陰離子交換柱如何沖洗

A. 離交柱陰柱難淋洗怎麼辦

陰離子交換柱的清洗方式通用有三種，分別用於清洗酸溶性、鹼溶性或有機污染物，在清洗過程中必須要確保嚴格按照清洗過程進行，否則會引起色譜柱的局部高壓而損壞色譜柱。對於有機溶劑清洗色譜柱，需要逐步減少有機溶劑的量以避免由於混合的流動相黏度的變化。

（一）選擇合適的清洗溶劑

1、對高價親水污染物：用1~3mol/l的鹽酸做淋洗液。

2、對低價親水污染物：用10倍的淋洗液。

3、有機污染物：有機污染物會引起色譜柱效降低，可以採用兼容的有機溶劑清洗，有時也可以採用高濃度的鹽酸與有機溶劑混合清洗則更有效。

4、對金屬污染物：會引起色譜峰不對稱性，可採用絡合劑酸類，如0.2mol/l草酸。

（二）清洗過程

1、配製500mL合適的清洗溶液。

2、斷開抑制器中，分別清洗保護住和分離柱，如果分離柱和保護住串聯清洗，則將保護柱接在分離柱之後。

3、設置流速對2mm色譜柱採用0.5ml/min，而對4mm色譜柱採用2ml/min。

4、用二次去離子水沖洗色譜柱15min。

5、用清洗液清洗色譜柱60min。

6、用二次去離子水沖洗色譜柱15min。

7、連接抑制器，用淋洗液平衡色譜柱。

B. 離子交換層析中，為什麼用氯離子洗脫陰離子

離子交換層析中，為什麼用氯離子洗脫陰離子
陰離子交換柱的填料是正電填專料,在低鹽條件下可以屬通過電荷相互作用吸附樣品中的陰離子和負電荷物質（如DNA）.這些帶負電的物質由於其帶電量不同,分子大小不同,因而與正電填料之間的結合力也就不同.用梯度的氯離子（一般用氯化鈉梯度,例如從100mM氯化鈉線性梯度升高到1M氯化鈉）洗脫掛柱樣品時,氯離子會和結合上的物質競爭結合正電填料,伴隨著氯離子濃度的不斷升高,氯離子的競爭作用越來越強,與填料結合的物質會按照親和力從弱到強依次洗脫下來,形成獨立的洗脫峰,從而將這些物質分開.
陽離子交換柱與之正好相反,柱子填料為負電荷,用鈉離子洗脫結合的正電物質.

C. 急！急！如何裝陰離子交換柱，使用時候出現氣泡怎麼除去謝謝

可以用適量的有機溶劑潤洗一下層析柱，柱子體積較小的話就用玻璃棒攪勻排除一下氣泡。

不管是干柱和濕柱，都要加層析液，不能要求一開始就沒有氣泡的。要用洗脫劑不停的洗脫，就是用配置好的試劑一邊一邊對柱子進行洗脫，這樣不但可以消除氣泡，還可以使硅膠充分沉降，讓層析效果更好。等柱子沒有氣泡後在上樣用洗脫液進行層析。

若柱中留有氣泡或各部分松緊不勻（更不能有斷層）時，會影響滲透速度和顯色的均勻。去除就是用玻璃棒攪拌，趕走氣泡。

(3)陰離子交換柱如何沖洗擴展閱讀：

水溶液中一些陽離子進入了反離子層，而原來的反離子層中的陽離子進入了水溶液。這種在正常濃度下，反離子層與水溶液之間的各向同性離子交換稱為離子交換作用。

離子交換主要發生在擴散層與正常水溶液之間。由於粘土顆粒表面通常帶有負電荷，離子交換主要是陽離子交換，所以又稱陽離子交換。離子交換嚴格遵循等價定律，即進入反離子層的陽離子等價於從反離子層排開的陽離子等價。

D. 為什麼陰陽離子交換樹脂混合後會結塊

陽、陰離子交換樹脂酸鹼再生混合後會結塊的現象叫做抱團現象，主要發生於混床設備中的陽陰樹脂之間。
由於靜電力的作用，新樹脂表面非常干凈，陽樹脂和陰樹脂間的靜電力非常強困含笑，使得樹脂抱團能力強，混床設備反洗難以自老者然分開，通過加入電解質（氯化鈉或氫氧化鈉）到樹脂層中，消除樹脂間的靜電力，這樣樹脂就不會再抱團，樹脂反洗才能分層明顯。
具體操作如下：
1. 將水液面放置樹脂層上約500mm處，從交換柱進鹼管，以3~4m/h的流速從上向下通入兩倍樹脂體積（陽陰樹脂總樹脂量）的約4%NaOH溶液，此時排出廢液pH大於14，然後用交換柱內的氫氧化鈉溶液浸泡4~8h。
2. 鹼浸泡時，每1小時用壓縮空氣攪拌10~20min，鹼液浸泡結束後，不經清洗，直接進行大反洗，反洗開始時，流速宜小，待樹脂松動後，逐漸加大反洗流速，使整個樹脂層的展開率在50~70%，維持10min左右，關閉反洗閥門，讓樹脂自由沉降，觀察樹脂分層情況。
3. 如樹脂分層還不明顯汪含，打開下排水閥門，將混床樹脂上部空間的鹼液排回到樹脂層中，使整個樹脂層處於鹼液中，再重新反洗分層。如此重復，直至樹脂分層明顯。
4.確認陽、陰樹脂良好分層後，自上向下正洗（正洗流速一般為20-40m/h）至出水PH8-9，最後進行正常再生處理即可。
如有疑問歡迎關注我頭像信息，繼續溝通交流學習。

