Ⅰ 用離子交換法從海帶提取碘的實驗中,洗脫為什麼要分兩步
樹脂吸附碘的時候是以多碘離子(I3-)吸附,因此需要第一次用氫氧化鈉洗脫,發生歧版化反應,洗權脫液中主要為I-和IO3-(碘酸根);第二次用氯化鈉洗,發生離子交換,洗脫液主要為I-,順便將樹脂轉換成氯型。如果採用一步法很難洗脫完全,收率偏低。
Ⅱ 離子交換樹脂可以用乙酸洗脫嗎
可以。離子交換樹脂吸附很強,雖然很難區分開,但是可以使明譽用部分乙醇,丙酮,乙酸,乙酯等洗脫下來,要注意洗脫的時候先用適量水洗下蛋白質、鞣質、低聚糖、多糖等極性物質瞎滾。乙酸,也叫醋酸,是一種有機化合物,是一種有機一元酸,為食醋主要磨槐余成分。
Ⅲ 為什麼離子交換色譜用碳酸鈉和碳酸氫鈉作為洗脫液
保證離子的移動速度。離子交換色譜為保證離子的移動速度,選用碳酸鈉和碳酸氫鈉作為洗脫液。離子交換色譜法,是以離子交換劑(如聚苯乙烯基質離子交換樹脂)作固定相,基於流動相中溶質(樣品)離子和固定相表面離子交換基團之間的離子交換。
Ⅳ 離子交換層析的具體操作
對於離子交換纖維素要用流水洗去少量碎的不易沉澱的顆粒,以保證有較好的均勻度,對於已溶脹好的產品則不必經這一步驟。溶脹的交換劑使用前要用稀酸或稀鹼處理,使之成為帶H+或OH-的交換劑型。陰離子交換劑常用「鹼-酸-鹼」處理,使最終轉為-OH-型或鹽型交換劑;對於陽離子交換劑則用「酸-鹼-酸」處理,使最終轉為-H-型交換劑。
洗滌好的纖維素使用前必須平衡至所需的pH和離子強度。已平衡的交換劑在裝柱前還要減壓除氣泡。為了避免顆粒大小不等的交換劑在自然沉降時分層,要適當加壓裝柱,同時使柱床壓緊,減少死體積,有利於解析度的提高。
柱子裝好後再用起始緩沖液淋洗,直至達到充分平衡方可使用。 加樣:
層析所用的樣品應與起始緩沖液有相同的pH和離子強度,所選定的pH值應落在交換劑與被結合物有相反電荷的范圍,同時要注意離子強度應低,可用透析、凝膠過濾或稀釋法達此目的。樣品中的不溶物應在透析後或凝膠過濾前,以離心法除去。為了達到滿意的分離效果,上樣量要適當,不要超過柱的負荷能力。柱的負荷能力可用交換容量來推算,通常上樣量為交換劑交換總量的1%-5%。 已結合樣品的離子交換前,可通過改變溶液的pH或改變離子強度的方法將結合物洗脫,也可同時改變pH與離子強度。為了使復雜的組份分離完全,往往需要逐步改變pH或離子強度,其中最簡單的方法是階段洗脫法,即分次將不同pH與離子強度的溶液加入,使不同成分逐步洗脫。由於這種洗脫pH與離子強度的變化大,使許多洗脫體積相近的成分同時洗脫,純度較差,不適宜精細的分離。最好的洗脫方法是連續梯度洗脫,洗脫裝置見圖16-6.兩個容器放於同一水平上,第一個容器盛有一定pH的緩沖液,第二個容器含有高鹽濃度或不同pH的緩沖液,兩容器連通,第一個容器與柱相連,當溶液由第一容器流入柱時,第二容器中的溶液就會自動來補充,經攪拌與第一容器的溶液相混合,這樣流入柱中的緩沖液的洗脫能力即成梯度變化。第一容器中任何時間的濃度都可用下式進行計算:
C=C2-(C2-C1)(1-V)A2/A1
式中A1、A2分別代表兩容器的截面積:C1、C2分別表示容器中溶液的濃度;V為流出體積對總體積之比。當A1=A2時為線性梯度,當A1>A2時為凹形梯度,A1>A2時為凸形梯度。
洗脫時應滿足以下要求:
①洗脫液體積應足夠大,一般要幾十倍於床體積,從而使分離的各峰不至於太擁擠。
②梯度的上限要足夠高,使緊密吸附的物質能被洗脫下來。
③梯度不要上升太快,要恰好使移動的區帶在快到柱末端時達到解吸狀態。目的物的過早解吸,會引起區帶擴散;而目的物的過晚解吸會使峰形過寬。
洗脫餾份的分析按一定體積(5-10ml/管)收集的洗脫液可逐管進行測定,得到層析圖譜。依實驗目的的不同,可採用適宜的檢測方法(生物活性測定、免疫學測定等)確定圖譜中目的物的位置,並回收目的物。
離子交換劑的再生與保存離子交換劑可在柱上再生。如離子交換纖維素可用2mol/:NaCl淋洗柱,若有強吸附物則可用0.1mol/LNaOH洗柱;若有脂溶性物質則可用非離子型去污劑洗柱後再生,也可用乙醇洗滌,其順序為:0.5mol/LNaOH-水-乙醇-水-20%NaOH-水。保存離子交換劑時要加防腐劑。對陰離子交換劑宜用0.002%氯已定(洗必泰),陽離子交換劑可用乙基硫柳汞(0.005%)。有些產品建議用0.02%疊氮鈉。
Ⅳ 離子交換時常用的洗脫方式有哪些
再生劑方面:
軟化鈉床:濃度為5-8%的NaCl溶液,再生劑用量為樹脂床層體積的3倍,再生液接觸內時間大於30分鍾;容
陽床(即氫床):濃度為4%的HCl溶液,再生劑用量為樹脂床層體積的3倍,再生液接觸時間大於30分鍾;
陰床:濃度為4%的NaOH溶液,再生劑用量為樹脂床層體積的3倍,再生液接觸時間大於30分鍾;
再生方式方面:
1)順流再生
2)逆流再生
3)混床設備分同步再生(即上面進鹼,下面進酸,計算準確流量,從中排口排出),兩步再生(即先從上部進鹼,從下部排除,然後從下部進酸,上部進水頂壓,從中排口排出)。