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超濾管規格

發布時間:2025-01-08 15:33:46

『壹』 超濾離心管怎麼使用

蛋白濃縮和換Buffer通常使用的超濾管,常用Millipore的Amicon-Ultra-15超濾管(MWCO10kD)。也有其它型號的、不同體積大小和MWCO超濾管可選,視目的蛋白的分子量與濃縮前體積、濃縮目標體積而定。可重復使用。
1、選擇合適的超濾管,主要考慮MWCO和濃縮體積,通常應截留分子量不應大於目的蛋白分子量的1/3,比如目的蛋白分子量為35kDa,就可以選擇10kDa截留分子量的超濾管。若目的蛋白分子量為10kD左右,則可以用截留分子量3kD的超濾管。
2、新買來的超濾是乾燥的,使用前加入MilliQ水,水量完全過膜,冰浴或冰箱里預冷幾分鍾。然後將水倒出,即可加入蛋白液,加入的多少,以不超過管頂的白線為准。操作要輕,加入蛋白液前,超濾管需要插在冰上預冷。
3、平衡。質量和重心二者都要達到平衡。注意轉速和加速度不可太快,否則直接損壞超濾膜。開始離心超濾(離心機預冷至4度)。膜與轉軸的方向根據說明書調整(角轉離心機的情況是膜與軸垂直)。在實際使用中,一般轉速開的比說明書里的要低,這樣可以延長離心管的使用壽命。
4、當濃縮到剩下1ml時,【取50ul國產Bradford溶液,加入10ul流穿,看有沒變藍色,以此判斷超濾管是否漏掉蛋白。如果管漏了,將上層和流穿重新倒入新管中開始超濾。要精確判斷是否漏管,用5mg/ml的BSA離心10min,再取流穿,跑蛋白膠或Bradford粗測】,繼續加入剩下的蛋白液濃縮(在冰上操作,防止蛋白受熱),直到所有濃縮液都加完為止。離心過程中注意是否發生蛋白沉澱,導致堵管。若發生沉澱,要確定沉澱的具體原因,是蛋白濃度過高還是Buffer不合適;前者可用多根超濾管同時超濾,降低濃度的辦法解決,後者的方法是換不同的Buffer,直到蛋白不發生沉澱為止。
5、前面幾步用以濃縮蛋白,如果要換Buffer,在總蛋白液濃縮至1ml左右的時候,輕輕加入新的Buffer(經0.22um超濾膜超濾),再濃縮至1ml左右,連續三次,最後一次的濃縮終體積根據需要的蛋白濃度而定,一般不多於500ul,也有濃縮至200ul以內的情況。按照每次至少10倍左右的體積濃縮算,三次達到1000倍以上,基本上可以達到換buffer的目的。
6、取出最終蛋白濃縮液的操作在冰上操作,用黃槍頭(200ul)取,輕輕順著邊緣插入槍頭,輕輕吹打、混勻蛋白液,注意不要碰到超濾膜,然後吸取濃縮液,每次吸接近200ul,直到吸完。管底剩下的最後一點濃縮液不必吸取,否則難度太大,有可能損壞超濾膜。最後加入MilliQ水到超濾管中,沒過超濾膜,防止膜失水變干。
7、以下是處理超濾管,重復利用超濾管的步驟。
8、倒出超濾管里的水,用milliQ水輕輕潤洗幾次,【若管底有可見的蛋白沉澱,可以先加入水,然後用槍頭吹打,注意不要碰到膜,吹打至沉澱懸起,然後倒掉,不可用自來水猛沖】然後加入0.2M的NaOH溶液,室溫放置20min,期間平衡超濾管。再離心10min。倒出殘留的NaOH溶液,將管芯浸入MilliQ水的燒杯(1或2L)中,放置幾個小時,再換新的水,放置幾個小時,不斷稀釋NaOH濃度。50ml管和蓋子用自來水洗,內壁再用MilliQ水洗干凈。
9、取出浸沒的管芯,加至接近滿的MilliQ水,50ml管也加滿MilliQ水,將管芯慢慢放入50ml
離心管,排出部分水,然後蓋上蓋子,放4度保存,直到下次使用。一般來說,按照上述步驟和注意事項,每根管用三四年不會壞。

『貳』 各大品牌超濾膜孔徑尺寸數據

超濾膜是通過壓力使水通過膜孔徑以過濾水中雜質的設備,孔徑是其關鍵因素,范圍通常在0.001-0.02微米之間,並非統一標准。不同品牌超濾膜的孔徑和功能有所不同。

陶氏超濾膜孔徑大小大致在0.005~0.1微米之間,截留分子量為1000~500,000道爾頓。該膜材質多樣,包括PVDF、PES、PP、PE、PS、PAN、PVC等,有效去除細菌、病毒、大分子有機物等。

海德能超濾膜孔徑為0.01微米,截留分子量分為10萬、5萬、1萬、6千等類型,能100%清除水中的病菌和微生物。

科氏超濾膜孔徑在0.002~0.1微米之間,截留分子量約1000~500000道爾頓。膜結構有管式、中空纖維、卷式、平板式等。

諾芮特超濾膜平均孔徑為0.010~0.025微米,最大不超過0.025微米。它能完全過濾水中的膠體、固體顆粒、病菌、隱性孢子等,具有出色的耐化學腐蝕和抗氧化性能。

蘇伊士GE超濾膜孔徑大小為0.2-0.02微米,材質有PVDF、復合纖維(TFM)。根據截留分子量和用途,分為GE、GH、GK、PT、PW、MW系列。

立升超濾膜採用改性PVC材質,孔徑為0.02微米,平均截留分子量為100,000道爾頓。有效去除水中的懸浮微粒、膠體、微生物等雜質,提供多種規格膜組件。

美能超濾膜孔徑在0.002~0.1微米之間,截留分子量為1000~500000道爾頓。有效過濾水中的膠體、蛋白質、微生物及大分子有機物,主要材料為PVDF和PES。

『叄』 要50kd的蛋白用什麼規格的超濾管

截留分子量5萬道爾頓的超濾膜。

『肆』 想買管式超濾膜有人給介紹下么

管式超濾膜組件容易清洗和更換,在原水狀態好的情況下,壓力損失較小,抗高壓能力強。能夠有效處理含有懸浮物、黏度高和容易堵塞管路的固體污染物質等。

『伍』 超濾膜哪種最好

不同的膜具有不同的功能作用,沒有說哪種最好。
家用凈水器的話,一般常用的超濾膜版主要材料為聚丙烯腈權,主要就是應用在凈水過濾,你可以選擇此類超濾膜。另外還有一種超濾膜主要材料為聚氯乙烯,也用於凈水過濾,還有工業水處理。這兩種都是常用的材料,綜合來看聚氯乙烯有一種合金毛細管式超濾膜,使用感較好,可以去有效水中的雜質。

『陸』 超濾管規格太小怎麼放進離心機

1、首先將超濾內管插入所提供的一個微量離心管中。
2、其次向超濾管內管中加入不超過500微升的樣本,並蓋上蓋子。
3、最後讓蓋子的連接帶朝著轉子的中央,用一個超濾管平衡即可。

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