有關系的
一般 溶液的 電導率 不能高於 某個數值 這個數值 是根據 離子交換樹專脂 的特性決定的
如果 高於這屬個數值 離子交換樹脂 就不能有效 的 進行 離子交換了
就好比 是 一輛中巴車 只能 坐20 個人 現場有30個人 肯定會剩下 10個人 不能上車的
一樣的道理 加入離子交換樹脂 一次處理 只能是 20個單位的離子
但是 上樣 溶液 中有 25個單位的離子 那肯定 有5個單位的離子 不能 在樹脂上進行 離子 交換
溶液的 電導率 就是體現 溶液中 離子多少的數值
所以 這個數值 一定要 小於 樹脂的 上限
望採納
⑵ Deae52陰離子交換柱上樣量怎麼確定，想盡可能上很多樣品，但是不會影響分離效果
陰離子交換器 又叫陰床，作用是用陰樹脂中的氫氧根交換掉水中的其他陰離版子。離子交換器分為權:鈉離子交換器、陰陽床、混合床等種類，。離子交換柱(器)外殼一般採用硬聚氯乙烯(PVC)、硬聚氯乙烯復合玻璃鋼(PVC-FRP)、有機玻璃(PMMA)、有機玻璃復合透明玻璃鋼(PMMA-FRP)、鋼襯膠(JR)、不銹鋼襯膠等材質。主要用於鍋爐、熱電站、化工、輕工、紡織、醫葯、生物、電子、原子能及純水處理的前道處理，工業生產所需進行硬水軟化、去離子水制備的場合，還可用於食品葯物的脫色提純，貴重金屬、化工原料的回收，電鍍廢水的處理等。 有機玻璃離子交換裝置耐腐蝕、無色透明、適用於食品、醫葯、製糖及電子工業小規模純水制備。碳鋼襯膠離子交換裝置具有制水量大、強度高、成本低等特點，適用於大型鍋爐軟化水及大規模純水制備。
⑶ 關於液相色譜法純化蛋白質
凝膠過濾色譜法：來 解析度較高源，但是上樣量僅為柱體積的1%，而且對流速也有嚴格的限制
離子交換色譜法：根據目的蛋白質表面所含有的氨基酸殘基帶有的凈電荷分離蛋白質，但是解析度沒有凝膠過濾高
親和層析法： 根據生物分子的特異性分離目的蛋白，特異性很高，但是配件容易丟失 適合含有特異性的標簽的或者抗體
疏水色譜：根據疏水性來分離蛋白質，缺點是有的蛋白質在高鹽中溶解度降低，所以應用范圍受到限制，適合蛋白質表面含有較多疏水性氨基酸殘基的疏水性蛋白質
⑷ 疫苗提純分離用離子交換層析工藝介紹
陰離子交換層析去除乙腦疫苗製品中殘留DNA，其特點在於將乙腦疫苗濃縮液經過凝膠過濾層析初步純化後，利用陰離子交換層析，DNA被牢牢吸附在色可賽思離子交換介質上，而乙腦病毒蛋白則直接穿透，有效去除宿主DNA，解決乙腦疫苗行業面臨的問題。
2010版《中國葯典》提高人用狂犬病疫苗中蛋白含量標准，需確保純化後的病毒液總蛋白不超過80μg/劑，牛血清蛋白殘留低於50ng/劑，宿主細胞蛋白殘留不超過24μg/劑。生物葯企需優化純化工藝，利用凝膠層析與色可賽思離子交換層析相結合，以提高疫苗純化效果。層析柱的選擇、上樣體積、速度、濃度與抗原收集點，均影響疫苗純化效率。結合兩種層析柱，可優化疫苗純化，確保質量與效率。
採用離子交換法去除流腦多糖疫苗粗糖中的雜蛋白，結合高效陰離子交換色譜與電化學檢測，快速檢測Hib結合疫苗中殘余溴化氰與CDAP，為疫苗生產提供可靠檢測方法。同時，HPAEC-PAD檢測法測定腦膜炎球菌多糖含量，驗證方法的專屬性、精密度與准確性，與傳統方法比較，結果一致，可用於疫苗成品多糖含量檢測。
百日咳疫苗的分離純化通過ELISA與還原性SDS-PAGE方法研究脲的影響，加入2mol/L脲作為穩定劑，顯著提高色可賽思離子交換層析和凝膠過濾層析效果。
利用Sabin株脊髓灰質炎病毒純化的離子交換層析條件，對粗純液進行IEC，優化純化步驟，提高疫苗質量。
重組幽門螺桿菌過氧化氫酶脂質體疫苗的制備中，陰離子交換層析和凝膠過濾層析分離純化Kat重組蛋白，薄膜分散法制備疫苗，通過透射電鏡測定粒徑，為疫苗提供有效免疫保護。
