導航:首頁 > 凈水問答 > 超濾離心管在哪買

超濾離心管在哪買

發布時間:2025-03-15 08:06:13

超濾離心管怎麼使用

蛋白濃縮和換Buffer通常使用的超濾管,常用Millipore的Amicon-Ultra-15超濾管(MWCO10kD)。也有其它型號的、不同體積大小和超濾管可選,視目的蛋白的分子量與濃縮前體積、濃縮目標體積而定。可重復使用。
1、選擇合適的超濾管,主要考慮MWCO和濃縮體積,通常應截留分子量不應大於目的蛋白分子量的1/3,比如目的蛋白分子量為35kDa,就可以選擇10kDa截留分子量的超濾管。若目的蛋白分子量為10kD左右,則可以用截留分子量3kD的超濾管。
2、新買來的超濾是乾燥的,使用前加入MilliQ水,水量完全過膜,冰浴或冰箱里預冷幾分鍾。然後將水倒出,即可加入蛋白液,加入的多少,以不超過管頂的白線為准。操作要輕,加入蛋白液前,超濾管需要插在冰上預冷。
3、平衡。質量和重心二者都要達到平衡。注意轉速和加速度不可太快,否則直接損壞超濾膜。開始離心超濾(離心機預冷至4度)。膜與轉軸的方向根據說明書調整(角轉離心機的情況是膜與軸垂直)。在實際使用中,一般轉速開的比說明書里的要低,這樣可以延長離心管的使用壽命。
4、當濃縮到剩下1ml時,【取50ul國產Bradford溶液,加入10ul流穿,看有沒變藍色,以此判斷超濾管是否漏掉蛋白。如果管漏了,將上層和流穿重新倒入新管中開始超濾。要精確判斷是否漏管,用5mg/ml的BSA離心10min,再取流穿,跑蛋白膠或Bradford粗測】,繼續加入剩下的蛋白液濃縮(在冰上操作,防止蛋白受熱),直到所有濃縮液都加完為止。離心過程中注意是否發生蛋白沉澱,導致堵管。若發生沉澱,要確定沉澱的具體原因,是蛋白濃度過高還是Buffer不合適;前者可用多根超濾管同時超濾,降低濃度的辦法解決,後者的方法是換不同的Buffer,直到蛋白不發生沉澱為止。
5、前面幾步用以濃縮蛋白,如果要換Buffer,在總蛋白液濃縮至1ml左右的時候,輕輕加入新的Buffer(經0.22um超濾膜超濾),再濃縮至1ml左右,連續三次,最後一次的濃縮終體積根據需要的蛋白濃度而定,一般不多於500ul,也有濃縮至200ul以內的情況。按照每次至少10倍左右的體積濃縮算,三次達到1000倍以上,基本上可以達到換buffer的目的。
6、取出最終蛋白濃縮液的操作在冰上操作,用黃槍頭(200ul)取,輕輕順著邊緣插入槍頭,輕輕吹打、混勻蛋白液,注意不要碰到超濾膜,然後吸取濃縮液,每次吸接近200ul,直到吸完。管底剩下的最後一點濃縮液不必吸取,否則難度太大,有可能損壞超濾膜。最後加入MilliQ水到超濾管中,沒過超濾膜,防止膜失水變干。
7、以下是處理超濾管,重復利用超濾管的步驟。
8、倒出超濾管里的水,用milliQ水輕輕潤洗幾次,【若管底有可見的蛋白沉澱,可以先加入水,然後用槍頭吹打,注意不要碰到膜,吹打至沉澱懸起,然後倒掉,不可用自來水猛沖】然後加入0.2M的NaOH溶液,室溫放置20min,期間平衡超濾管。再離心10min。倒出殘留的NaOH溶液,將管芯浸入MilliQ水的燒杯(1或2L)中,放置幾個小時,再換新的水,放置幾個小時,不斷稀釋NaOH濃度。50ml管和蓋子用自來水洗,內壁再用MilliQ水洗干凈。
9、取出浸沒的管芯,加至接近滿的MilliQ水,50ml管也加滿MilliQ水,將管芯慢慢放入50ml
離心管,排出部分水,然後蓋上蓋子,放4度保存,直到下次使用。一般來說,按照上述步驟和注意事項,每根管用三四年不會壞。

