① 闃寸誨瓙浜ゆ崲鏌辨礂鑴變負鍟ュ炲姞鐩愮誨瓙
鏀瑰彉媧楄劚娑茬殑pH鍊箋傞槾紱誨瓙浜ゆ崲鍩鴻川緇撳悎甯︽湁璐熺數鑽風殑錏嬬櫧璐錛屽弽涔嬮槼紱誨瓙浜ゆ崲鍩鴻川緇撳悎甯︽湁姝g數鑽風殑錏嬬櫧璐錛岀粨鍚堢殑錏嬬櫧鍙浠ラ氳繃閫愭ュ炲姞媧楄劚娑蹭腑鐨勭洂嫻撳害鎴栨槸鎻愰珮媧楄劚娑茬殑pH鍊兼礂鑴變笅鏉ャ傛墍浠ヨ撮槾紱誨瓙浜ゆ崲鏌辨礂鑴卞炲姞鐩愮誨瓙鏄涓轟簡鏀瑰彉媧楄劚娑茬殑pH鍊箋俻H鍊煎為珮鏃訛紝鎶戝埗錏嬬櫧璐ㄩ槼紱誨瓙鍖栵紝闅忎箣瀵歸槼紱誨瓙浜ゆ崲鍓傜殑鍚擱檮鍔涘噺寮便
② 分離蛋白質實驗中的洗脫液是什麼溶液
如果你問的是離子交換層析的話洗脫液就是由不同離子強度(PH)的緩沖液構成.
由於不同生物大分子的電荷密度分布不同,電荷量不等,等電點的差異及分子大小的區別,因而與離子交換劑的結合強弱也不同,當它們被結合到固定相交換基團上以後,主要依靠增加緩沖溶液的離子強度或改變酸鹼度來進行洗脫.當緩沖液離子強度增加時,即增加了它與生物大分子對交換基團競爭吸附的能力,把生物大分子置換下來,改變酸鹼度,使緩沖溶液的pH接近生物大分子的等電點,其凈電荷為零,從而可被洗脫.
③ 離子交換後為什麼要用水洗滌樹脂流出液至中性
氫氧化鈉溶液浸泡2~4h(或以小流量清洗),將鹼液放盡之後,使用清水沖洗羅門哈斯離子交換樹脂至排出水接近中性為止,可以去除有機物以及硅等雜質。
當陰離子交換樹脂過濾完畢之後,通常用蒸餾水洗滌剩餘的液體,然後用合適的洗脫液洗脫陰離子交換樹脂。在洗脫過程中,首先洗脫上層中交換的離子,當它們穿過下層中未交換的樹脂時,它們會再次交換。因此,初始洗脫液中的交換離子濃度將為零。隨著洗脫的進行,洗脫液離子濃度逐漸增加,達到最大值,然後再逐漸降低。洗脫完成後,洗脫離子濃度將降低。它將再次等於零。對於陰離子交換樹脂,通常將NaCl或NaOH溶液用作洗脫液,然後將樹脂轉換為氯或氫氧化物類型。因此,洗脫的樹脂可以再生,用蒸餾水洗滌,然後再使用。
陰離子交換樹脂的洗脫:
陰離子交換樹脂在使用一段時間後,上層樹脂的與水中離子交換的能力已完全失效了,下層樹脂卻還能繼續使用。中間樹脂部分失效。這部分稱為「邊界層」。當邊界層達到一定水平時,水中的離子會某種程度地泄漏,並且一部分未交換的樹脂保留在樹脂層中,這時使用洗脫液洗脫樹脂,把未失效的陰離子交換樹脂洗脫出來,方便對已經失效的陰離子交換樹脂進行再生。
④ 大孔吸附樹脂和離子交換樹脂的洗脫劑的使用有何不同
1、從孔結構方面來看,大孔離子交換樹脂的比表面積要低,吸附樹脂的孔結構發達,比表面積高。
2、從應用原理角度來看,吸附樹脂主要是通過樹脂內部的孔道進行物理吸附,高的比表面積提供高吸附量。大孔離子交換樹脂主要是樹脂上的可交換離子與溶液中的離子發生交換反應,大孔僅僅是使溶液及溶質易於滲透進入樹脂(與凝膠樹脂相比)。但是按照這樣來講,大孔離子交換樹脂也有吸附有機物的功能,只是吸附量較低,沒有應用價值而已。
