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薄膜過濾法如何區分細菌酵母菌

發布時間:2025-01-10 23:39:00

『壹』 微生物純化水耐膽鹽革蘭陰細菌需要做嗎

薄膜過濾法,計數,每1ml純化水不得過100個,具體方法:
大腸菌群的檢查:取含培養專基10 ml的乳糖膽鹽發酵管若干支屬,分別加入供試水樣1 ml.另取乳糖膽鹽發酵培養基管1支加1ml洗液為陰性對照組,於36±1℃培養18~24 h.陰性對照應無菌生長.供試品乳糖膽鹽發酵管若無菌生長,或有菌生長但不產酸產氣或產酸不產氣,判該管未檢出大腸菌群.
黴菌及酵母菌計數:純化水取水樣1ml,均做平行,並做陰性對照,經直徑為50 mm、孔徑0.45μm 的薄膜過濾器過濾,小心取出濾膜,菌面向上貼於玫瑰紅鈉培養基平板上,將培養皿倒置於培養箱中,於23~28℃培養5天(可延長到7天),菌落計數;
細菌計數:純化水取水樣1 ml,並做陰性對照,經直徑為50 mm、孔徑0.45μm 的薄膜過濾器過濾,小心取出濾膜,菌面向上貼於營養瓊脂培養基平板上,將培養皿倒置於培養箱中,於30~35℃培養72 h,菌落計數
判定標准:純化水每片濾膜上微生物菌落總數不超過100 cfu,不得檢出大腸菌群;

『貳』 純化水微生物限度檢查方法

4.10微生物限度(薄膜過濾法)
4.10.1取相當於每張濾膜含1g或1ml供試品的供試液,加至適量的稀釋劑中,混勻,過濾。若供試品每1g或1ml所含的菌數較多時,可取適量稀釋劑的供試液1ml過濾。用pH7.0無菌氯化鈉-蛋白腖緩沖液或其他適宜的沖洗液沖洗濾膜,沖洗方法和沖洗量同「計數方法的驗證」。沖洗後取出濾膜,菌面朝上貼於營養瓊脂培養基或玫瑰紅鈉瓊脂培養基或酵母浸出粉腖葡萄糖瓊脂培養基平板上培養。每種培養基至少制備一張濾膜。
4.10.2陰性對照試驗
取試驗用的稀釋液1ml,照上述薄膜過濾法操作,作為陰性對照。陰性對照不得有菌生長。
4.10.3培養和計數
除另有規定外,細菌培養48小時,逐日點計菌落數,一般以48小時的菌落數報告;黴菌、酵母菌培養72小時,逐日點計菌落數,一般以72小時的菌落數報告;必要時,可適當延長培養時間至5~7天進行菌落計數並報告。菌落蔓延生長成片的平板不宜計數。點計菌落數後,計算各稀釋級供試液的平均菌落數,按菌數報告規則報告菌數。若同稀釋級兩個平板的菌落平均數不少於15,則兩個平板的菌落數不能相差1倍或以上。
4.10.4菌數報告原則
以相當於1g或1ml供試品的菌落數報告菌數;若濾膜上無菌落生長,以<1報告菌數(每張濾膜過濾1g或1ml供試品),或<1乘以稀釋倍數的值報告菌數。
這是我們公司的純化水微生物檢測部分內容,請參考。

『叄』 純化水微生物限度質量標准細菌、黴菌和酵母菌分別小於100cfu/ml還是相加小於100cfu/ml

葯典上說的是總數,就是細菌、黴菌、酵母菌的總和小於100cfu/ml。

『肆』 葯品領域的微生物檢測及標准

中國葯典微生物限度檢查法,為《中國葯典》附錄收載的關於葯品微生物檢查的法定方法。葯品的不同劑型的微生物檢測標准不同,具體如下:

