q離子交換填料

1. 某蛋白質等電點為8.14,如採用離子交換色譜法來純化,如何選擇填料和緩沖體系

我的話，第一步會選擇pH7.0-7.4左右過陰離子交換，讓大多數雜蛋白（大多數雜蛋白pI在6左右）、核酸、色素等雜質結合，收集流穿液，此時蛋白溶液的純度和澄清度會大大提高，再校pH7.0或更低pH過陽離子交換進行純化。講究一點的話，在緩沖選擇上可以區分一下陰陽離子緩沖，多數情況影響不大，不必糾結。

2. 有關固相萃取填料的離子交換容量

名稱： Macro-Prep50系列離子交換填料
詳細信息
貨號 名稱 包裝 功能基團 載量mg/ml pH范圍 高溫消毒 最高流速cm/h
158-0040 Macro-Prep High Q 25ml ―N+（CH3）3 40（BSA） 1～14 可以 3000
156-0040 100 ml ―N+（CH3）3 40（BSA） 1～14 可以 3000
156-0041 500 ml ―N+（CH3）3 40（BSA） 1～14 可以 3000
156-0042 5L ―N+（CH3）3 40（BSA） 1～14 可以 3000
156-0043 10L ―N+（CH3）3 40（BSA） 1～14 可以 3000
158-0020 Macro-Prep DEAE 25 ml ―N+（C2H5）2 35 （BSA） 1～14 可以 3000
156-0020 100 ml ―N+（C2H5）2 35（BSA） 1～14 可以 3000
156-0021 500 ml ―N+（C2H5）2 35（BSA） 1～14 可以 3000
156-0022 5L ―N+（C2H5）2 35（BSA） 1～14 可以 3000
156-0023 10L ―N+（C2H5）2 35（BSA） 1～14 可以 3000
158-0030 Macro-Prep High S 25 ml ―SO3- 70（lgG） 1～14 可以 3000
156-0030 100 ml ―SO3- 70（lgG） 1～14 可以 3000
156-0031 500 ml ―SO3- 70（lgG） 1～14 可以 3000
156-0032 5L ―SO3- 70（lgG） 1～14 可以 3000
156-0033 10L ―SO3- 70（lgG） 1～14 可以 3000
158-0070 Macro-Prep CM 25 ml
―COO- 35 1～14 可以 3000
156-0070 100 ml ―COO- 35
1～14 可以 3000
156-0071 500 ml ―COO- 35
1～14 可以 3000
156-0072 5L ―COO- 35 1～14 可以 3000
156-0073 10L ―COO- 35 1～14 可以 3000

Macro-Prep 50系列：
在低壓和中壓下操作良好，在不同pH和離子強度時仍具有最小的體積變化。
l.對生物分子具有較高載量
2.對復雜生物混合物具有高解析度
3.堅硬的多聚物基質，為中壓介質中最耐壓者，從而流速最高
4.親水基質減少了非特異結合
5.大孔徑增強了離子進入位點
6.化學、機械和熱穩定性優異
7.孔徑均為50μm

3. 我要分離純化一種未知酶，一切未知，想用凝膠層析和離子交換層析分離，不知選用什麼填料合適有好的建議

建議用離子交換層析。凝膠過濾層析流速慢，上樣量低，而且分離效果一般，凝膠回過濾答一般用於層析的後期包括除鹽，去除降解片段之類的。
離子交換一般就用到DEAE，因為大部分蛋白都偏酸。要是你的酶是鹼性蛋白，那就更好辦，上個CM柱，其他雜蛋白就留不下多少了。
所以先拿DEAE試試吧。

4. 如何選擇合適的填料進行離子交換層析

具體看你的溶液情況，可以分步處理，最終達到滿意。一般填料前段都回是要砂碳濾、精濾答，目的是為了保護離子交換樹脂，讓其發揮最大的效果。至於到底選用什麼樹脂，看溶液的出水要求，都可以得到一個針對性的處理，操作起來也很簡單