3、從骨架結構上看,大孔離子交換樹脂與吸附樹脂並無區別,只是吸附樹脂有的不帶功能基團,因此其合成方法相似。帶強極性官能團的吸附樹脂與大孔離子交換樹脂很難區分開。洗脫液的選擇,常用甲醇,乙醇,丙酮,乙酸乙酯。先用適量水洗下蛋白質、鞣質、低聚糖、多糖等極性物質。再用低到高濃度的醇依次洗脫,一般70%乙醇洗脫皂苷。3%~5%鹼液洗下黃酮、有機酸、酚類和氨基酸。10%酸洗下生物鹼、氨基酸。丙酮洗下中性親脂性成分。
⑤ 用強酸性陽離子交換樹脂分離氨基酸混合物時,為什麼要逐步提高洗脫液的pH和離子強度
用強酸性陽離子交換樹脂分離氨基酸混合物時,氨基酸都是以陽離子的形式版,被吸附到樹脂權的離子交換位上。
由於氨基酸是兩性化合物,既有酸性,也有鹼性,因此氨基酸都有等電點,pH低於等電點時,呈陽離子狀態,pH高於等電點時,呈陰離子狀態。氨基酸被強酸性離子交換樹脂吸附後,都是以陽離子形式存在的,轉變為陰離子就會被洗脫。通過逐漸提高洗脫液的pH,利用氨基酸不同的等電點,使不同的氨基酸逐漸從陽離子改變為陰離子,而被洗脫出來,從而達到分離效果。
⑥ 離子交換分離操作中,以高濃度鹽溶液進行洗脫的原理是
用離子交換樹脂進行分離的操作程序包括三個步驟,具體操作過程如下文中所述.
(1)交換柱的制備首先選擇合適的離子交換樹脂類型,用相應的溶液進行處理,如強酸性陽離子交換樹脂需要在稀鹽酸中浸泡,以除去雜質並使之溶脹和完全轉變成H式.然後用蒸餾水洗至中性,裝入充滿蒸餾水的交換柱中.注意防止氣泡進入樹脂層.
(2)交換使待處理水樣以合適的流速通過交換柱進行離子交換.交換完畢後用蒸餾水洗去殘留的溶液及交換過程中形成的酸、鹼或鹽類等.
(3)洗脫洗脫是將已交換到樹脂上的離子分離出來的過程.選擇合適的洗脫液,使之以適宜速度通過交換柱進行洗脫.(更多質量檢測、分析測試、化學計量、標准物質相關技術資料請參考中檢所對照品查詢 www.rmhot.com)
陽離子交換樹脂常用鹽酸溶液作為洗脫液;陰離子交換樹脂常用鹽酸溶液、氯化鈉或氫氧化鈉溶液作洗脫液.對於分配系數相近的離子,可用含有機絡合劑或有機溶劑的洗脫液,以提高洗脫過程的選擇性.
離子交換技術在富集和分離微量或痕量元素方面應用很廣.例如分離水中的鋰離子、錳離子、銅離子、鐵離子、鋅離子等多種金屬離子,首先加入鹽酸使一部分離子轉變為絡合陰離子,然後將水樣通過強鹼性陰離子交換樹脂,各種離子均被交換在樹脂上,最後用不同濃度的鹽酸溶液進行洗脫分離.鋰離子不生成絡合陰離子,不發生交換,可用12mol/L HCl溶液最先洗脫出來
⑦ 離子分離為什麼用不同濃度的洗脫液洗脫
陰離復子交換柱的填料是正電制填料,在低鹽條件下可以通過電荷相互作用吸附樣品中的陰離子和負電荷物質(如DNA).這些帶負電的物質由於其帶電量不同,分子大小不同,因而與正電填料之間的結合力也就不同.用梯度的氯離子(一般用氯化鈉梯度,例如從100mM氯化鈉線性梯度升高到1M氯化鈉)洗脫掛柱樣品時,氯離子會和結合上的物質競爭結合正電填料,伴隨著氯離子濃度的不斷升高,氯離子的競爭作用越來越強,與填料結合的物質會按照親和力從弱到強依次洗脫下來,形成獨立的洗脫峰,從而將這些物質分開.