1、制劑通則品種

制劑通則、品種項下要求無菌的制劑及標示無菌的制劑應符合無菌檢查法規定。

2、口服給葯制劑

細菌數每1g不得過l000cfu。每lml不得過100cfu。

黴菌和酵母菌數每lg或lml不得過100cfu。

大腸埃希菌每1g或lml不得檢出。

3、耳、鼻及呼吸道吸入給葯制劑

細菌數每1g、lml或l0cm²,不得過100cfu。

黴菌和酵母菌數每1g、lml或l0cm²,不得過10cfu。

金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌每1g、lml或l0cm²不得檢出。

大腸埃希菌鼻及呼吸道給葯的制劑,每1g、lml或l0cm²,不得檢出。

4、陰道、尿道給葯制劑

細菌數每1g、lml或l0cm²,不得過100cfu。

黴菌數和酵母菌數每1g、lml或l0cm²應小於10cfu。

金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、白色念珠菌每1g、lml或l0cm²,不得檢出。

5、直腸給葯制劑

細菌數每1g不得過l000cfu。每lml不得過100cfu。

黴菌和酵母菌數每1g或lml不得過100cfu。

金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌每lg或lml不得檢出。

6、其他局部給葯制劑

細菌數每1g、lml或l0cm²不得過100cfu。

黴菌和酵母菌數每1g、lml或l0cm²不得過100cfu。

金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌每1g、lml或l0cm²不得檢出。

7、含動物組織

含動物組織(包括提取物)的口服給葯制劑每10g或10ml還不得檢出沙門菌。

8、兼用途徑制劑

應符合各給葯途徑的標准。

(4)薄膜過濾法如何區分細菌酵母菌擴展閱讀

微生物限度檢查法的注意事項:

1、當建立產品的微生物限度檢查法時,應進行控制菌檢查方法的驗證,以確認所採用的方法適合於該產品的控制菌檢查。若產品的組分或原檢驗條件發生改變可能影響檢驗結果時,檢查方法應重新驗證。

2、檢查項目應當包括細菌數、黴菌數、酵母菌數及控制菌檢查。

3、微生物限度檢查應在環境潔凈度10000 級下的局部潔凈度100 級的單向流空氣區域內進行。

4、檢驗全過程必須嚴格遵守無菌操作,防止再污染。單向流空氣區域、工作檯面及環境應定期按《醫葯工業潔凈室(區)懸浮粒子、浮游菌和沉降菌的測試方法》的現行國家標准進行潔凈度驗證。

5、除另有規定外,本檢查法中細菌及控制菌培養溫度為30℃~35℃;黴菌、酵母菌培養溫度為23℃~28℃。

6、檢驗結果以1g、1ml、10g、10ml、10c㎡ 為單位報告,特殊品種可以最小包裝單位報告。

『伍』 純化水微生物怎麼算

2010版《中國葯典》對純化水微生物的要求是<100個/1ml。以下是檢測方法:

薄膜過濾法專,計數,每1ml純化水不得過100個,具體方屬法:
1、大腸菌群的檢查:取含培養基10
ml的乳糖膽鹽發酵管若干支,分別加入供試水樣1 ml.另取乳糖膽鹽發酵培養基管1支加1ml洗液為陰性對照組,於36±1℃培養18~24
h.陰性對照應無菌生長.供試品乳糖膽鹽發酵管若無菌生長,或有菌生長但不產酸產氣或產酸不產氣,判該管未檢出大腸菌群.
2、黴菌及酵母菌計數:純化水取水樣1ml,均做平行,並做陰性對照,經直徑為50 mm、孔徑0.45μm 的薄膜過濾器過濾,小心取出濾膜,菌面向上貼於玫瑰紅鈉培養基平板上,將培養皿倒置於培養箱中,於23~28℃培養5天(可延長到7天),菌落計數;
細菌計數:純化水取水樣1 ml,並做陰性對照,經直徑為50 mm、孔徑0.45μm 的薄膜過濾器過濾,小心取出濾膜,菌面向上貼於營養瓊脂培養基平板上,將培養皿倒置於培養箱中,於30~35℃培養72 h,菌落計數
3、判定標准:純化水每片濾膜上微生物菌落總數不超過100 cfu,不得檢出大腸菌群