5. 離子交換樹脂作為葯物載體應具備哪些優點

1、高效離子交換色譜 應用離子交換的原理，採用低交換容量的離子交換樹脂來分離離子，這在離子色譜中應用最廣泛，其主要填料類型為有機離子交換樹脂，以苯乙烯二乙烯苯共聚體為骨架，在苯環上引入磺酸基，形成強酸型陽離子交換樹脂，引入叔胺基而成季胺型強鹼性陰離子交換樹脂，此交換樹脂具有大孔或薄殼型或多孔表面層型的物理結構，以便於快速達到交換平衡，離子交換樹脂耐酸鹼可在任何pH范圍內使用，易再生處理、使用壽命長，缺點是機械強度差、易溶脹易、受有機物污染。 硅質鍵合離子交換劑以硅膠為載體，將有離子交換基的有機硅烷與基表面的硅醇基反應，形成化學鍵合型離子交換劑，其特點是柱效高、交換平衡快、機械強度高，缺點是不耐酸鹼、只宜在pH28范圍內使用。離子交換色譜是最常用的離子色譜。 2、離子排斥色譜 它主要根據Donnon膜排斥效應，電離組分受排斥不被保留，而弱酸則有一定保留的原理，製成離子排斥色譜主要用於分離有機酸以及無機含氧酸根，如硼酸根碳酸根和硫酸根有機酸等。它主要採用高交換容量的磺化H型陽離子交換樹脂為填料以稀鹽酸為淋洗液。3、離子對色譜 離子對色譜的固定相為疏水型的中性填料，可用苯乙烯二乙烯苯樹脂或十八烷基硅膠(ODS)，也有用C8硅膠或CN，固定相流動相由含有所謂對離子試劑和含適量有機溶劑的水溶液組成，對離子是指其電荷與待測離子相反，並能與之生成疏水性離子，對化合物的表面活性劑離子，用於陰離子分離的對離子是烷基胺類如氫氧化四丁基銨氫氧化十六烷基三甲烷等，用於陽離子分離的對離子是烷基磺酸類，如己烷磺酸鈉，庚烷磺酸鈉等對離子的非極性端親脂極性端親水，其CH2鍵越長則離子對化合物在固定相的保留越強，在極性流動相中，往往加入一些有機溶劑，以加快淋洗速度，此法主要用於疏水性陰離子以及金屬絡合物的分離，至於其分離機理則有3種不同的假說，反相離子對分配離子交換以及離子相互作用。 二、離子色譜系統IC系統的構成與HPLC相同，儀器由流動相傳送部分、分離柱、檢測器和數據處理4個部分組成，在需要抑制背景電導的情況下通常還配有MSM或類似抑制器。其主要不同之處是IC的流動相要求耐酸鹼腐蝕以及在可與水互溶的有機溶劑（如乙腈、甲醇和丙酮等）中不溶脹的系統。因此，凡是流動相通過的管道、閥門、泵、柱子及接頭等均不宜用不銹鋼材料，而是用耐酸鹼腐蝕的PEEK材料的全塑IC系統。離子色譜的最重要的部件是分離柱。柱管材料應是惰性的，一般均在室溫下使用。高效柱和特殊性能分離柱的研製成功，是離子色譜迅速發展的關鍵。

6. 離子交換色譜法的原理，裝置及應用

原理：
離子交換色譜（ion exchange chromatography，IEC）以離子交換樹脂作為固定相，樹脂上具有固定離子基團及可交換的離子基團。當流動相帶著組分電離生成的離子通過固定相時，組分離子與樹脂上可交換的離子基團進行可逆變換。根據組分離子對樹脂親合力不同而得到分離。