E. 新離子交換樹脂如何進行預處理

（1）陽離子交換樹脂的預處理步驟
首先用清水對樹脂進行沖洗（最好為反洗）洗至內出水清澈無混濁、無雜質為止容。而後用4~5%的HCl和NaOH在交換柱中依次交替浸泡2~4小時，在酸鹼之間用大量清水淋洗（最好用混合床高純度去離子水進行淋洗）至出水接近中性，如此重復2~3次，每次酸鹼用量為樹脂體積的2倍。最後一次處理應用4~5%的HCl溶液進行，用量加倍效果更好。放盡酸液，用清水淋洗至中性即可待用。
（2）陰離子交換樹脂的預處理步驟
首先用清水對樹脂進行沖洗（最好為反洗），洗至出水清澈無混濁、無雜質為止。而後用4 ~5%的NaOH和HCl在交換柱中依次交替浸泡2 ~4小時，在鹼酸之間用大量清水淋洗（最好用混合床高純度去離子水進行淋洗）至出水接近中性，如此重復2~3次，每次酸鹼用量為樹脂體積的2倍。最後一次處理應用4~5%的NaOH溶液進行，用量加倍效果更好。放盡鹼液，用清水淋洗至中性即可待用。

F. 離子交換樹脂怎麼用

離子交換樹脂應該如何使用？

離子交換樹脂的使用方法，主要分為四個部分，分別是填裝、反洗、再生、清洗，下面為大家詳細的介紹離子交換樹脂的使用方法：

填裝：

1.先將干凈的水放入樹脂罐當中，高度在樹脂罐的三分之一左右，可以有效的防止樹脂與樹脂罐發生碰撞，造成樹脂的損壞。

2.將樹脂從樹脂罐頂部放入，然後對樹脂進行反洗，時間大概在30分鍾左右。

3.排水至液面高於樹脂層5cm，進氣混合樹脂15～20分鍾。

4.啟動設備，檢測正洗效果和出水電導率，如果數據正常，且產水能夠達標，即可正常使用。

反洗：

樹脂在工作一段時間之後，樹脂上會有很多雜質，為了樹脂的更好的使用，需要將這些雜質清除，一般的步驟是：從交換柱的底部進水，從頂部出水，對樹脂進行反洗，直至出水清澈為止。

再生：

使用一定濃度的食鹽水清洗樹脂，（實驗證明清洗的效果要比浸泡的效果更好）流速不能太快，一般再生的流速在10~15m/h左右，一般需要清洗半個小時左右，再生時需要根據實際的情況來決定清洗的時間。

清洗：

在食鹽水清洗之後，使用與食鹽水相同的流速進行沖洗，將樹脂中的鹽全部清洗干凈，這個過程也是樹脂再生的過程之一，所以很多人將這個過程叫做置換，時間大概一下30分鍾左右。

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G. 急求~離子交換柱清洗方法

離子交換層析
Tina 發表於 2006-2-21 12:21:00
材料與儀器

DEAE-32纖維素，pH8.0 0.01 mol/L Tris-HCl，工程菌破碎離心後的上清液；

層析柱

二、 方法與步驟

1） 裝柱：

用水清洗層析柱，柱內留存水距底部約1cm，加入18ml介質（凝膠溶液）。

2） 平衡：

加0.01M,PH8.0,tris-HCl緩沖液，直至流出液PH與緩沖液一致。

3） 上樣：

用量筒量出上清液體積，再加入等體積緩沖液混合，取EP管留1.5ml。待柱中水流出，至剛好覆蓋凝膠表面，靠璧緩慢加樣。

4) 用50ml緩沖液洗滌，用EP管隨機收集樣品穿出液和洗滌穿出液。

5) 洗脫：

將梯度洗滌儀和層析柱連接，洗脫瓶A（混合器）加200µl緩沖液，開口打開至兩瓶液面相平，相通管道出無氣泡，關閉連接，A中加入6gNaCl溶解，把裝置放在梯度混合儀上，開動攪拌器開關，打開A和B的連接通道，層析柱下端連收集器，收集洗脫流出液。

