㈠ 包涵體蛋白不變性復性能做WB嗎
可以啊,包涵體蛋白只是二硫鍵折疊不正確,並不會影響到他們與抗體結合,而且你做western的時候蛋白都是變性的啊(SDS-PAGE階段)。需要做包涵體復性的是需要有活性的蛋白時才用(比如重組蛋白酶活性分析)。
㈡ 包涵體復性過程中,用鹽酸胍和尿素哪個好,有什麼區別
包涵體復性過程中,用鹽酸胍和尿素哪個好,有什麼區別
① 包涵體就是蛋白的變性聚集後的產物,6M鹽酸胍及8M尿素是作為溶解包涵體的溶劑.
② 復性的過程是逐步去除鹽酸胍或者尿素,從而使得蛋白天然構象逐步形成.
所以一般如果起始使用的是6M鹽酸胍進行包涵體溶解,這個過程中逐步降低的是鹽酸胍的濃度.