㈡ 超濾離心管怎麼使用

蛋白濃縮和換Buffer通常使用的超濾管,常用Millipore的Amicon-Ultra-15超濾管(MWCO10kD)。也有其它型號的、不同體積大小和MWCO超濾管可選,視目的蛋白的分子量與濃縮前體積、濃縮目標體積而定。可重復使用。
1、選擇合適的超濾管,主要考慮MWCO和濃縮體積,通常應截留分子量不應大於目的蛋白分子量的1/3,比如目的蛋白分子量為35kDa,就可以選擇10kDa截留分子量的超濾管。若目的蛋白分子量為10kD左右,則可以用截留分子量3kD的超濾管。
2、新買來的超濾是乾燥的,使用前加入MilliQ水,水量完全過膜,冰浴或冰箱里預冷幾分鍾。然後將水倒出,即可加入蛋白液,加入的多少,以不超過管頂的白線為准。操作要輕,加入蛋白液前,超濾管需要插在冰上預冷。
3、平衡。質量和重心二者都要達到平衡。注意轉速和加速度不可太快,否則直接損壞超濾膜。開始離心超濾(離心機預冷至4度)。膜與轉軸的方向根據說明書調整(角轉離心機的情況是膜與軸垂直)。在實際使用中,一般轉速開的比說明書里的要低,這樣可以延長離心管的使用壽命。
4、當濃縮到剩下1ml時,【取50ul國產Bradford溶液,加入10ul流穿,看有沒變藍色,以此判斷超濾管是否漏掉蛋白。如果管漏了,將上層和流穿重新倒入新管中開始超濾。要精確判斷是否漏管,用5mg/ml的BSA離心10min,再取流穿,跑蛋白膠或Bradford粗測】,繼續加入剩下的蛋白液濃縮(在冰上操作,防止蛋白受熱),直到所有濃縮液都加完為止。離心過程中注意是否發生蛋白沉澱,導致堵管。若發生沉澱,要確定沉澱的具體原因,是蛋白濃度過高還是Buffer不合適;前者可用多根超濾管同時超濾,降低濃度的辦法解決,後者的方法是換不同的Buffer,直到蛋白不發生沉澱為止。
5、前面幾步用以濃縮蛋白,如果要換Buffer,在總蛋白液濃縮至1ml左右的時候,輕輕加入新的Buffer(經0.22um超濾膜超濾),再濃縮至1ml左右,連續三次,最後一次的濃縮終體積根據需要的蛋白濃度而定,一般不多於500ul,也有濃縮至200ul以內的情況。按照每次至少10倍左右的體積濃縮算,三次達到1000倍以上,基本上可以達到換buffer的目的。
6、取出最終蛋白濃縮液的操作在冰上操作,用黃槍頭(200ul)取,輕輕順著邊緣插入槍頭,輕輕吹打、混勻蛋白液,注意不要碰到超濾膜,然後吸取濃縮液,每次吸接近200ul,直到吸完。管底剩下的最後一點濃縮液不必吸取,否則難度太大,有可能損壞超濾膜。最後加入MilliQ水到超濾管中,沒過超濾膜,防止膜失水變干。
7、以下是處理超濾管,重復利用超濾管的步驟。
8、倒出超濾管里的水,用milliQ水輕輕潤洗幾次,【若管底有可見的蛋白沉澱,可以先加入水,然後用槍頭吹打,注意不要碰到膜,吹打至沉澱懸起,然後倒掉,不可用自來水猛沖】然後加入0.2M的NaOH溶液,室溫放置20min,期間平衡超濾管。再離心10min。倒出殘留的NaOH溶液,將管芯浸入MilliQ水的燒杯(1或2L)中,放置幾個小時,再換新的水,放置幾個小時,不斷稀釋NaOH濃度。50ml管和蓋子用自來水洗,內壁再用MilliQ水洗干凈。
9、取出浸沒的管芯,加至接近滿的MilliQ水,50ml管也加滿MilliQ水,將管芯慢慢放入50ml
離心管,排出部分水,然後蓋上蓋子,放4度保存,直到下次使用。一般來說,按照上述步驟和注意事項,每根管用三四年不會壞。

㈢ 如何用蛋白濃縮管

選擇合適的超濾管,主要考慮MWCO和濃縮體積,最常見的是Ultra-15(10kD)。

通常應截留分子量不應大於目的蛋白分子量的1/3,比如目的蛋白分子量為35kDa,就可以選擇10kDa截留分子量的超濾管。若目的蛋白分子量為10kD左右,則可以用截留分子量3kD的超濾管。認真閱讀使用說明書,注意超濾膜對各種化學物質的耐受程度有所不同。

新買來的超濾是乾燥的,使用前加入MilliQ水,水量完全過膜,冰浴或冰箱里預冷幾分鍾。然後將水倒出,即可加入蛋白液,加入的多少,以不超過管頂的白線為准。操作要輕,加入蛋白液前,超濾管需要插在冰上預冷。

(3)超濾離心管在哪買擴展閱讀:

超濾濃縮離心管,最新推出專利產品Hydrosart膜2K型,具有極低的蛋白吸附特性,高流速、高通量,是免疫球蛋白濃縮和脫鹽的理想用膜。

備有四種材質的超濾膜:聚醚碸、三醋酸纖維素、再生纖維素和Hydrosart,可根據不同要求靈活選用;兩種回收濃縮液的方法:既可用吸管直接吸取並回收,又可將離心管放入離心機反甩,將濃縮液甩入回收帽中,加蓋保存。這兩種方法都可使濃縮液達到近乎完全回收;

㈣ 超濾濃縮離心管使用前要怎麼處理

可能不來同廠家的產品保存運輸條源件不一樣。
如果有甘油等保護劑,那就一定要洗干凈再加樣品。
乾的超濾管也要先潤濕再用,否則可能不能完全利用膜面積。
最好,用樣品buffer潤洗下再加樣,最大程度保證蛋白活性。尤其是用過後保存在NaOH或乙醇中後。
一般還是離心機甩一下好,使膜充分浸潤。

降低吸附的辦法有:
1,蛋白濃度不要過低
2,盡量選用纖維素的低吸附超濾管
3,用前可以用Tween 80等去垢劑潤洗(不影響蛋白活性的前提下)
4,加入保護蛋白,如BSA(不影響蛋白後續使用的前提下)

用完保存在20% EtOH中,4C保存,防止長菌,依不同樣品可以重復使用不同的次數。

㈤ 超濾管(超濾離心管)應用場景廣泛 超濾膜是其核心部件

超濾管,一種用於液體分離的膜過濾設備,其核心部件是超濾膜。這種管子由蓋子、過濾裝置和離心管組成。過濾裝置能實現滲透或保留樣品,超濾膜則由聚醚碸、聚氯乙烯、聚偏氟乙烯、聚碸等製成,2023年市場規模已達70億元以上,主要生產企業包括科泰興達、廈門三達、浙江開創、北京賽諾等。

超濾管採用切向流過濾技術,相較於傳統透析袋和針頭式濾器的死端過濾,其優勢在於減少了污染物富集和膜堵塞概率,延長了膜使用壽命。超濾管具有快速超濾、濃縮、置換、澄清、分離等功能,廣泛應用於生物醫葯、環境檢測、化學分析、食品加工等領域。在生物醫療領域,超濾管可用於蛋白富集、葯物篩選、DNA/RNA濃縮、葯品純化、葯物結合實驗等。在環境監測領域,它適用於水樣分析與監測。在食品領域,超濾管可用於分離或濃縮豆漿、啤酒中的雜質。

全球超濾管生產企業眾多,包括默克、德國賽多利斯、美國Millipore、Medivators等跨國公司以及深圳艾維迪泰生物、上海根生生物科技、廣州潔特生物等國內企業。我國超濾管生產企業數量多,但多數規模較小、技術相對落後,與國際先進企業相比在高端領域存在一定差距。隨著環保要求的提升和科學研究的深入,超濾管市場需求持續增長。

超濾管因其高效超濾和精準分離的特點,在科學研究、環境檢測、生物醫葯、食品、化學分析等多個領域得到廣泛應用。市場競爭激烈,未來隨著企業品牌效益的提升和市場競爭的加劇,超濾管市場集中度預計將有所提高。