離子交換層析純化人輪狀病毒滅活疫苗，通過色可賽思離子交換柱層析、透析脫鹽、過濾除菌滅活等步驟，制備出總蛋白去除率為99.69%、保持良好抗原性和免疫原性的疫苗。
狂犬病疫苗中去除殘余DNA，優化培養條件、選擇合適孔徑的超濾膜包、增加陰離子交換柱工藝，以降低Vero細胞DNA殘留量，保證疫苗質量。
利用大腸桿菌表達系統制備HPV-6類病毒顆粒，研究其免疫原性，通過純化、體外組裝、形態檢測與中和實驗，評價誘導的抗HPV-6/11中和抗體水平，簡便高效制備具有免疫原性的HPV-6疫苗。
⑸ 急求~離子交換柱清洗方法
離子交換層析
Tina 發表於 2006-2-21 12:21:00
材料與儀器
DEAE-32纖維素，pH8.0 0.01 mol/L Tris-HCl，工程菌破碎離心後的上清液；
層析柱
二、 方法與步驟
1） 裝柱：
用水清洗層析柱，柱內留存水距底部約1cm，加入18ml介質（凝膠溶液）。
2） 平衡：
加0.01M,PH8.0,tris-HCl緩沖液，直至流出液PH與緩沖液一致。
3） 上樣：
用量筒量出上清液體積，再加入等體積緩沖液混合，取EP管留1.5ml。待柱中水流出，至剛好覆蓋凝膠表面，靠璧緩慢加樣。
4) 用50ml緩沖液洗滌，用EP管隨機收集樣品穿出液和洗滌穿出液。
5) 洗脫：
將梯度洗滌儀和層析柱連接，洗脫瓶A（混合器）加200µl緩沖液，開口打開至兩瓶液面相平，相通管道出無氣泡，關閉連接，A中加入6gNaCl溶解，把裝置放在梯度混合儀上，開動攪拌器開關，打開A和B的連接通道，層析柱下端連收集器，收集洗脫流出液。
6） 控制流速，約4min/管，2-3ml/管。
分子篩的是凝膠層析
Sephadex G-100凝膠層析
Tina 發表於 2006-2-21 12:27:00
材料與儀器
Sephadex G-100，0.5 mol/L pH8.0 Tris-HCl，濃縮液
層析柱
二、 方法與步驟
1） Sephadex G-100 凝膠預處理
a) 100ml燒杯，稱取5克sephadex G-100,加入50ml去離子水，浸泡溶脹24小時。
b) 傾去sephadex G-100溶脹後凝膠上層的水，加入凝膠等體積的1.0 mol/L NaOH液處理，用攪棒輕輕攪動，並浸泡1小時處理後傾去。用去離子水洗滌。洗滌過程中，用傾去法除去細顆粒。其方法是用攪棒將凝膠攪勻（注意不要過分用力攪拌，以防止顆粒破碎），放置數分鍾，將未沉澱的細顆粒隨上層水倒掉。浮選3-5次，直至上層沒有細顆粒為止，再浸泡水洗至PH中性。
c) 將Sephadex G-100凝膠水溶液盛放於抽濾瓶中，用洗耳球塞住杯口，減壓抽氣30分鍾，除去凝膠溶液內的氣泡，將脫氣後的凝膠溶液輕輕倒入燒杯中，其中盛有1/2去離子水。
2) 裝柱
a) 層析柱(1.0Î50cm)用水清洗干凈，柱的上、下端聯接塑料管接上小乳膠管，裝上螺旋夾。將層析柱垂直裝好。校直過程用下端綁有鑰匙的繩子掛於鐵架的不同位置，從多角度校正使柱垂直。打開柱上埠，從柱底下出口管朝柱內注入水，使柱底全部充滿水而不留氣泡，關閉柱出口。最終柱內留存有2 cm的水。從出口處接上一根直徑2 mm細塑管，塑管另一端固定在柱的上端部位。
b) 攪動凝膠溶液（切勿攪動太快，以免空氣再逸入），使形成均一的薄膠漿，並立即沿玻棒倒入層析管內，讓加入的凝膠在柱內自然沉降，待柱底面上積起約1-2 cm的凝膠床後，打開柱出口水流。隨著柱內水的流出，上面不斷加入凝膠液，使形成的凝膠床面上有凝膠連續下降（如果凝膠床面上不再有凝膠顆粒下降，應該用攪棒均勻地將凝膠床攪起數厘米高，然後再加凝膠，不然就會形成界面，影響層析效果）。
c) 凝膠沉積到柱內凝膠是否均勻，有否「紋路」或氣泡。若層析柱不均一，必須重新裝柱。
3） 平衡
