㈠ 黑麴黴檸檬酸高產菌的選肓方案怎麼設計
使用選擇性培養基加指示劑做單菌落培養，用高效液相色譜法檢測。
培養基可用馬鈴薯培養基，加酸鹼指示劑（石蕊指示試劑）
得做大量的試驗，必要時用紫外線誘變
我原來做相似的試驗就是這么做的。
㈡ 黑麴黴生產檸檬酸的過程中出現不同批次其產量和品質差別很大，原因有哪些
黑麴黴具有多種活性較強的酶系，如CX酶、澱粉酶、酸性蛋白酶等，可將原料中的纖維素等大分子化合物降解轉化為動物易消化利用的養分，並為白地霉、酵母菌提供必需的糖、氨基酸等。但在試驗中發現，黑麴黴培養時間超過60h,就會有孢子產生。為延長黑麴黴作用時間，採用二次發酵工藝，即：第一次固體發酵培養基→接種黑麴黴（30℃靜止培養3d）→第一次發酵→加適量麩皮、尿素及等量醬渣→接種白地霉、酵母菌（30℃靜止培養）→第二次發酵。時間由實驗確定，60℃烘乾、備用。 ，兩個基本問題之一：保證強酸環境！ 因為黑麴黴在pH為2～3的環境中發酵蔗糖，產物以檸檬酸為主，只產極少量的草酸；當pH接近中性時則大量產生草酸， 而檸檬酸產量很低。 兩個基本問題之二：O2 必須保證氧氣維持呼吸：標准呼吸鏈產生ATP積累，側呼吸鏈不產生ATP，缺氧導致側呼吸鏈失活，使ATP積累，檸檬酸積累減少。 TCA環的調節作用 1.TCA環的起始酶：檸檬酸合成酶是一種調節酶。但在黑麴黴中，檸檬酸合成酶沒有調節作用，這是黑麴黴TCA環的第一個特點。 順烏頭酸酶失活，阻斷TCA環是檸檬酸積累的必要條件。順烏頭酸酶、異檸檬酸酶在pH2.0時失活，線粒體順烏頭酸酶在催化時有檸檬酸：順烏頭酸：異檸檬酸=90：3：7的平衡，這個平衡可能就是造成檸檬酸的最初積累而使pH值降低。 2.黑麴黴菌體內α-酮戊二酸脫氫酶缺失或活力很低（TCA環被阻斷）。 3.氧和pH值對檸檬酸發酵的影響很大。 標准呼吸鏈產生ATP積累，側呼吸鏈不產生ATP，缺氧導致側呼吸鏈失活，使ATP積累，檸檬酸積累減少。 歸納： ①Mn2+缺乏→抑制蛋白合成→NH4↑ 解除磷酸果糖激酶的代謝調節，促進EMP途徑暢通，有一條呼吸活動強的不產生ATP的側呼吸鏈 ②由於丙酮酸羧化酶是組成型酶，不被調節控制。丙酮酸氧化脫羧生成乙醯CoA和CO2的固定兩個反應的平衡，以及檸檬酸合成酶不被調節，增強了合成檸檬酸的能力。 ③由於順烏頭酸水合酶在催化時建立了以下平衡： 檸檬酸：順烏頭酸：異檸檬酸=90：3：7 同時控制Fe2+含量時，順烏頭酸酶活力降低，使檸檬酸積累。 ④隨著檸檬酸積累，pH降低到一定程度時，使順烏頭酸酶和異檸檬酸脫氫酶失活，更有利於檸檬酸的積累及排出細胞外。 採用細菌發酵比黴菌和酵母菌更加有利， 一是細菌生長繁殖快，容易在發酵初期取得優勢，因而抗污染，適合生料發酵； 二是菌體碳氮比例小，其蛋白質構成更適合畜禽的消化吸收，而且不產生黃麴黴毒素。 三是細菌發酵的速度比酵母快得多, 在應用澱粉水解液為原料，應用固定化細菌細胞連續生產酒精時發現細菌發酵的酒精生產能力是酵母發酵的2.65倍.
㈢ 用黑麴黴生產檸檬酸的過程中出現不同的批次其產量和品質差別很大,這是為什麼啊急求解決方案!!