陽離子交換柱與之正好相反,柱子填料為負電荷,用鈉離子洗脫結合的正電物質.
⑧ 鍏ㄦ槸騫茶揣涓ㄧ誨瓙浜ゆ崲鑹茶氨錛圛EC錛夊師鐞嗐佹搷浣滆佺偣鍙婂簲鐢
紱誨瓙浜ゆ崲鑹茶氨錛圛EC錛夛紝榪欎釜寮哄ぇ鐨勫垎紱繪妧鏈錛屼互鍏剁嫭鐗圭殑鍘熺悊鍜屽箍娉涘簲鐢ㄥ惛寮曠潃縐戝﹀朵滑鐨勭洰鍏夈傚叾鏍稿績鍦ㄤ簬鍒╃敤紱誨瓙浜ゆ崲鍓傜殑紱誨瓙浜ゆ崲鐗規э紝閫氳繃紱誨瓙闂寸殑鐢佃嵎浣滅敤鍔涘樊寮傝繘琛岄珮鏁堝垎紱匯傜誨瓙浜ゆ崲鍓傜敱鍩鴻川銆佺數鑽峰熀鍥㈠拰鍙嶇誨瓙鏋勬垚錛屽垎涓洪槼紱誨瓙鍜岄槾紱誨瓙涓ょ嶇被鍨嬶紝姣忎釜縐嶇被鐨勯夋嫨鎬ч兘鐢卞鉤琛″父鏁癒鍜屼翰鍜屽姏鍙傛暟濡傜誨瓙鐢佃嵎銆佺數浠峰拰鍘熷瓙搴忔暟鍐沖畾銆
紱誨瓙浜ゆ崲榪囩▼鏄涓涓鍙閫嗙殑鍔ㄦ佽繃紼嬶紝鍏剁粨鍚堝姏鍙楀埌pK鍊煎拰絳夌數鐐圭殑褰卞搷銆傚湪錏嬬櫧璐ㄥ垎紱諱腑錛岀瓑鐢電偣鍘熺悊涓庣洂姊搴︽垨pH姊搴︾粨鍚堬紝浣垮緱媧楄劚鎴愪負鍏抽敭姝ラゃ傜誨瓙浜ゆ崲鏍戣剛鐨勫瓟鐘剁粨鏋勶紝鏃犺烘槸鐤忔按鎬ф爲鑴傦紙濡傚己閰-寮遍吀-寮辯⒈鏍戣剛錛夎繕鏄浜叉按鎬ф爲鑴傦紙濡傜氦緇寸礌鍜屼氦鑱旇憽鑱氱硸錛夛紝閮戒負紱誨瓙榪佺Щ鎻愪緵浜嗘湁鍒╂潯浠訛紝浣嗛夋嫨鏃墮渶閽堝規牱鍝佺壒鎬ф潵鍐沖畾銆
鍦ㄥ疄闄呮搷浣滀腑錛岀誨瓙浜ゆ崲鍓傜殑閫夋嫨鑷沖叧閲嶈侊紝濡傞槼紱誨瓙浜ゆ崲鍓傞拡瀵規g數鑽風墿璐錛岄槾紱誨瓙浜ゆ崲鍓傞拡瀵硅礋鐢佃嵎錛屾垨鑰呴拡瀵逛袱鎬х誨瓙鐨勭壒瀹歱H鑼冨洿銆傚己鍨嬩氦鎹㈠墏閫傜敤浜庡箍娉涚殑pH鑼冨洿錛岃屽急鍨嬪垯鍦ㄤ腑鎬pH鏉′歡涓嬩繚鎸侀珮浜ゆ崲瀹歸噺銆傚己閰告爲鑴傚逛簬紕辨ц泲鐧借川灝ゅ叾鏈夋晥錛屽弽紱誨瓙鐨勯夋嫨鍒欏彇鍐充簬緇撳悎鍔涳紝寮洪吀鍨嬮夋嫨H鍨嬶紝寮遍吀鍨嬮夋嫨Na鍨嬨