裝置：
（1）分離柱 裝有離子交換樹脂，如陽離子交換樹脂、陰離子交換樹脂或螯合離子交換樹脂。為了減小擴散阻力，提高色譜分離效率，要使用均勻粒度的小球形樹脂。最常用的陽離子交換樹脂是在有機聚合物分子（如苯乙烯－二乙烯基苯共聚物）上連接磺酸基官能團（─SO3─）。最常用的陰離子交換劑是在有機聚合物分子上連接季銨官能團(─NH4)。這些都是常規高交換容量的離子交換樹脂，由於它們的傳質速度低，使柱效和分離速度都低。C.霍瓦特描述了一種薄膜陰離子交換樹脂，它是在苯乙烯－二乙烯基苯共聚物核心上沉澱一薄層陰離子交換樹脂，就象雞蛋有一薄層外皮那樣，離子交換反應只在外皮上進行,因此縮短了擴散的路徑,所以離子交換速度高，傳質快，提高了柱效。同樣，在小顆粒多孔硅膠上塗一薄層離子交換材料也可得到相同類型的樹脂。螯合離子交換樹脂具有絡合某些金屬離子而同時排斥另一些金屬離子的能力，因此這種樹脂具有很高的選擇性。除了離子交換柱外，其他高效液相色譜柱也可用於分離離子。
（2）抑制柱和柱後衍生作用 常用的檢測器不僅能檢測樣品離子，而且也對移動相中的離子有響應，所以必須消除移動相離子的干擾。在離子色譜中，消除(抑制)移動相離子干擾的常用方法有兩種。
①抑制反應，用抑制反應來改變移動相，使移動相離子不被檢測器測出。離子色譜通常使用電導檢測器。在抑制反應中??綞匝衾胱佣?裕?把高電導率移動相的氫氧化物轉變成水,而樣品離子則轉變成它們相應的酸：
NaOH+H+─→Na++H2O
NaX+H+─→HX+Na+
在裝有強酸性陽離子交換樹脂的柱中進行抑制反應，使用一段時間後，這種樹脂就需要再生，很不方便。改用連接有磺酸基(─SO3H)的離子交換膜(陽離子交換膜)或用連接有銨基(─NH4)的離子交換膜(陰離子交換膜)，就可以連續進行抑制反應。例如，陽離子交換膜可使陽離子通過它擴散過去，而陰離子則不能擴散過去。
1981年，T.S.史蒂文斯和斯莫爾等報道了中空纖維抑製法。這種纖維是由陽離子交換膜材料拉制而成。用這種方法不僅不需要再生抑制柱而且減小了峰的加寬，提高了柱效。一種比較新的膜技術是加一電場以加速離子的傳遞，該法與中空纖維法比較，其優點是反應時間短、交換能力高，並且可以用於陽離子和陰離子兩者。
②柱後衍生作用，將從柱子流出的洗出液與對被測物有特效作用的試劑相混合，在一反應器中生成帶色的絡合物（見配位化合物）。對衍生試劑最重要的要求是它們與被測物能生成絡合物，但不與移動相生成絡合物。柱後衍生法能用於測定重金屬離子，所用的衍生試劑有茜素紅S等。
（3）檢測器 分為通用型和專用型。通用型檢測器對存在於檢測池中的所有離子都有響應。離子色譜中最常用的電導檢測器就是通用型的一種。紫外－可見分光光度計是專用型的檢測器，對離子具有選擇性響應。可變波長紫外檢測器與電導檢測器聯用,能幫助鑒定未知峰,分辨重疊峰和提供電導檢測器不能測定的陰離子，如硫化物及亞砷酸中的陰離子的檢測。
在離子色譜中，電導檢測法總是和抑制反應配合使用。這種檢測器對分子不響應，如水、乙醇或者不離解的弱酸分子等。對於電導檢測器，一個重要的條件是溫度要穩定，所以檢測池要放在恆溫箱中，1982年H.薩托設計一種雙示差電導檢測器，消除了溫度變化對檢測的影響，可測定10-9摩爾的陰離子。

應用：
離子色譜主要用於測定各種離子的含量，特別適於測定水溶液中低濃度的陰離子，例如飲用水水質分析，高純水的離子分析，礦泉水、雨水、各種廢水和電廠水的分析，紙漿和漂白液的分析，食品分析，生物體液(尿和血等)中的離子測定，以及鋼鐵工業、環境保護等方面的應用。離子色譜能測定下列類型的離子：有機陰離子、鹼金屬、鹼土金屬、重金屬、稀土離子和有機酸,以及胺和銨鹽等。

7. 採用離子交換和反滲透工藝制備去離子水，一次填料多少大約多長時間更換一次填料

單位時間內的制水量和原水水質指標不知道，無法計算出填料的內數量。
需要清楚以下內容：容
1、原水水質指標；
2、處理工藝（反滲透還是陽床+陰床），填料是指陽樹脂、陰樹脂還是反滲透膜元件呢？
3、設備每天運行幾個小時？比如說設備每天運行4小時，3年更換一次陽樹脂，那麼設備每天運行8小時，則壽命就會遠遠小於3年。