凝膠層析和離子交換層析的原理

⑴ 凝膠過濾層析和離子交換層析分離蛋白質的原理有何不同

所有的層析在原理上都是相通的，區別在於流動相和層析劑之間的作用力的不同。
離子交換是利用蛋白質表面的電荷與層析劑上的離子基團的靜電作用。
凝膠過濾層析利用了凝膠的多孔性，根據溶劑分子的大小進行分離。

⑵ 請教離子交換層析與親和層析方面的問題

親和層析是通過層析介質表面鍵合的配基與目標物質特異性吸附，然後非目標物流穿，再改變流動相是目標物質的特異性吸附消失，從而達到純化目的。凝膠層析是通過層析介質孔徑的設定，使分子量大小相差比較大的物質通過的路徑不一樣，從而達到分離效果。離子交換是通過層析介質表面的帶電荷的基團與目標之間產生吸附，通過改變鹽濃度使吸附力的大小改變，從而使不同的物質解吸的速度不一樣，達到分離的效果。離子交換又分陰離子交換和陽離子交換。一般來說以上三種，離子交換應用面最廣，親和特異性最好，體積排阻的話只能對分子量差距很明顯的物質進行分離。

⑶ 按層析原理分類有哪幾類層析

按層析原理分類層析主要可以分為以下幾類：

1、吸附層析

這種層析的原理是利用吸附劑的吸附作用，根據吸附劑與被吸附物之間的相互作用力不同進行分離。常見的吸附劑包括硅膠、氧化鋁、活性炭等。

層析的介紹

1、概念

層析法是利用不同物質理化性質的差異而建立起來的技術。所有的層析系統都由兩個相組成：一是固定相，另一是流動相。

當待分離的混合物隨流動相通過固定相時，由於各組分的理化性質存在差異，與兩相發生相互作用（吸附、溶解、結合等）的能力不同，在兩相中的分配（含量比）不同，且隨流動相向前移動，各組分不斷地在兩相中進行再分配。

分部收集流出液，可得到樣品中所含的各單一組分，從而達到將各組分分離的目的。

2、特點

各種薄層層析的原理與其對應的柱層析原理相同，但比其相應的柱層析具有更多的優越性。它同柱層析一樣，可選擇不同的支持劑和不同的處理方法進行薄層層析，它保持了操作方便、設備簡單、顯色容易等特點。

同時，層析速度快，一般僅需15～20分鍾，混合物易分離，分辨力一般比紙上層析高10倍，甚至100倍，它既適用於只有0.01微克（一般用幾十微克）的樣品分離，又能分離大於500毫克的樣品作制備用，而且可以使用如濃硫酸、濃鹽酸之類的腐蝕性顯色劑。

⑷ 比較凝膠層析與分配層析在實驗原理上的區別

比較凝膠層析與分配層析在實驗原理上的區別：含義不同，作用力不同。

一、作用力不同：所有的層析在原理上都是相通的，區別在於流動相和層析劑之間的作用力的不同。離子交換層析法是以具有離子交換性能的物質作固定相，利用它與流動相中的離子能進行可逆的交換性質來分離離子型化合物的一種方法。

二、含義不同：離子交換是利用蛋白質表面的電荷與層析劑上的離子基團的靜電作用。凝膠過濾層析利用了凝膠的多孔性，根據溶劑分子的大小進行分離。

原理

單個凝膠珠本身象個"篩子"。不同類型凝膠的篩孔的大小不同。如果將這樣的凝膠裝入一個足夠長的柱子中，作成一個凝膠柱。當含有大小不同的蛋白質樣品加到凝膠柱上時，比凝膠柱平均孔徑小的蛋白質就要連續不斷地穿入珠子的內部，這樣的小分子不但其運動路程長，而且受到來自凝膠珠內部的阻力也很大，所以越小的蛋白質，把它們從柱子上洗脫下來所花費的時間越長。

⑸ 層析法按原理分類有哪幾種各自分離依據是什麼

層析法按照原理可分為：
1、吸附層析：主要利用吸附劑對被吸附成分的版吸附能力差異進行權分離
2、分配層析：主要利用被分離成分在兩相不相混溶的溶劑中分配系數的差異進行分離
3、離子交換層析：主要利用被分離成分對離子交換劑的親和能力的不同進行分離。
4、電泳法：利用電流通過時，離子傾向性不同進行分離。
5、凝膠過濾色譜：利用凝膠對分子大小不同成分的阻滯作用不同而得到分離。