1. 超濾離心管如何選擇以及使用方法
超濾離心管在蛋白質、DNA和生物分子的濃縮、純化和脫鹽過程中被廣泛應用。選擇和使用超濾離心管時,需要理解其與微濾的區別。
微濾(Microfiltration)利用微孔膜介質去除溶液中尺寸為0.1 μm至10.0 μm的顆粒或生物體,廣泛應用於生物制葯預過濾和除菌過濾。微濾在細胞實驗中常用於樣品和培養基滅菌,以及從細胞裂解物中去除完整細胞和碎片,確保下游應用結果准確性。
超濾(Ultrafiltration)通過壓力或濃度梯度使料液通過半透膜進行分離,能截留尺寸范圍為1-1000kDa的分子,並允許鹽和水等小分子通過。它廣泛應用於蛋白質溶液的分離和純化,以及核酸樣品制備,如分子克隆和質粒純化。與沉澱法相比,超濾更為溫和,避免生物大分子失活。
超濾離心管是一種利用離心力驅動溶液通過超濾膜進行快速濃縮、滲濾和緩沖液置換的裝置,由蓋子、過濾裝置和離心管組成。通過選擇適合的膜孔徑,可進行除熱源、澄清和分離大分子污染物,或濃縮和脫鹽目標分子。
選擇超濾離心管時,需考慮樣品起始量及超濾膜的截留分子量(MWCO)。樣品體積決定離心管尺寸,而截留分子量則需根據目標大分子的分子量選擇,通常選擇比目標分子小2-3倍的膜。
使用超濾離心管涉及准備、加樣、離心和回收步驟。准備階段需沖洗設備以消除甘油殘留,然後在離心前加入適量純水或緩沖溶液。離心前確保離心機轉子平衡,以保持穩定。回收時,從過濾裝置或離心管中輕輕提取樣品,注意不要接觸或損壞超濾膜。
遵循上述步驟,正確選擇和使用超濾離心管,將有效實現蛋白質、DNA和生物分子的高效濃縮、純化和脫鹽,為科學研究和工業應用提供可靠支持。