離子交換層析柱價格

㈠ 離子交換層析分離兩性化合物的原理

離子交換層析分離兩性化合物的原理介紹如下：離子交換層析法（ion exchange chromatography，簡稱IEC）是從復雜的混合物中，分離性質相似大分子的方法之一，依據的原理是物質的酸鹼性、極性，也就是所帶陰陽離子的不同。電荷不同的物質，對管柱上的離子交換劑有不同的親和力，改變沖洗液的離子強度和pH值，物質就能含雹依次從層析柱中分離出來。離子交換層析法大致分為5個步驟：
1. 離子擴散到樹脂表面。
2. 離子通過樹脂擴散到交換位置。
3. 在交換位置進行離子交換；被交換的分子所帶電荷愈多，它與樹脂的結合愈緊密，也就愈不容易被其它離子取代。
4. 被交換的離子擴散到樹脂表面。
5. 沖洗液通過，被交換的離子擴散到外部溶液中。
離子交換樹脂的交換反應是可逆的，遵循化學平衡的規律。定量的混合物通過管柱時，離子不斷被交換，濃度逐漸降低，幾乎全部都能被吸附在樹脂上；在沖洗的過程中，由於連續添加新的交換溶液，所以會朝正反應方向移動，因而可以把樹脂上的離子沖洗下來。
如果被純化的物質是氨基酸類的分子，則分子上的凈電荷取決於氨基酸的等電點和溶液的pH值。所以當溶液的pH值較低，氨基酸分子帶正電荷，它將結合到強酸性的陽離子交換樹脂上；隨著通過的緩沖液pH逐漸增加，氨基酸將逐漸失去正電荷，結合力減弱，最後被洗下來。由於不同的氨基酸等電點不同，這些氨基酸將依次被洗出，最先被洗出的是酸性氨基酸，如 apartic acid 和 glutamic acid（在約pH 3~4時），隨後是中性氨基酸，如glycine和alanine。鹼性氨基酸如arginine和lysine在pH值很高的緩沖液中仍帶有正電荷，因此這些在約pH值清大高達10~11時才出現。

㈡ 多糖分離純化—離子交換層析和柱層析

多糖，與蛋白質一樣，對生命過程起著關鍵作用，其復雜結構直接決定了其特性和功能。要深入理解多糖，分離純化步驟至關重要。其中，離子交換層析和凝膠層析是常用的手段。

離子交換層析在多糖純化中應用廣泛，其根據多糖特性，選擇合適的陽離子、陰離子或硼砂交換劑，如DEAE cellulose、DEAE Sephadex（葡聚糖）、DEAE Sepharose（瓊脂糖）系列。以DEAE cellulose-52為例，它作為陰離子交換柱，其填料二乙氨乙基纖維素帶有正電荷，能有效分離中性和酸性多糖，如果膠，通過鹽溶液洗脫，中性糖先被洗脫，陰離子多糖隨後。通過檢測洗脫液糖含量，形成洗脫曲線，實現不同多糖的分離。

相比之下，凝膠層析則側重於分子量的分離。其原理是利用分子篩特性，大分子先流出，小分子後流出，如Sephadex G系列填料，如G-15、G-25用於寡糖分離，G-100和G-200則適用於大分子多糖。通過觀察洗脫曲線，可以精確收集不同分子量的樣品。

㈢ 求問怎麼用離子交換樹脂層析分離混合氨基酸

離子交換樹脂作為一種合成高聚物，不溶於水，能吸水膨脹。高聚物分子由能電離的極性基團及非極性的樹脂組成。極性基團上的離子能與溶液中的離子起交換作用，而非極性的樹脂本身物性不變。通常離子交換樹脂根據所帶基團可分為強酸（＝R＝SO3H）、弱（＝COOH）、強鹼（＝N+＝R：）和弱鹼（＝NH2＝NHR＝NR2）。離子交換樹脂適用於分離小分子物質，如氨基酸、腺苷、腺苷酸等。然而，對於生物大分子如蛋白質，則不太適宜，因為它們不能擴散到樹脂的鏈狀結構中。因此，如果需要分離生物大分子，可以選擇多糖聚合物如纖維素、葡聚糖為載體的離子交換劑。