柱裝好後，使層析床穩定15-20分鍾，然後連接洗脫瓶出口和層析柱頂端，用3-5倍體積地緩沖液平衡層析柱。平衡過程中控制上柱緩沖液地進柱操作壓保持恆定。保持流速每滴/10秒。直至流出液的PH與上柱緩沖液完全相同。
4） 樣品洗脫
a) 上樣准備：
i) 上樣前打開層析柱上端，先檢查凝膠床界面是否平整，如果傾斜不平整，可用玻棒將凝膠床界面輕輕攪起後，再使凝膠自然沉降，形成平整狀態的凝膠床界面。用毛細吸管小心吸去大部分清液，然後讓液面自然下降，直至幾乎露出凝膠床界面。
ii) 樣品放入高速離心機，12000r/min、離心5 min。
iii) 上樣前吸取50µl樣品於EP管中，以備走電泳。
b) 樣品上樣：
i) 將樣品由玻棒引流沿管壁加入到凝膠床面上，注意不要將床面凝膠沖起。同時打開層析柱下面流出液開關（控制流速1滴/20秒），保持層析柱下面流出滴速與上樣的滴速一致，控制凝膠床界面不能脫水，並控制樣品區帶盡量狹窄。
ii) 當1.5ml樣品全部加入後，用 1-2 ml的0.5mol/L PH8.0 Tris-HCl洗脫液同上樣時一樣地保持層析柱下面流出滴速與上樣的滴速一致以控制凝膠床界面不能脫水，小心清洗凝膠床界面表面，使黏附著的樣品全部洗入凝膠床。
iii) 然後開始控制上樣的滴速大於層析柱下面流出滴速，使幾乎與凝膠床界面相平的洗脫液液面慢慢提高至凝膠床界面高出2cm左右，封閉層析柱上端。
iv) 保持層析柱上柱洗脫液入口處與層析柱下面流出處有一定勢壓。控制上柱緩沖液的進柱操作壓保持恆定。
c) 洗脫：
用0.1 mol/L PH8.0 Tris-HCl 緩沖液洗脫，用部分收集器收集，4分鍾/管（約2-3ml/管），收集約1-30管。
5） 酶活、酶濃度測定，參見2.6.2，2.6.3
6） 最高酶活收集管洗脫液留50µl，以備走電泳。
7） 將酶活較高的收集液10~14管合並，測定總體積為7.1 ml，精確測定酶活性。並用考馬思亮藍測定蛋白濃度。測酶活時體系稀釋了200倍，定蛋白時無稀釋。
⑹ 離子交換層析層析柱上樣體積大會導致什麼
影響解析度。離子交換層析層析柱上樣體積大會受外界影響較大，體積可能隨離子強度和pH變化有較大改變，影響解析度。離子交換層析是一種根據被分離物質的分子表面電荷性質來分離的吸附層析，通過電荷性質分離相反電荷性質之間的作用，蛋白質上的電荷與填料表面的電荷相互作用。
⑺ 陽離子交換樹脂和陰離子交換樹脂的區別和用法
陽離子交換樹脂：活性基團為陽離子，比如氫離子，鈉離子等。樹脂上的活性基團與上樣液中的陽離子發生交換，那麼氫離子或鈉離子流出，上樣液中的陽離子留在了樹脂上，再經過洗脫，將目的物陽離子洗脫下來，從而達到分離純化的目的。陰離子交換樹脂：活性基團為陰離子，比如氫氧根離子，氯離子等。上樣液中的陰離子與氫氧根離子或氯離子發生交換，目的物結合到了樹脂上，再洗脫下來。樹脂用法：以陽離子樹脂為例。1，樹脂用50~60℃熱水泡，不時攪拌，開始每隔15分鍾換水一次，換4次，再每隔半小時換水一次，換4次。此時水應為透明，若不透明還有其他顏色或渾濁，繼續水洗。2，樹脂裝柱。用1N鹽酸緩慢流過樹脂柱，大約每小時走1.5倍柱體積，共走3~4柱體積，換去離子水沖柱至中性。3，用1N 氫氧化鈉緩慢流過樹脂柱，大約每小時走1.5倍柱體積，共走3~4柱體積，換去離子水沖柱至中性。4，重復2，樹脂變為氫型。不重復2，樹脂為鈉型。 一般樹脂廠商都會告訴你如何處理活化的。
⑻ 離子交換樹脂柱上柱速度
柱子下端流出液的速度是2倍柱體積每小時。層析柱的下端一般是由旋專塞的，開口大小控屬制流速啊，拿個量筒記下時間，比如5分鍾能流出多少體積，最後換算成每小時多少，比較下速度快慢，多退少補。柱子下端的旋塞不太容易控制流速的話，可以在下面接一個輸液器，就是打點滴那種，很便宜，一看你就知道怎麼用。可以手動上樣，如果懶或者柱子高，可以加個泵，將樣品通過泵打到柱子上端。夠詳細吧。