『陸』 純化水微生物限度檢查法

採用來濾膜法進行微生自物檢測是一種國際公認的微生物標准檢驗方法,其得到AOAC、美國、歐洲和日本等國家的葯典、FDA和EPA等組織的承認,廣泛應用於環境監測、食品及飲料工業、化妝品、制葯工業品質控制和電子工業等領域。賽多利斯公司的濾膜法微生物檢測產品成功地應用於濾膜法已有20多年的歷史,實用而且方便實用,它簡化了微生物檢測程序。 濾膜法微生物檢測: 將適當孔徑的濾膜放入濾器,過濾樣品,由於濾膜的作用而將微生物保留在膜的表面上。樣品中微生物生長抑制劑可在過濾後用無菌水沖洗濾器而除去。然後,將濾膜放在培養基上培養,營養物和代謝物通過濾膜的微孔進行交換,在濾膜表面上培養出的菌落可以計數,並和樣品量相關。 濾膜法的優點: - 與直接法比較,可以檢測大量的樣品 - 濃縮效應使微生物檢測的准確度提高 - 帶有菌落的濾膜,可作為檢測的永久記錄存檔 - 可見的菌落和樣品量直接對應,得出定量結果 操作具體一點就是:薄膜過濾法檢測,一個樣過濾一份,就是200ml的純化水通過濾膜,將該濾膜浸泡在滅菌好的l生理鹽水中,再接種到平皿中,製成10級、100級、1000級稀釋倍數的細菌、黴菌和酵母菌稀釋培養皿,即可

『柒』 怎麼樣檢測蒸餾水的微生物合格不

一般有下面幾種方法:

薄膜過濾—使用標稱孔徑不超過0.45 um的薄膜過濾器。選擇過濾材質的類型,其截留細菌能力應不被供試品的組份所影響。對於列出的每種微生物,使用一個薄膜過濾器。
加入適當量的,按照樣品制備、接種和稀釋、以及抗微生物活性的中和/去除所述制備的樣品(通常是代表1g產品,或如果預期有大量cfu,可以更少量)於膜過濾器,立即過濾,並用合適量的稀釋劑沖洗膜過濾器。
為了確定好氧微生物的總數(TAMC),將薄膜過濾器的移到大豆-酪蛋白消化瓊脂表面上。為了確定酵母菌和黴菌總數(TYMC),將薄膜轉移到沙氏葡萄糖瓊脂表面上。按表1所述培養平板,進行計數。

平板計數法—對每種培養基執行平板計數法時至少重復一次,使用平均計數結果。
傾注平板法—在直徑9cm的培養皿中,加入按照樣品的制備、接種與稀釋和抑菌活性的中和/去除所述制備的樣品1mL,以及15到20mL的大豆-酪蛋白消化瓊脂或沙氏葡萄糖瓊脂,保持兩種培養基溫度均不超過45°。如果使用更大的培養皿,則相應增加培養基的量。對於表1中列出的各種微生物,至少使用兩個培養皿。
按表1所述培養平板。採用每種培養基計數的算數平均值,並計算原始接種物的cfu數。
表面鋪展法—對於直徑9cm的培養皿,在每個培養皿加入約45°的15到20mL的大豆-酪蛋白消化瓊脂或沙氏葡萄糖瓊脂,使其凝固。如果使用更大的培養皿,相應增加瓊脂的量。在層流櫃或培養箱中使平板乾燥。表1中列出的每種微生物,至少用兩個培養皿。將已測體積,不少於0.1mL的樣品鋪展到培養基表面上,樣品是按照樣品的制備、接種與稀釋和抑菌活性的中和/去除所述制備的。按傾注培養法所述培養並計數。

最大機率(MPN)法—MPN法的精密度和准確性要比薄膜過濾法或平板計數法低。計黴菌數得到的結果尤其不可信。因此,保留MPN法僅在無其它可用方法時對TAMC計數。如果所用方法判定,按如下進行。
制備一系列,至少三個10倍系列稀釋的按照樣品的制備、接種與稀釋和抑菌活性的中和/去除所述制備的樣品。從每個級別的稀釋液中,取1g或1mL接種到三個含有9到10mL的大豆-酪蛋白消化肉湯的試管中。如有必要,可以在培養基中加入類似聚山梨醇酯80的表面活性劑或抑菌因子滅活劑。因此,如果制備了三個稀釋度,就要接種9個試管。
所有試管在30° 到35°培養不超過3天。如果由於供試品特性而導致讀出結果困難或不確定,則在同種肉湯或大豆-酪蛋白消化瓊脂上以相同的溫度再次培養1到2天,並使用此次結果。

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