『壹』 離子交換法的原理
1. 離子交換法是一種用於離子分離和純化的有效技術。
2. 該技術的原理基於使用特定的固體材料,即離子交換樹脂,與溶液中的離子進行交換。
3. 在這個過程中,樹脂表面的功能基團會吸附溶液中的特定離子,同時釋放出等電荷的相反離子。
4. 離子交換樹脂通常由聚合物製成,含有能夠吸附或釋放離子的功能團。
5. 樹脂的功能團性質(陽離子或陰離子)決定了其適用於特定類型的離子純化或分離。
6. 離子交換法分為陽離子交換和陰離子交換兩種,操作方式根據所需處理的離子類型而有所不同。
7. 在陽離子交換中,樹脂的陽離子基團捕獲溶液中的陰離子;而陰離子交換涉及樹脂的陰離子基團與溶液中的陽離子交換。
『貳』 疫苗提純分離用離子交換層析工藝介紹
陰離子交換層析去除乙腦疫苗製品中殘留DNA,其特點在於將乙腦疫苗濃縮液經過凝膠過濾層析初步純化後,利用陰離子交換層析,DNA被牢牢吸附在色可賽思離子交換介質上,而乙腦病毒蛋白則直接穿透,有效去除宿主DNA,解決乙腦疫苗行業面臨的問題。
2010版《中國葯典》提高人用狂犬病疫苗中蛋白含量標准,需確保純化後的病毒液總蛋白不超過80μg/劑,牛血清蛋白殘留低於50ng/劑,宿主細胞蛋白殘留不超過24μg/劑。生物葯企需優化純化工藝,利用凝膠層析與色可賽思離子交換層析相結合,以提高疫苗純化效果。層析柱的選擇、上樣體積、速度、濃度與抗原收集點,均影響疫苗純化效率。結合兩種層析柱,可優化疫苗純化,確保質量與效率。
採用離子交換法去除流腦多糖疫苗粗糖中的雜蛋白,結合高效陰離子交換色譜與電化學檢測,快速檢測Hib結合疫苗中殘余溴化氰與CDAP,為疫苗生產提供可靠檢測方法。同時,HPAEC-PAD檢測法測定腦膜炎球菌多糖含量,驗證方法的專屬性、精密度與准確性,與傳統方法比較,結果一致,可用於疫苗成品多糖含量檢測。
百日咳疫苗的分離純化通過ELISA與還原性SDS-PAGE方法研究脲的影響,加入2mol/L脲作為穩定劑,顯著提高色可賽思離子交換層析和凝膠過濾層析效果。
利用Sabin株脊髓灰質炎病毒純化的離子交換層析條件,對粗純液進行IEC,優化純化步驟,提高疫苗質量。
重組幽門螺桿菌過氧化氫酶脂質體疫苗的制備中,陰離子交換層析和凝膠過濾層析分離純化Kat重組蛋白,薄膜分散法制備疫苗,通過透射電鏡測定粒徑,為疫苗提供有效免疫保護。
離子交換層析純化人輪狀病毒滅活疫苗,通過色可賽思離子交換柱層析、透析脫鹽、過濾除菌滅活等步驟,制備出總蛋白去除率為99.69%、保持良好抗原性和免疫原性的疫苗。
狂犬病疫苗中去除殘余DNA,優化培養條件、選擇合適孔徑的超濾膜包、增加陰離子交換柱工藝,以降低Vero細胞DNA殘留量,保證疫苗質量。
利用大腸桿菌表達系統制備HPV-6類病毒顆粒,研究其免疫原性,通過純化、體外組裝、形態檢測與中和實驗,評價誘導的抗HPV-6/11中和抗體水平,簡便高效制備具有免疫原性的HPV-6疫苗。