⑴ 色譜法的洗脫有哪兩種方式
使用高效液相色譜儀進行分析時,常用兩種洗脫方式,一種為等度洗脫,另一種為梯度洗脫。
用等度洗脫進行色譜分離時,由不同溶劑構成的流動相的組成,如流動相的極性、離子強度、pH值等,在分離的全過程中皆保持不變。用梯度洗脫進行色譜分離時,在洗脫過程中含2種或兩種以上不同極性溶劑的流動相組成會連續或間歇地改變,其間可調節流動相的極性,改善樣品中各組分間的分離度。
使用梯度洗脫時,也會使干擾分離的強保留雜質組分在較短的時間內從柱中清楚,使色譜柱保持干凈狀態,以進行下一次的分析。梯度洗脫一般是指流動相的組成隨分析時間的延長呈現線性變化,即線性梯度洗脫,可用於反相和正相高效液相色譜儀及離子對色譜法。
(1)色譜級試劑需要過濾嗎擴展閱讀:
注意事項:
1、流動相必須用HPLC級的試劑,使用前過濾除去其中的顆粒性雜質和其他物質(使用0.45μm或更細的膜過濾)。
2、流動相過濾後要用超聲波脫氣,脫氣後應該恢復到室溫後使用。
3、不能用純乙腈作為流動相,這樣會使單向閥粘住而導致泵不進液。
4、使用緩沖溶液時,做完樣品後應立即用去離子水沖洗管路及柱子一小時,然後用甲醇(或甲醇水溶液)沖洗40分鍾以上,以充分洗去離子。對於柱塞桿外部,做完樣品後也必須用去離子水沖洗20mL以上。
⑵ 高效液相色譜的流動相要經過哪些處理
流動相要先過濾,超聲脫氣後方可使用。
另外選用試劑是要選用色譜級的專,過濾時選擇合屬適的濾膜。流動相最好現配現用,不要保存太長時間。
使用旋轉蒸發儀上的真空泵 抽空氣20min,可以達到脫氣的作用。使用濾膜過濾掉雜質。
流動相必須過濾膜,用前要超聲除氣泡半個小時左右,否則基線不穩
儀器和色譜柱先要用有機溶劑(如乙腈等)好好清洗一下,待基線平衡後才能進一步工作,乙腈和水混合的流動性最好先超聲抽濾脫氣,准備工作做好了會節省好多時間。
若用色譜純的乙腈和超純水做流動相,流動相可以不用過濾膜,但超純水需要超聲約30分鍾脫氣。
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⑶ 請問:色譜純與分析純試劑的差別在哪
考慮問題不能單從片面去鑽牛角尖的。我們常說色譜純的試劑雜質比分析純的更少。因為通常儀器分析比化學分析靈敏度更高,對於分析純的試劑,有時候微量雜質在化學分析過程不影響結果,而在儀器分析中可能對結果影響很大或對設備損害很大,這都是不允許的。比如試劑中的微量固體雜質,化學分析可忽略影響,而儀器分析中固體會堵塞色譜分析關鍵部件,必須嚴格過濾除去。另外,絕大部分的化學試劑都有分析純,而色譜純試劑的種類相對就少得可憐了,主要因為目前色譜儀器分析需要使用的試劑種類不多,常見的醇,酮、酯、乙腈、烷烴等。在制備蒸餾水的過程中我們通常認為蒸餾是純化的常用辦法;實際在高純物質純化過程中,蒸餾不是萬能的,蒸氣在很多種情況下可能是共沸混合物,也可能在氣流影響下帶走固體粉塵等雜質,所以不是任何條件下都可以用蒸餾來實現純化的。[ ] 查看原帖>>
⑷ 液相色譜試驗用的試劑是不是都用色譜純級的
你所指的試劑是什麼?
有機溶劑必須要色譜級的。比如甲醇、乙腈,或者是正相的正己烷、乙醇等等。
水就用純凈水就可以。
不過鹽不需要。一般反相色譜裡面會涉及到緩沖鹽,比如磷酸鹽緩沖液,醋酸鹽緩沖液。用的比如磷酸二氫鉀,磷酸二氫鈉,醋酸鈉。還有調節pH用的鹽酸、氫氧化鈉。這些都是化學純、分析純。當然了,用前需要過濾。