6） 控制流速，約4min/管，2-3ml/管。

分子篩的是凝膠層析
Sephadex G-100凝膠層析
Tina 發表於 2006-2-21 12:27:00
材料與儀器

Sephadex G-100，0.5 mol/L pH8.0 Tris-HCl，濃縮液

層析柱

二、 方法與步驟

1） Sephadex G-100 凝膠預處理

a) 100ml燒杯，稱取5克sephadex G-100,加入50ml去離子水，浸泡溶脹24小時。

b) 傾去sephadex G-100溶脹後凝膠上層的水，加入凝膠等體積的1.0 mol/L NaOH液處理，用攪棒輕輕攪動，並浸泡1小時處理後傾去。用去離子水洗滌。洗滌過程中，用傾去法除去細顆粒。其方法是用攪棒將凝膠攪勻（注意不要過分用力攪拌，以防止顆粒破碎），放置數分鍾，將未沉澱的細顆粒隨上層水倒掉。浮選3-5次，直至上層沒有細顆粒為止，再浸泡水洗至PH中性。

c) 將Sephadex G-100凝膠水溶液盛放於抽濾瓶中，用洗耳球塞住杯口，減壓抽氣30分鍾，除去凝膠溶液內的氣泡，將脫氣後的凝膠溶液輕輕倒入燒杯中，其中盛有1/2去離子水。

2) 裝柱

a) 層析柱(1.0Î50cm)用水清洗干凈，柱的上、下端聯接塑料管接上小乳膠管，裝上螺旋夾。將層析柱垂直裝好。校直過程用下端綁有鑰匙的繩子掛於鐵架的不同位置，從多角度校正使柱垂直。打開柱上埠，從柱底下出口管朝柱內注入水，使柱底全部充滿水而不留氣泡，關閉柱出口。最終柱內留存有2 cm的水。從出口處接上一根直徑2 mm細塑管，塑管另一端固定在柱的上端部位。

b) 攪動凝膠溶液（切勿攪動太快，以免空氣再逸入），使形成均一的薄膠漿，並立即沿玻棒倒入層析管內，讓加入的凝膠在柱內自然沉降，待柱底面上積起約1-2 cm的凝膠床後，打開柱出口水流。隨著柱內水的流出，上面不斷加入凝膠液，使形成的凝膠床面上有凝膠連續下降（如果凝膠床面上不再有凝膠顆粒下降，應該用攪棒均勻地將凝膠床攪起數厘米高，然後再加凝膠，不然就會形成界面，影響層析效果）。

c) 凝膠沉積到柱內凝膠是否均勻，有否「紋路」或氣泡。若層析柱不均一，必須重新裝柱。

3） 平衡

柱裝好後，使層析床穩定15-20分鍾，然後連接洗脫瓶出口和層析柱頂端，用3-5倍體積地緩沖液平衡層析柱。平衡過程中控制上柱緩沖液地進柱操作壓保持恆定。保持流速每滴/10秒。直至流出液的PH與上柱緩沖液完全相同。

4） 樣品洗脫

a) 上樣准備：

i) 上樣前打開層析柱上端，先檢查凝膠床界面是否平整，如果傾斜不平整，可用玻棒將凝膠床界面輕輕攪起後，再使凝膠自然沉降，形成平整狀態的凝膠床界面。用毛細吸管小心吸去大部分清液，然後讓液面自然下降，直至幾乎露出凝膠床界面。

ii) 樣品放入高速離心機，12000r/min、離心5 min。

iii) 上樣前吸取50µl樣品於EP管中，以備走電泳。

b) 樣品上樣：

i) 將樣品由玻棒引流沿管壁加入到凝膠床面上，注意不要將床面凝膠沖起。同時打開層析柱下面流出液開關（控制流速1滴/20秒），保持層析柱下面流出滴速與上樣的滴速一致，控制凝膠床界面不能脫水，並控制樣品區帶盡量狹窄。

ii) 當1.5ml樣品全部加入後，用 1-2 ml的0.5mol/L PH8.0 Tris-HCl洗脫液同上樣時一樣地保持層析柱下面流出滴速與上樣的滴速一致以控制凝膠床界面不能脫水，小心清洗凝膠床界面表面，使黏附著的樣品全部洗入凝膠床。

iii) 然後開始控制上樣的滴速大於層析柱下面流出滴速，使幾乎與凝膠床界面相平的洗脫液液面慢慢提高至凝膠床界面高出2cm左右，封閉層析柱上端。

iv) 保持層析柱上柱洗脫液入口處與層析柱下面流出處有一定勢壓。控制上柱緩沖液的進柱操作壓保持恆定。

c) 洗脫：

用0.1 mol/L PH8.0 Tris-HCl 緩沖液洗脫，用部分收集器收集，4分鍾/管（約2-3ml/管），收集約1-30管。

5） 酶活、酶濃度測定，參見2.6.2，2.6.3

6） 最高酶活收集管洗脫液留50µl，以備走電泳。

7） 將酶活較高的收集液10~14管合並，測定總體積為7.1 ml，精確測定酶活性。並用考馬思亮藍測定蛋白濃度。測酶活時體系稀釋了200倍，定蛋白時無稀釋。

H. 陰離子交換柱用什麼沖洗和保養方法

氫氧化鈉浸泡，水洗至微鹼性，鹽酸浸泡，水洗至中性，即可。