棰勫勭悊鍜屽啀鐢熻漿鍨嬫槸緇存寔鏍戣剛鎬ц兘鐨勫叧閿鐜鑺傦紝鍙鑳藉寘鎷鏍戣剛嫻告場銆侀櫎鏉傝川錛堥吀紕卞勭悊錛変互鍙婂啀鐢熸ラゃ備翰姘存ф爲鑴傚彲鑳介渶瑕佷嬌鐢∟aOH/NaCl鎴朒Cl澶勭悊錛岃岀惣鑴傜硸鍒欏彲閫氳繃閰哥⒈嫻告場澶勭悊銆傝呮熅鏃訛紝鏌遍珮涓庣洿寰勭殑姣斾緥銆佺誨瓙寮哄害閮戒細褰卞搷鍒嗙繪晥鏋滐紝瑁呮熅闇鍧囧寑鍒嗗竷錛岄伩鍏嶆皵娉′駭鐢熴傛牱鍝佷笂鏌辨椂錛屽鉤琛$紦鍐叉恫鏄鍩虹錛岄殢鍚庡潎鍖鍔犲叆錛屾礂鑴卞垯闇瑕佺簿緇嗚捐★紝閫氳繃鍒嗘點佹搴︽垨澶嶅悎鏂規硶鎻愰珮鍒嗚鯨鐜囥
璐ㄥ勭悊鏃訛紝浜叉按鎬ф爲鑴傞噰鐢ㄤ箼閱囨垨涓欓叜錛岄吀紕卞勭悊鐢ㄤ簬鐞艱剛緋栥傛敹闆嗘礂鑴辨恫鏃訛紝搴旀帶鍒舵祦閫燂紝鍒嗘ユ敹闆嗕互紜淇濆崟涓鐗╄川鐨勭函搴︺傜『瀹氭礂鑴辨恫嫻侀熸椂錛岄氬父鍦5~8cm³/(cm²-h)鑼冨洿鍐呭疄楠岋紝鏀墮泦1%~2%鏌變綋縐鐨勬礂鑴辨恫錛岄氳繃鐩戞祴鍚稿厜搴︾粯鍒舵礂鑴辨洸綰褲傜誨瓙浜ゆ崲鑹茶氨鍦ㄨ泲鐧借川綰鍖栵紙濡傜豢璞嗗嚑涓佽川閰訛級鍜岀瓑鐢電偣嫻嬪畾錛堝傞キ璞囪眴鍑濋泦緔狅級絳夐嗗煙琛ㄧ幇鍑鴻壊錛屽嚟鍊熷叾楂樼伒鏁忓害鍜岄噸澶嶆э紝鎴愪負縐戝﹀朵滑鐨勫緱鍔涘伐鍏楓
鎬葷殑鏉ヨ達紝紱誨瓙浜ゆ崲鑹茶氨閫氳繃綺懼瘑鐨勬搷鎺у拰絳栫暐鎬у簲鐢錛屼負縐戝﹀朵滑鎻愪緵浜嗕竴縐嶅己澶х殑宸ュ叿錛岀敤浜庣簿緇嗗垎紱誨拰鍒嗘瀽澶嶆潅鐨勭敓鐗╁垎瀛愶紝鏄鐜頒唬鐢熺墿鍖栧﹀拰鍒嗗瓙鐢熺墿瀛﹀疄楠屽や腑鐨勫繀澶囨妧鏈銆