『壹』 色譜柱使用和維護注意事項
正確使用和維護色譜柱至關重要，稍有不慎可能影響其性能和壽命。以下是幾個關鍵注意事項：
1. 避免極端壓力和溫度變化，以及機械震動。溫度驟變或柱體跌落可能導致填充物受損；柱壓的快速升降也會沖擊填料。調節流速需平穩，進樣時閥門轉動不可過緩。
2. 在調整溶劑組成時，尤其在反相色譜中，應逐漸進行，不可直接從有機溶劑變為全水，反之亦然。
3. 除非生產商明確允許，否則一般不推薦反沖色譜柱，因為這會快速降低柱效。若要反沖，必須確保柱頭雜質已清除。
4. 選擇適當的流動相（注意pH值），以免固定相受損。有時可在進樣器前加預柱，以減少硅膠基質溶解分析柱的風險。
5. 避免直接注入復雜樣品，特別是生物樣品，可能需要預處理或加保護柱。保護柱應定期更換，填充與分析柱相似的固定相。
6. 定期用強溶劑清洗色譜柱，清洗時需逐步更換溶劑，每種溶液體積為柱體積的20倍左右。清洗順序和溶劑可參考文章提供的例子。
7. 存儲色譜柱時，要確保柱內充滿乙腈或甲醇，接頭緊固，防止溶劑揮發。避免在柱內留置緩沖液過夜。
8. 壓力升高可能是濾片堵塞或大分子污染，柱效降低可能意味著柱頭塌陷。處理方法包括取出部分填料，然後用相同溶劑填充並壓平。
9. 保護柱可以延長柱子壽命，盡管會略降柱效。硅膠柱在pH2~9范圍內使用，柱頂可能吸附物質，定期檢查並處理。
10. 工作後使用強洗脫液沖洗，如ODS柱用甲醇。使用鹽緩沖液後需用無鹽流動相沖洗，避免鹵族元素對管道的腐蝕。長期不使用，建議每隔幾天開機沖洗。
色譜柱由柱管、壓帽、卡套（密封環）、篩板（濾片）、接頭、螺絲等組成。
『貳』 離子色譜儀沒有壓力了有什麼解決辦法
離子色譜儀沒有壓力可能由多種原因導致，可嘗試以下解決辦法。
若是流動相問題，檢查流動相儲液瓶，看是否液位過低或已用完，需及時補充。同時，查看流動相管路是否堵塞，可取下管路，用合適溶劑沖洗疏通。
泵頭故障也會引起壓力問題。檢查泵頭是否有氣泡，可通過排氣操作排出氣泡。若泵頭密封墊磨損，需更換密封墊。
單向閥若出現堵塞或故障，會影響壓力。可將單向閥取下，用適當的溶劑超聲清洗，去除雜質後裝回。
還有可能是連接管路松動或泄漏。仔細檢查各連接部位，確保管路連接牢固，如有泄漏，需重新擰緊或更換密封件。
此外，色譜柱堵塞也會造成壓力異常。可嘗試反沖色譜柱，但要注意反沖方向和條件，避免損壞色譜柱。若反沖後仍無壓力，可能需要更換色譜柱。
『叄』 我是新手，請問如何反沖色譜柱
不到萬不得已，還是不要反沖。如果一定要反沖，那就要以較小的流速，如0.2 mL/min，進行反沖，反沖時，柱子下端不接檢測器，防止對檢測器產生污染。
『肆』 色譜儀,沒插純化器,做色柱活化有什麼後果
一般的正相反相柱應該都能反沖，只有兩端篩板孔徑不對稱的柱子不能反沖，不過目前這樣的柱子已經比較少見了。反沖是為了把柱頭的污染物沖洗掉，反沖後還是正著用比較好，以免柱子的兩頭都被污染。我們一直提倡的是：正向使用，反向沖洗。
2、我在做方法開發的時候,用乙腈和水作為流動相,在調整梯度的時候發現,剛開始用60%乙腈, RT為2.5分鍾,調到40%乙腈,RT沒有變化,30%也沒有變化,一直調到20%的時候,RT突然變到了約13分鍾,請問這是什麼原因?我用的是離子交柱。
答：離子交換柱的保留時間主要由洗脫液的離子強度和pH決定，你現在講的比較簡單，需要把你的方法說的詳細一點才能做具體的分析。譬如分析物是什麼情況，其含有極性電離基團和非極性基團是什麼性質？離子交換柱是聚合物基質還是硅膠基質？水相是什麼緩沖鹽？
3、對於一根常用的c18柱，拿到一根新柱的時候應該怎樣進行活化及維護？為什麼要這樣做？
答：新柱活化，實際上是一個平衡的過程，除了用流動相平衡外，有時候還必須用所測樣品對新柱進行平衡，特別是測定分子量比較高的多肽，尤其重要。因為分子量高的物質分子，擴散速度慢，平衡所需時間也相應較長。具體平衡方式也很簡單，多進幾次樣品，直到峰面積和保留時間穩定，再進行正式進樣測定。
如果要加快平衡時間，把前面用來平衡的進樣樣品濃度加大，或者不等洗脫完成，連續進樣多針。用待測物對新柱平衡，目的是將硅膠基質填料表面具有非特異性吸附的位點的吸附能力飽和掉。
4、測定多肽，一般採用什麼柱子？流動相是乙腈和水，還有微量的TFA。特別是像類似三肽的短肽，應該怎麼選擇柱子？
答：分子量不高的多肽一般選用常規C18柱就能測定，也有用離子交換柱、水性C18柱和Hilic親水作用柱的。
5、氨基柱在進酸性樣品時，很傷柱子，如使用一段時間後，柱效降低，峰形改變，如何恢復？
答：氨基柱測酸性樣品，應該是用氨基柱的HILIC模式。酸的存在可能會使略帶負電荷的氨基官能團質子化，導致使用一段時間後對於某些類的分析物保留性質有所改變或表現在柱效下降。建議：用5-10倍的柱體積的含0.5-1.0％NH3的乙腈-水(50:50)溶液沖洗該柱（沖洗後當然要再用不含鹼的流動相洗去多餘氨），之後再進行分析這類酸性分析物時建議在流動相中略微添加少許氨如0.1％。