Ⅰ 純化水微生物限度檢查方法
在醫葯的生產過程中,純化水的質量是關繫到葯品質量的一個首要原因。純化水在生產,儲存和運輸的過程中,非常容易受到微生物的污染,因此對於水質的日常檢測是質量部門一個重要工作。對於純化水微生物限度檢查,各國所使用的方法不外乎與培養基澆注法,塗布法,膜過濾法,以及最大可能數法,最大的區別在於所使用的培養基不同。
我總結了以下對於純化水微生物限度檢查方法,同時我司熟悉純化水檢測相關標准和檢測項目要求,可提供專業、可靠的純化水檢測服務,出具國家認可的純化水微生物限度檢查報告。cma資質認證如下:
對於活力比較強的微生物,在高營養性培養基上可以快速大量的生長,而對於活力比較差的微生物,生長速度會比較緩慢。在日常生活中,這兩種微生物經常會同時出現由由於它們的生長速率不同,會產生無法完全檢出的現象,因此高營養性培養基和低營養性培養基常常會同時使用來提高微生物的檢出率,
培養的溫度和時間同樣是影響檢測的條件,高營養性培養基通常在30-35℃培養48-72小時,但是在同一個系統中,培養的時間越長,可以檢出的微生物數量就越多,低營養性培養基就在這時候被設計出來,有些培養基的培養時間甚至達到14天,可以至大化的復甦低營養性微生物及受損傷的微生物。但是檢測周期的延長,對於工作效率來說,是很不利的,因此我們需要一個既能保證效率,又能保證檢出率的辦法。
在比較了中國葯典,美國葯典中所記載的方法,中國葯典中純化水微生物檢查所用到的培養基是 R2A 瓊脂培養基,在30-35℃培養大於5天。美國葯典中對於純化水的微生物檢測用何種培養基沒有做強制性規定,只要求在水系統確認驗證及周期性確認驗證時,使用適當的方法對水系統中的微生物做出評價即可。
《中國葯典》2010版、2015版以及2020版純化水微生物限度檢查中表示,生產企業必須確保純化水的質量符合葯典要求,但葯典對於純化水的規定其實也只是至低水平,滿足了葯典的標准不一定就能保證符合企業預期用途的要求。因此,開展純化水微生物限度檢查直接影響到生產產品的安全質量,中科檢測具有純化水微生物限度核查檢測,具有獨立實驗室,報告具有CMA和CNAS資質。
Ⅱ R2A瓊脂培養基和胰酪大豆腖瓊脂培養基有什麼區別
【R2A瓊脂特點】:R2A瓊脂培養基的營養成分較低,比較適合一些對營養要求較低的細菌生長,其實中海R2A培養基更適用於純化水中微生物的計數,且在純化水微生物限度檢查中具有較高的准確性和可靠性,它的靈敏度高,有利於絕大多數水系統中污染菌的檢出,還有就是R2A瓊脂的成分以及它的培養時間和條件,也利於受損的微生物恢復生長,使疲勞的微生物有更為顯著的回收率。
【胰酪大豆腖瓊脂培養基特點】:中海生物技術胰酪大豆腖瓊脂培養基是一種通用的營養培養基,具有廣譜的促菌生長能力,提高了微生物的檢出率。培養基營養成分含量高,質量穩定,經促生長試驗結果表明,培養菌的生長狀態良好且菌落直徑和菌落特徵典型。
主要區別:R2A適用於水中微生物計數,營養成分較低;胰酪大豆腖瓊脂用於普通的或營養要求較高的細菌的培養及需氧菌總數計數
Ⅲ r2a瓊脂培養基是營養瓊脂培養基嗎
呵呵,區別是瓊脂培養基就是加了瓊脂粉凝結成固體的LB培養基。
固體的培養基用於細菌塗板,抗性篩選挑選單克隆之用
液體的用於單克隆菌種擴大培養,提取目的基因或者蛋白之用。
Ⅳ 純化水中的微生物檢測怎麼做 要詳細
採用濾膜法進來行微生物檢測源是一種國際公認的微生物標准檢驗方法,其得到AOAC、美國、歐洲和日本等國家的葯典、FDA和EPA等組織的承認,廣泛應用於環境監測、食品及飲料工業、化妝品、制葯工業品質控制和電子工業等領域。賽多利斯公司的濾膜法微生物檢測產品成功地應用於濾膜法已有20多年的歷史,實用而且方便實用,它簡化了微生物檢測程序。
濾膜法微生物檢測:
將適當孔徑的濾膜放入濾器,過濾樣品,由於濾膜的作用而將微生物保留在膜的表面上。樣品中微生物生長抑制劑可在過濾後用無菌水沖洗濾器而除去。然後,將濾膜放在培養基上培養,營養物和代謝物通過濾膜的微孔進行交換,在濾膜表面上培養出的菌落可以計數,並和樣品量相關。
濾膜法的優點:
- 與直接法比較,可以檢測大量的樣品
- 濃縮效應使微生物檢測的准確度提高
- 帶有菌落的濾膜,可作為檢測的永久記錄存檔
- 可見的菌落和樣品量直接對應,得出定量結果
操作具體一點就是:薄膜過濾法檢測,一個樣過濾一份,就是200ml的純化水通過濾膜,將該濾膜浸泡在滅菌好的l生理鹽水中,再接種到平皿中,製成10級、100級、1000級稀釋倍數的細菌、黴菌和酵母菌稀釋培養皿,即可
Ⅳ 純化水微生物限度檢查操作
純化水微生物限度操作規程
文件編號
總
頁
數
共
3
頁
制訂部門
實施日期
起
草
人
審
核
人
批
准
人
起草日期
審核日期
批准日期
1.