本次實驗利用磺酸陽離子交換樹脂（Dowex 50）分離混合氨基酸，包括酸性氨基酸（天冬氨酸）、中性氨基酸（丙氨酸）和鹼性氨基酸（賴氨酸）。在特定的pH條件下，這些氨基酸解離程度不同，通過調整脫液pH或離子強度可以實現分離。實驗中所用到的材料包括層析柱、恆流泵、梯度混合器、試管及試管架、紫外分光光度計、2mol/L HCl、2mol/L NaOH、0.1mol/L HCl、0.1mol/L NaOH、pH4.2的檸檬酸緩沖液、pH5的醋酸緩沖液、0.2％中性茚三酮溶液以及氨基酸混合液。

樹脂處理步驟為：首先將樹脂置於100ml燒杯中，加入25ml 12mol/L HCl攪拌2小時，傾棄酸液後用蒸餾水洗滌至中性。隨後，再加入25ml 12mol/L NaOH攪拌2小時，傾棄鹼液後用蒸餾水洗滌至中性。最後，將樹脂懸浮於50ml pH4.2檸檬酸緩沖液中備用。

裝柱步驟包括：取直徑0.8cm～1.2cm、長度10cm～12cm的層析柱，底部墊玻璃棉或海綿圓墊，自頂部注入經處理的樹脂懸浮液。關閉層柱出口，待樹脂沉降後，放出過量溶液，再加入一些樹脂，使樹脂沉積至8cm～10cm高度即可。於柱子頂部繼續加入pH4.2檸檬酸緩沖液洗滌，確保流出液pH為4.2，關閉柱子出口，保持液面高出樹脂表面1cm左右。

加樣、洗脫及洗脫液收集步驟為：打開山口使緩沖液流出，待液面幾乎平齊樹脂表面時關閉出口。用長滴管將15滴氨基酸混合液直接加到樹脂頂部，打開出口使其緩慢流入柱內。當液面剛平樹脂表面時，加入0.1mol/L HCl 3ml，以10滴/分鍾～12滴/分鍾的流速洗脫，收集洗脫液，每管20滴，逐管收存。當HCl液面剛平樹脂表面時，用1ml pH4.2檸檬酸緩沖液沖洗柱壁一次，接著用2ml pH4.2檸檬酸緩沖液洗脫，保持流速10滴/分鍾～12滴/分鍾並注意勿使樹脂表面乾燥。

在收集洗脫液的過程中，逐管用茚三酮檢驗氨基酸的洗脫情況，方法是：於各管洗脫液中加10滴pH5醋酸緩沖液和10滴中性茚三酮溶液，沸水浴中煮10分鍾，如溶液呈紫藍色，表示已有氨基酸洗脫下來。顯色的深度可代表洗脫的氨基酸濃度，可比色測。在用pH4.2檸檬酸緩沖液把第二個氨基酸洗脫出來之後，再收集兩管茚三酮反應陰性部分，關閉層析柱出口，將樹脂頂部剩餘的pH4.2檸檬酸緩沖液移去。於樹脂頂部加入2ml 0.1mol/L NaOH，打開出口使其緩慢流入柱內，按上面步驟續用0.1mol/L NaOH洗脫並逐管收集，注意保持流速10滴/分鍾～12滴/分鍾，每管20滴。做洗脫液中氨基酸檢驗，在第三個氨基酸用0.1mol/L NaOH洗脫下來以後，再繼續收集兩管茚三酮反應陰性部分。

最後，以洗脫液管號為橫坐標，洗脫液各管光密度（以水作空白，在570nm波長讀取吸光度）或顏色深淺（以-，±，+，++．．．表示）為縱坐標作圖，即可畫出一條洗脫曲線。

實驗注意事項包括：保持流速10滴/分鍾～12滴/分鍾，並注意勿使樹脂表面乾燥。在裝柱時必須防止氣泡、分層及柱子液面在樹脂表面以下等現象發生。

㈣ 疫苗提純分離用離子交換層析工藝介紹

陰離子交換層析去除乙腦疫苗製品中殘留DNA，其特點在於將乙腦疫苗濃縮液經過凝膠過濾層析初步純化後，利用陰離子交換層析，DNA被牢牢吸附在色可賽思離子交換介質上，而乙腦病毒蛋白則直接穿透，有效去除宿主DNA，解決乙腦疫苗行業面臨的問題。

