㈠ 單純超濾的注意事項
(一) 患者血細復胞比容(制Hct)水平越高,越容易在單純超濾過程中因血液濃縮、血液粘度上升而使血流阻力增加。因此對於Hct 較高的患者,應適當增加抗凝葯物的劑量。
(二) 患者血清白蛋白水平越高,單純超濾過程中血清蛋白成份越容易黏附於濾器膜上,而影響超濾效果;若血清白蛋白水平過低,血漿膠體滲透壓下降,可以導致單純超濾過程中患者組織間隙中的水分迴流入血減少,血管再充盈不足,容易發生低血壓而難以完成超濾目標,此類患者在單純超濾過程中是否補充血清白蛋白制劑,應依據臨床實際情況做出判斷。
(三) 溫度過低將增加血液粘度,影響超濾效果。因此,單純超濾過程中應注意給患者保溫。
(四) 單純超濾過程中,血液中電解質成份將隨水分等比例清除,因此超濾結束後患者體內各種電解質的總量、尤其是鈉離子總量將降低;而超濾引起的有效循環血容量的下降,將刺激交感神經興奮,促使鉀離子從細胞內移向細胞外,因此,超濾結束後患者血清鉀水平可能升高。
(五) 選擇高通量濾器,有助於完成目標超濾量;但超濾過程中氨基酸等營養物質的丟失也會因此而增多。
㈡ 如何用蛋白濃縮管
選擇合適的超濾管,主要考慮MWCO和濃縮體積,最常見的是Ultra-15(10kD)。
通常應截留分子量不應大於目的蛋白分子量的1/3,比如目的蛋白分子量為35kDa,就可以選擇10kDa截留分子量的超濾管。若目的蛋白分子量為10kD左右,則可以用截留分子量3kD的超濾管。認真閱讀使用說明書,注意超濾膜對各種化學物質的耐受程度有所不同。
新買來的超濾是乾燥的,使用前加入MilliQ水,水量完全過膜,冰浴或冰箱里預冷幾分鍾。然後將水倒出,即可加入蛋白液,加入的多少,以不超過管頂的白線為准。操作要輕,加入蛋白液前,超濾管需要插在冰上預冷。
(2)來不及超濾的蛋白怎麼辦擴展閱讀:
超濾濃縮離心管,最新推出專利產品Hydrosart膜2K型,具有極低的蛋白吸附特性,高流速、高通量,是免疫球蛋白濃縮和脫鹽的理想用膜。
備有四種材質的超濾膜:聚醚碸、三醋酸纖維素、再生纖維素和Hydrosart,可根據不同要求靈活選用;兩種回收濃縮液的方法:既可用吸管直接吸取並回收,又可將離心管放入離心機反甩,將濃縮液甩入回收帽中,加蓋保存。這兩種方法都可使濃縮液達到近乎完全回收;
㈢ 蛋白用超濾管濃縮容易沉澱怎麼辦
可能是抄這個蛋白的水溶性較差,也就是只能保持在一定濃度不能太高
另外就和這個蛋白的穩定性有關了,超濾時保持低溫,體積縮小一點後就把濾液混勻避免局部濃度過高,選擇更合適的緩沖液,添加一點甘油等小分子物質等都可以增加蛋白的穩定性。
㈣ 超濾法分離的蛋白留在哪裡
被截留在半透膜上。透析和超濾通常用於蛋白質分離方法。待分離的透析混合物放置在由半透膜的透析袋,然後浸入在透析液分離。超濾是利用離心力或壓力強行使水和其它小分子通過半透膜,而蛋白質被截留在半透膜上的過程。