㈥ 【求助】超濾能否脫鹽和濃縮一步完成啊

昨天有個millipore的技術人員就是這樣說的~HarveyWang(站內聯系TA)本人主要是從發酵液中提取酶,文獻上一般的步驟是先用硫酸銨沉澱,然後透析,再用超濾濃縮,最後冷凍乾燥, 這要看你需要做多大的體積了。:) (1)硫酸銨沉澱法:我的觀點是,如果你1000 mL的發酵液的話,硫酸銨沉澱可以用,但是這浪費多少硫酸銨啊?!做學術研究可以,如果你的課題是計劃做提取酶的工藝和中試的話,這種硫酸銨沉澱並不有太大的實用性。 (2)超濾步驟的選用要看你的酶溶液有多大的體積。 如果發酵液的酶的量並不是很濃的話,例如50 mL 10 mg/L的酶量,用這種超濾膜會損失掉大部分你的目地酶,都粘到膜上去了,很難洗下來(稀的NaOH可以)。不能輕信某品牌銷售說的話,用用就知道了。如果你的濃縮液體積比較大,例如100-500 mL,酶的濃度也很高,這是可以用超濾膜的。 (3)對於小體積的脫鹽透析,透析袋很好用的。這里是指10 mL-100 mL。從操作方便性上看,這個在小型試驗中我最喜歡用。好簡單啊。。。。 自己頂一個,解答的詳細的有重獎!(金幣可以再加) (1)發酵液的酶蛋白濃度大約是多少,純度是多少?發個SDS-PAGE看看,註明上樣量。 (2)硫酸銨沉澱後和透析後可上離子交換,這可以濃縮10-1000倍,還可以有純化效果,然後再冷凍濃縮啊。HarveyWang(站內聯系TA)哈哈哈哈,回帖就有金幣拿:Ddaidai0124(站內聯系TA)本人現在只是小規模的提取酶,馬上要上發酵罐,需要大規模的提取酶液,不是做酶學性質,所以酶的純度要求不高,和工業用酶的純度差不多就可以了!希望大家推薦個適合工業化提取酶液的工藝,主要考慮成本問題.請版主幫忙在增加懸賞金幣20個lvgl158(站內聯系TA)起碼知道 它的分子量 才能知道是否可以用同一個膜 如果小於一萬可能就有點難度 可以先用少量的硫酸銨澄清 離心後 進行超濾 在超濾前 必須的保證液體 清澈hezhao999(站內聯系TA)體積的在200ml以上用超濾儀,200ml以下可以用超濾離心管,如果不知分子量選用1000的膜完全可以了,如果知道分子量,則選擇酶分子量1/5的超濾膜。zhaocy8903(站內聯系TA)多大規模的發酵 多大規模的發酵

㈦ 超濾離心管如何選擇以及使用方法

超濾離心管在蛋白質、DNA和生物分子的濃縮、純化和脫鹽過程中被廣泛應用。選擇和使用超濾離心管時,需要理解其與微濾的區別。

微濾(Microfiltration)利用微孔膜介質去除溶液中尺寸為0.1 μm至10.0 μm的顆粒或生物體,廣泛應用於生物制葯預過濾和除菌過濾。微濾在細胞實驗中常用於樣品和培養基滅菌,以及從細胞裂解物中去除完整細胞和碎片,確保下游應用結果准確性。

超濾(Ultrafiltration)通過壓力或濃度梯度使料液通過半透膜進行分離,能截留尺寸范圍為1-1000kDa的分子,並允許鹽和水等小分子通過。它廣泛應用於蛋白質溶液的分離和純化,以及核酸樣品制備,如分子克隆和質粒純化。與沉澱法相比,超濾更為溫和,避免生物大分子失活。

超濾離心管是一種利用離心力驅動溶液通過超濾膜進行快速濃縮、滲濾和緩沖液置換的裝置,由蓋子、過濾裝置和離心管組成。通過選擇適合的膜孔徑,可進行除熱源、澄清和分離大分子污染物,或濃縮和脫鹽目標分子。

選擇超濾離心管時,需考慮樣品起始量及超濾膜的截留分子量(MWCO)。樣品體積決定離心管尺寸,而截留分子量則需根據目標大分子的分子量選擇,通常選擇比目標分子小2-3倍的膜。

使用超濾離心管涉及准備、加樣、離心和回收步驟。准備階段需沖洗設備以消除甘油殘留,然後在離心前加入適量純水或緩沖溶液。離心前確保離心機轉子平衡,以保持穩定。回收時,從過濾裝置或離心管中輕輕提取樣品,注意不要接觸或損壞超濾膜。

遵循上述步驟,正確選擇和使用超濾離心管,將有效實現蛋白質、DNA和生物分子的高效濃縮、純化和脫鹽,為科學研究和工業應用提供可靠支持。

閱讀全文

與超濾離心管在哪買相關的資料

熱點內容
脲醛樹脂屬於什麼行業 瀏覽:172
火電廠廢水污水危害 瀏覽:366
再生水回用方式是什麼 瀏覽:70
鍋爐除垢清洗液 瀏覽:939
三菱飲水機為什麼會有水垢 瀏覽:64
廢水回收技術經濟指標 瀏覽:689
空氣能熱水器盤管除垢 瀏覽:255
開水靜放3天有水垢 瀏覽:375
板式電解廢水處理 瀏覽:584
bvv反滲透膜 瀏覽:351
通用GE凈水器怎麼安裝示意圖 瀏覽:490
什麼是表面吸附作用離子交換吸附作用 瀏覽:423
一級a標准可以作為中水回用嗎 瀏覽:40
大型污水處理廠招聘 瀏覽:863
納濾對一價離子的截留率 瀏覽:840
市政道路雨污水管道勞務施工組織 瀏覽:115
血透析超濾量是什麼 瀏覽:432
污水車用什麼柴油 瀏覽:813
礦井污水治理整改方案 瀏覽:873
污水處理廠中水回用論文 瀏覽:272