2010版《中國葯典》提高人用狂犬病疫苗中蛋白含量標准，需確保純化後的病毒液總蛋白不超過80μg/劑，牛血清蛋白殘留低於50ng/劑，宿主細胞蛋白殘留不超過24μg/劑。生物葯企需優化純化工藝，利用凝膠層析與色可賽思離子交換層析相結合，以提高疫苗純化效果。層析柱的選擇、上樣體積、速度、濃度與抗原收集點，均影響疫苗純化效率。結合兩種層析柱，可優化疫苗純化，確保質量與效率。

採用離子交換法去除流腦多糖疫苗粗糖中的雜蛋白，結合高效陰離子交換色譜與電化學檢測，快速檢測Hib結合疫苗中殘余溴化氰與CDAP，為疫苗生產提供可靠檢測方法。同時，HPAEC-PAD檢測法測定腦膜炎球菌多糖含量，驗證方法的專屬性、精密度與准確性，與傳統方法比較，結果一致，可用於疫苗成品多糖含量檢測。

百日咳疫苗的分離純化通過ELISA與還原性SDS-PAGE方法研究脲的影響，加入2mol/L脲作為穩定劑，顯著提高色可賽思離子交換層析和凝膠過濾層析效果。

利用Sabin株脊髓灰質炎病毒純化的離子交換層析條件，對粗純液進行IEC，優化純化步驟，提高疫苗質量。

重組幽門螺桿菌過氧化氫酶脂質體疫苗的制備中，陰離子交換層析和凝膠過濾層析分離純化Kat重組蛋白，薄膜分散法制備疫苗，通過透射電鏡測定粒徑，為疫苗提供有效免疫保護。

離子交換層析純化人輪狀病毒滅活疫苗，通過色可賽思離子交換柱層析、透析脫鹽、過濾除菌滅活等步驟，制備出總蛋白去除率為99.69%、保持良好抗原性和免疫原性的疫苗。

狂犬病疫苗中去除殘余DNA，優化培養條件、選擇合適孔徑的超濾膜包、增加陰離子交換柱工藝，以降低Vero細胞DNA殘留量，保證疫苗質量。

利用大腸桿菌表達系統制備HPV-6類病毒顆粒，研究其免疫原性，通過純化、體外組裝、形態檢測與中和實驗，評價誘導的抗HPV-6/11中和抗體水平，簡便高效制備具有免疫原性的HPV-6疫苗。

㈤ 離子交換層析的原理是什麼 已解決

離子交換層析法是從復雜的混合物中，分離性質相似大分子的方法之一，依據的原理是物內質的酸鹼性容，極性，所帶陰陽離子的不同。電荷不同的物質，對管柱上的離子交換劑有不同的親和力，改變沖洗液的離子強度和pH值，物質就能依次從層析柱中分離出來。

層析開始前，功能基團與反離子穩定結合，就與反離子發生可逆交換，與層析劑結合被固定下來。因為鹽離子可以與底物競爭功能基團，鹽濃度越高樣品與層析劑結合越不緊密，易被洗脫下來。不同物質與層析劑結合程度不同，洗脫下來的時間不同，因此得以分開。

(5)離子交換層析柱價格擴展閱讀

離子交換劑的選擇首重保持欲分離物質的生物活性，以及在不同pH值環境中，此物質所帶的電荷和電性強弱，陰陽離子交換劑的選擇若被分離物質帶正電荷，這些鹼性蛋白質，它們在酸性溶液中較穩定，親和力強，故採用陽離子交換劑。

在鹼性溶液中較穩定，則使用陰離子交換劑，如果欲分離的物質是兩性離子，一般考慮在它穩定的pH范圍帶有何種電荷，作為交換劑的選擇。離子交換劑的再生與保存離子交換劑可在柱上再生，若有脂溶性物質則可用非離子型去污劑洗柱後再生，也可用乙醇洗滌。