1.培養基是否有過改變，如批次，生產廠家，不同規格（生化試劑或分析純）
2.是否由於操作等問題導致染菌
3.發酵前滅菌條件是否改變
4.溫度等條件是否在未注意的情況下有過改變
㈣ 實驗室里黑麴黴發酵檸檬酸的注意事項包括後提取工作的注意事項，經歷過此實驗的大神望詳細賜教。
1、合適的碳源（抄澱粉、襲麥芽糖、甘露糖等），高濃度的糖；
2、限制有機氮源、選擇適量的無機氮源（銨鹽）；
孢子培養基 ：要求能使菌體迅速生長，產生較多優質的孢子，所以營養不要太豐富；
發酵培養基 ：既要使菌體能迅速生長，達到一定的菌絲濃度，又要使長好的菌體能迅速合成所需產物 ；
3、合適的pH值，黑麴黴在pH為2～3的環境中發酵糖，產物以檸檬酸為主；當pH接近中性時則大量產生草酸， 而檸檬酸產量很低；
4、發酵液中溶氧量要高（搖床的轉速250r/m）；
5、限制重金屬離子，如Mn2＋缺乏促進EMP途徑暢通， 控制Fe2＋含量使順烏頭酸酶活力降低，使檸檬酸積累 。
㈤ 請設計從自然界篩選檸檬酸產生菌的具體實驗過程
看了一樓的復制粘貼不禁笑了：英文里還來個漢語拼音，Tianjialiangwei 添加量為。
拜託復版制的時候也看看清權楚好不好。
紅芋粉醪20%、檸檬酸10%～20%配成培養液，調節pH2.0～2.5，以一定量的培養基和土樣均勻混合，用毛細吸管點種在平皿內事先覆蓋的無菌濾紙上（2～3層），於30℃培養，這樣可以分離到產生檸檬酸的黑麴黴。
㈥ 用黑麴黴發酵生產檸檬酸..
題目比較大，一般一個生產工藝問題，要從人、機、料、法、環這五個方面進行專入手。個人建屬議從兩個方面開始入手，1.原料方面，主要是糖蜜是否是同一批其中的金屬含量是否一致，所有添加的各種助劑，化學試劑是否同一個批次，批次間的差異如何。另外就是生產過程中的PH值是否穩定。
㈦ 黑麴黴檸檬酸產生菌菌株的富集應考慮利用哪些特點來進行富集
檸檬酸生產菌的分離篩選與其他微生物相同，一是收集相當數量的現有菌種，經版分離純化，從中挑選出合適權的菌株；二是採集大量的含菌樣品，分離篩選出優良菌種。若收集現有菌種則可直接活化、分離、純化，並測定每個菌株的性能，從中選出最優良的菌株；若是通過採集含菌樣品來分離選育，可根據糖質發酵檸檬酸高產菌主要是黑麴黴，它們具有強大的分解澱粉、蛋白質、果膠、脂肪等物質的酶系檸檬酸特徵，可從腐爛植物、水果表皮，也可從含有腐爛未熱水果的酸性土壤中分離。一般將採集的含菌樣品經適當的增殖培養，或將樣品浸出稀釋液100mL和10％薯乾粉、10％檸檬酸混合．在振盪搖床上於33—35℃下「富集」培養3—5d，然後進行分離篩選。
㈧ 黑麴黴發酵產檸檬酸的過程中黴菌結球是什麼原因跪求大神解答
黴菌接團是正常現象，稱為菌絲球，控制一定的接種量，維持比較合適的菌球大小，一般菌球較小時產酸較好，菌球較大時，產酸相對較差。
㈨ 請教黑麴黴生產檸檬酸的原理
檸檬酸生產工藝分為水果提取法，化學合成法和生物發酵法三種。
水果提取法：檸檬酸從檸檬、橘子、蘋果等檸檬酸含量較高的水果中提取。此法提取的成本較高，不利於工業化生產。
化學合成法的原料是：丙酮，二氯丙酮或乙烯酮，此法工藝復雜，成本高，安全性低。
生物發酵法：1、表面發酵法，又稱淺層發酵法，多以甜菜糖蜜為原料。工藝過程是：將原料先放入煮沸過內加入水煮沸，一次加皇血鹽和EDTA二鈉鹽煮沸滅菌，再用無菌水配成培養基液，加入適量的硫酸銨、磷酸二氫鉀作為氮源和營養鹽，將培養基液在45-50度下送入發酵室內裝入淺底的鋁盤或不銹鋼盤中，干孢子接入黑麴黴干孢，發酵，過濾掉菌絲後將發酵液中和，酸解、凈化、濃縮、結晶等後處理可得。2、固體表面發酵法：多以海藻酸鈉為載體，也有採用聚丙烯醯胺。固定化方法以後者為例，將丙烯醯胺單體（ACAM）和N,N-亞甲基雙丙烯醯胺（BIS）溶於水後與微生物細胞混合，攪拌，加入四甲基乙二胺和過硫酸鉀，室溫下放置30min，使之聚合完全，製得凝膠，將其切成3mm*3mm*3mm的小塊，用生理鹽水洗凈後作為載體進行發酵，提取，製得檸檬酸。3、深層發酵法 採用定向培養，紫外線誘變及NTG處理等的配合作用對菌株選育，使其適應以糖蜜為原料的深層發酵，並提高菌株的產酸率和轉化率，對蜜糖進行預處理、處理，後經發酵、提取等工藝過程，得到檸檬酸。
降酸一般採用碳酸鈣。