目的
本規程旨在為微生物限度檢查提供一個標准化方法。
2.
適用范圍
微生物限度實驗室
3.
責任者
QC
主管生測員
4.
安全注意事項
嚴格無菌操作,防止微生物污染。
5.
規程
5.1
取樣
a
.在車間、實驗室所有用水點按序取樣,標明日期和取樣點位置,一個監測
點取水
3
次,一次
250mL
,送檢驗室按中國葯典
2010
年版二部標准進行全檢。
b
.
取樣前將直接接觸樣品的容器用
75%
酒精棉球進行擦拭,
採用滅菌後瓶收
集樣品。
c
.取樣時,取樣人洗手並消毒,取樣前用純化水淋洗檢驗用取樣瓶和瓶塞
3
次。滅菌瓶至少取
200mL
用於微生物檢驗用水,微生物檢驗應在取樣後的
1
小
時內進行,或將樣品冷藏並在
4
小時內進行檢驗。
5.2
微生物限度檢查
純化水檢驗標准微生物限度檢查採用平皿法和薄膜過濾法。
5.3
微生物培養
(
1
)
除另有規定,
本檢查法中細菌培養溫度為
30-35
℃,黴菌、酵母菌培養溫
度為
Ⅵ 緊急求助R2A培養基的中文名稱和全稱是什麼
R2A瓊脂培養基培養基
英文名稱:R2A Agar
R2A瓊脂培養基用於純水中微生物的計數。(2015版CP)
檢驗原理:
酵母浸出粉、蛋白腖、酸蛋白水解物提供氮源、維生素、生長因子;葡萄糖、為可發酵糖類;可溶性澱粉可以吸收菌在復甦過程產生的有害物質;丙酮酸鈉可增強細菌的復甦。磷酸二氫鉀為酸鹼緩沖劑;無水硫酸鎂提供二價陽離子;瓊脂為凝固劑。
R2A瓊脂培養基配方成分:
成分
含量(g/L)
酵母浸出粉
0.5
蛋白腖
0.5
酪蛋白水解物
0.5
葡萄糖
0.5
可溶性澱粉
0.5
磷酸二氫鉀
0.3
無水硫酸鎂
0.024
丙酮酸鈉
0.3
瓊脂
15.0
蒸餾水(乾粉培養基不含此成分)
1000
最終pH 7.2±0.2
使用方法:
平板凝膠培養基使用:待檢樣品按照相應的標准進行處理後,取適量樣品液接種於該培養基上,於葯典規定的培養條件進行培養,觀察結果。
脫水乾粉培養基使用:稱取本品乾粉18.1g,加入蒸餾水或去離子水1 L,攪拌加熱煮沸至完全溶解,121℃高壓滅菌15 min。(註:配製不同用量體積,可按比例擴增或縮小。)後續操作可參考「平板凝膠培養基使用」。
Ⅶ 純化水微生物限度檢查用薄膜過濾法怎麼做
准備工作:
用純化水浸泡濾膜,浸泡完全後放入濾杯中,包好濾杯,連同量筒、培養基、平皿、取膜器、三角燒瓶等一起121℃滅菌30min。
滅菌後的物品一並傳入潔凈室中,微生物限度過濾器上連好已經滅好的濾杯,用緩沖液先潤濕濾膜,抽掉緩沖液,然後倒入供試液(10倍稀釋),濾過,再用緩沖液沖洗濾膜。
過濾結束後取下濾膜平貼於R2A瓊脂培養基平板上,32℃倒置培養5天。菌落計數(平皿上長幾個菌結果就報幾個菌)
(7)純化水微生物限度R2A瓊脂培養基擴展閱讀:
薄膜過濾系統主要用於去除小顆粒及溶解鹽,一般可分為微濾、超濾、納濾和薄膜過濾反滲透。
微濾又稱微孔過濾,它屬於精密過濾,截留溶液中的砂礫、淤泥、黏土等顆粒和賈第蟲、隱抱子蟲、藻類和一些細菌等,而大量溶劑、小分子及少量大分子溶質都能透過膜的分離過程。
超濾是一種加壓膜分離技術,即在一定的壓力下,使小分子溶質和溶劑穿過一定孔徑的特製的薄膜,而使大分子溶質不能透過,留在膜的一邊,從而使大分子物質得到了部分的純化
納濾 ( NF,Nanofiltration)是一種介於反滲透和超濾之間的壓力驅動膜分離過程,納濾膜的孔徑范圍在幾個納米左右。
參考資料來源:網路-薄膜過濾
Ⅷ R2A瓊脂培養基和胰酪大豆腖瓊脂培養基有什麼區別
R2A培養基可以修復被氯氣損傷的細菌,支持耐受氯氣的微生物的生長,酵母浸出粉、蛋白腖、酪蛋白水解物提供氮源、維生素、生長因子;葡萄糖、為可發酵糖類;可溶性澱粉可以吸收菌在復甦過程產生的有害物質,丙酮酸鈉可增強細菌的復甦。磷酸二氫鉀為酸鹼緩沖劑,無水硫酸鎂提供二價陽離子,瓊脂為凝固劑。
TSA培養基中的胰酪腖(酪蛋白胰酶水解物)、大豆木瓜蛋白酶水解物提供氮源、維生素和生長因子;氯化鈉維持均衡的滲透壓;瓊脂是培養基的凝固劑。
R2A沒有TSA營養高,長的相對慢一點,方便計數。