1. 離心超濾管 millipore 濾膜上好像有孔,離心後發現有大分子蛋白過來,怎麼回事該怎麼辦
離心超濾管是一次性的,原則上不能反復用的,所以濾膜上有孔就要更換了
2. 分離22KD的蛋白質選擇什麼型號的超濾膜
如果是分離22kDa及分子量遠小於它的小蛋白,推薦用millipore的超濾管,截留分子量10kDa,體積1-15ml都有。主要還是看你的目的蛋白是集中於濃縮液部分,還是濾液部分,從而選擇合適的截留分子量
3. 【求助】超濾能否脫鹽和濃縮一步完成啊
昨天有個millipore的技術人員就是這樣說的~HarveyWang(站內聯系TA)本人主要是從發酵液中提取酶,文獻上一般的步驟是先用硫酸銨沉澱,然後透析,再用超濾濃縮,最後冷凍乾燥, 這要看你需要做多大的體積了。:) (1)硫酸銨沉澱法:我的觀點是,如果你1000 mL的發酵液的話,硫酸銨沉澱可以用,但是這浪費多少硫酸銨啊?!做學術研究可以,如果你的課題是計劃做提取酶的工藝和中試的話,這種硫酸銨沉澱並不有太大的實用性。 (2)超濾步驟的選用要看你的酶溶液有多大的體積。 如果發酵液的酶的量並不是很濃的話,例如50 mL 10 mg/L的酶量,用這種超濾膜會損失掉大部分你的目地酶,都粘到膜上去了,很難洗下來(稀的NaOH可以)。不能輕信某品牌銷售說的話,用用就知道了。如果你的濃縮液體積比較大,例如100-500 mL,酶的濃度也很高,這是可以用超濾膜的。 (3)對於小體積的脫鹽透析,透析袋很好用的。這里是指10 mL-100 mL。從操作方便性上看,這個在小型試驗中我最喜歡用。好簡單啊。。。。 自己頂一個,解答的詳細的有重獎!(金幣可以再加) (1)發酵液的酶蛋白濃度大約是多少,純度是多少?發個SDS-PAGE看看,註明上樣量。 (2)硫酸銨沉澱後和透析後可上離子交換,這可以濃縮10-1000倍,還可以有純化效果,然後再冷凍濃縮啊。HarveyWang(站內聯系TA)哈哈哈哈,回帖就有金幣拿:Ddaidai0124(站內聯系TA)本人現在只是小規模的提取酶,馬上要上發酵罐,需要大規模的提取酶液,不是做酶學性質,所以酶的純度要求不高,和工業用酶的純度差不多就可以了!希望大家推薦個適合工業化提取酶液的工藝,主要考慮成本問題.請版主幫忙在增加懸賞金幣20個lvgl158(站內聯系TA)起碼知道 它的分子量 才能知道是否可以用同一個膜 如果小於一萬可能就有點難度 可以先用少量的硫酸銨澄清 離心後 進行超濾 在超濾前 必須的保證液體 清澈hezhao999(站內聯系TA)體積的在200ml以上用超濾儀,200ml以下可以用超濾離心管,如果不知分子量選用1000的膜完全可以了,如果知道分子量,則選擇酶分子量1/5的超濾膜。zhaocy8903(站內聯系TA)多大規模的發酵 多大規模的發酵
4. millipore 超濾管區別
1、裝量:0.5ML 4ML 15ML
2、截留分子量3K 10K 30K 50K 100K
5. 絲素溶液用超濾離心管離心後為什麼有沉澱
那些沉澱是溶液中的蛋白析出啦。
6. millipore是哪個國家的
目錄
釋義
權威詞典
用法
例句
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英文寫作助手
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想要圖(2)
millipore
['milipɔ:]
n. 微孔
網路釋義專業釋義
密理博
密理博(Millipore)作為全球領先的生命科學公司,為生物科學研究和生物制葯研發提供前沿的技術、工具和服務,攜手客戶共同面對人類健康問題的挑戰。
基於307個網頁-相關網頁
美國密理博
微孔
超濾管
短語
Millipore Corporation 密理博公司 ; 原受讓人
millipore filtr 微孔濾膜
millipore membrane 微孔濾膜
更多網路短語
21世紀大英漢詞典
Millipore ['milipɔ:]
n. 【生物化學、商標】微孔過濾器[亦作 millipore]
以上來源於:《21世紀大英漢詞典》
同近義詞
n. 微孔
micropore
雙語例句權威例句
Standard MF-Millipore Membranes, white, plain.
標准混合纖維素微孔膜,白色,光面。
www.deepbluexm.com
The paper introces the principle, component and common breakdown ofMILLIPORE ultrapure water system.
本文介紹了密理博超純化水系統的簡單原理、 組成及常見故障。
www.chemyq.com
Thesecond, the human hemoglobin was isolated and purified with the ultra-filtersystem (MILLIPORE company) in order to get depuration procts.
