge閥,以3~5ml/min的流速沖洗。 如果沒有,請用注射器通過外力將排空閥處的氣泡吸出。
3、無流動相流出:檢查儲液瓶中是否有流動相,水槽是否浸入流動相中,泵是否運轉。
4、參考閥未關閉:降低流量,然後關閉參考閥。 一般在下降到0.1~0.2mL/min後關閉參比閥。
柱壓問題是使用高效液相色譜過程中需要密切注意的地方,柱壓的穩定與色譜圖峰形的好壞、柱效、分離效果及保留時間等密切相關。所謂柱壓穩定並不是指壓力值穩定於一個恆定值而是指壓力波動范圍在345kPa 以內或在50PSI之間(在使用梯度洗脫時,柱壓平穩緩慢的變化是允許的)。壓力過高、過低都屬於柱壓問題。
⑷ 老師,我做液相的,昨晚Agilent XDB C18的柱子被我用水沖了40分鍾,有什麼解救方法
你好,咱們C18的柱子一般是不能走純水的,40min水應該還不是很嚴重,你用純甲醇版低流速沖色譜柱2小時,進權樣一個以前走過的物質,看看柱效情況。如果不理想了,進一針二氯甲烷,再用甲醇沖。沖完後,在進樣看看。
⑸ 安捷倫eclipse xdb c18色譜柱與eclipse plus c18色譜柱有什麼區別
安捷倫eclipse xdb c18色譜柱與eclipse plus c18色譜柱區別:
1、裂橡XDB C18含碳量比plus c18高;
2、plus c18中填料孔徑液嫌比XDB C18小;
其他方麵包括使用的PH范圍等等沒有區別,很多時候兩者可以通用。鬧源手
⑹ 安捷倫高效液相色譜柱的洗柱方法
1、色譜柱清洗要看你的色譜柱是孔徑是多少微米,適合的流速是多少。
2、以4.6微米的為例,先用純水清洗2小時,再用甲醇清洗1小時。用的時候直接換上流動相。
3、高效液相色譜柱的系統由儲液器、泵、進樣器、色譜柱、檢測器、記錄儀等幾部分組成。儲液器中的流動相被高壓泵打入系統,樣品溶液經進樣器進入流動相,被流動相載入色譜柱(固定相) 內, 由於樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數, 在兩相中作相對運動時, 經過反復多次的吸附- 解吸的分配過程, 各組分在移動速度上產生較大的差別, 被分離成單個組分依次從柱內流出, 通過檢測器時, 樣品濃度被轉換成電信號傳送到記錄儀,數據以圖譜形式列印出來。
⑺ 安捷倫高效液相色譜c18柱的洗柱方法
第一、安捷倫的色譜柱有很多種,所以要分清類型去沖洗。
第二、作為普通C18柱,尤其是硅膠基質的普通C18柱,對酸鹼鹽以及水,都是造成柱子的損壞的流動相構成。水不能過多(除了帶AQ的純水柱,一般各家品牌都有這款防水柱)我個人認為只要超過80%的水的流動相,都會造成C18的壽命縮短。所以做高水相的流動相分析時請注意選合適的柱子。酸對柱子的損傷是不可逆的,一定要控制PH,我個人認為PH在2以下的都要做好費柱子的准備。鹼性條件是對於硅膠基質的C18的弱項,一般的硅膠基質的C18鹼性條件都不太耐用,但現在也有鹼性PH11的柱子,但比較貴。鹽對色譜柱的影響主要是鹽析造成的,而且是致命。
第三沖洗方法的問題。沖洗方法根據使用的流動相和樣品的不同沖洗方法要加以區分。一般不加酸鹼鹽,水相也不高的情況(如甲醇水60:40),無需太過沖洗,沖洗的目的就是為了把樣品的雜質沖出即可。保存流動相保存即可。酸和鹼的條件下,原則上是將酸鹼沖出色譜柱,保存在甲醇水即可(如60:40比例可根據要使用的流動相,只要水相不高即可)。鹽的條件比較麻煩,處理不好,不僅僅色譜柱出問題而且儀器也比較麻煩。常用的就是高水相流動相甲醇-水(10:90)將鹽沖出(注意壓力),然後用純甲醇沖洗(這一步是恢復高水相對色譜柱的損傷),最後保存在一般的甲醇水體系即可。
第四點,沖洗的時候注意是壓力,最好是從小流速開始慢慢提升流速到壓力許可的范圍。沖洗的時間,准確的是流量一般色譜柱的沖洗都要達到10-20倍的柱體積。