其次,採用Millipore公司的超 濾裝置分離提純人血紅蛋白,得到血紅蛋白純品;
http://dj.iciba.com
更多雙語例句
網路
millipore
密理博(Millipore)公司成立於1954年,總部位於美國麻省,在全世界設有47個辦事處,為100多個國家提供產品和技術服務。目前全球雇員超過5800人,在美國、法國和日本等國家擁有7家大型生產工廠,主要生產過濾膜及膜過濾產品。 20世紀80年代,密理博公司進入中國市場。先後在香港、北京、上海、廣州及成都設立了辦事機構,並於2000年4月在上海浦東外高橋保稅區建立了密理博(上海)貿易有限公司。 為了更好地滿足中國用戶的需求,密理博中國主頁於2006年11月向廣大用戶開放,介紹密理博中國有限公司的最新動態,力求為用戶打造專業的產品與服務信息交流平台。
7. millipore filter是什麼意思
millipore filter
微孔濾器,超濾器
Eggsamples , defatted bedetermined by the method.
雞蛋樣品以氨化乙腈提取,正己烷去脂,微孔濾膜過濾後檢測;
很高興第一時間為您解答,祝學習進步
如有問題請及時追問,謝謝~~O(∩_∩)O
8. 超濾離心管怎麼使用
蛋白濃縮和換Buffer通常使用的超濾管,常用Millipore的Amicon-Ultra-15超濾管(MWCO10kD)。也有其它型號的、不同體積大小和超濾管可選,視目的蛋白的分子量與濃縮前體積、濃縮目標體積而定。可重復使用。
1、選擇合適的超濾管,主要考慮MWCO和濃縮體積,通常應截留分子量不應大於目的蛋白分子量的1/3,比如目的蛋白分子量為35kDa,就可以選擇10kDa截留分子量的超濾管。若目的蛋白分子量為10kD左右,則可以用截留分子量3kD的超濾管。
2、新買來的超濾是乾燥的,使用前加入MilliQ水,水量完全過膜,冰浴或冰箱里預冷幾分鍾。然後將水倒出,即可加入蛋白液,加入的多少,以不超過管頂的白線為准。操作要輕,加入蛋白液前,超濾管需要插在冰上預冷。
3、平衡。質量和重心二者都要達到平衡。注意轉速和加速度不可太快,否則直接損壞超濾膜。開始離心超濾(離心機預冷至4度)。膜與轉軸的方向根據說明書調整(角轉離心機的情況是膜與軸垂直)。在實際使用中,一般轉速開的比說明書里的要低,這樣可以延長離心管的使用壽命。
4、當濃縮到剩下1ml時,【取50ul國產Bradford溶液,加入10ul流穿,看有沒變藍色,以此判斷超濾管是否漏掉蛋白。如果管漏了,將上層和流穿重新倒入新管中開始超濾。要精確判斷是否漏管,用5mg/ml的BSA離心10min,再取流穿,跑蛋白膠或Bradford粗測】,繼續加入剩下的蛋白液濃縮(在冰上操作,防止蛋白受熱),直到所有濃縮液都加完為止。離心過程中注意是否發生蛋白沉澱,導致堵管。若發生沉澱,要確定沉澱的具體原因,是蛋白濃度過高還是Buffer不合適;前者可用多根超濾管同時超濾,降低濃度的辦法解決,後者的方法是換不同的Buffer,直到蛋白不發生沉澱為止。
5、前面幾步用以濃縮蛋白,如果要換Buffer,在總蛋白液濃縮至1ml左右的時候,輕輕加入新的Buffer(經0.22um超濾膜超濾),再濃縮至1ml左右,連續三次,最後一次的濃縮終體積根據需要的蛋白濃度而定,一般不多於500ul,也有濃縮至200ul以內的情況。按照每次至少10倍左右的體積濃縮算,三次達到1000倍以上,基本上可以達到換buffer的目的。
6、取出最終蛋白濃縮液的操作在冰上操作,用黃槍頭(200ul)取,輕輕順著邊緣插入槍頭,輕輕吹打、混勻蛋白液,注意不要碰到超濾膜,然後吸取濃縮液,每次吸接近200ul,直到吸完。管底剩下的最後一點濃縮液不必吸取,否則難度太大,有可能損壞超濾膜。最後加入MilliQ水到超濾管中,沒過超濾膜,防止膜失水變干。
7、以下是處理超濾管,重復利用超濾管的步驟。
8、倒出超濾管里的水,用milliQ水輕輕潤洗幾次,【若管底有可見的蛋白沉澱,可以先加入水,然後用槍頭吹打,注意不要碰到膜,吹打至沉澱懸起,然後倒掉,不可用自來水猛沖】然後加入0.2M的NaOH溶液,室溫放置20min,期間平衡超濾管。再離心10min。倒出殘留的NaOH溶液,將管芯浸入MilliQ水的燒杯(1或2L)中,放置幾個小時,再換新的水,放置幾個小時,不斷稀釋NaOH濃度。50ml管和蓋子用自來水洗,內壁再用MilliQ水洗干凈。
9、取出浸沒的管芯,加至接近滿的MilliQ水,50ml管也加滿MilliQ水,將管芯慢慢放入50ml
離心管,排出部分水,然後蓋上蓋子,放4度保存,直到下次使用。一般來說,按照上述步驟和注意事項,每根管用三四年不會壞。