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如何過濾無菌

發布時間:2023-11-18 20:59:41

A. 求解過濾滅菌全過程,過程中都要用到什麼部件具體操作步驟是怎樣的問題有點兒繁瑣,求耐心詳解...

過濾滅菌主要需襲要四個東西:
1. 高壓滅過菌的無菌容器,用來盛放無菌溶液
2. 除菌濾膜,一般用0.22 um的濾膜或者濾器即可
3. 無菌的操作空間, 比如超凈工作台
4. 注射器(無需針頭)

首先把盛放無菌溶液的容器高壓滅菌,備用,
然後在超凈工作台里,將濾器拆封,套在容器口上, 用注射器吸取未除菌的溶液, 然後插在濾器上,將溶液擠過濾器, 濾器下面流出來的溶液即所需的無菌溶液.

如果要過濾大體積(2-10升)的溶液, 使用真空泵+濾器+濾膜會更加省力

B. 關於實驗室抽慮除菌的操作

問:最近要做一些培養基,有一些糖類需要過濾除菌,但不知道怎麼操作,還需要什麼輔助設備?
答:你只要有濾膜和配套的過濾器就可以了,一般在超凈工作台上進行。濾膜用0.22微米或0.45微米兩種規格,指的是濾膜的孔徑大小吧。一般0.22就夠了!
答:如果溶液的量比較大,超過500ml,可以採用已滅菌的抽濾瓶,預先墊好0.22um 的濾膜。抽濾瓶滅菌前要檢查封口用紗布或棉花堵牢,使用時,不用在無菌室中進行,只要保證收集瓶無菌狀態就可以。抽濾後,過濾好的溶液在無菌條件下倒進已滅菌的空試劑瓶中。
如果用小量的溶液過濾,無菌室內用一次性注射器和一次性0.22um濾膜(millipore或pall都有賣)就可以。
答:看過濾的量,如果量小,用注射器加濾器、0.22微米濾膜過濾,濾器加上濾膜後蓋緊,稍旋松,飯盒密封100度蒸餾水煮沸30分鍾滅菌,用來承接無菌糖水的瓶需高壓。用時在無菌操作台上操作,並先旋緊濾器,注意濾器外流下去的哪怕一滴也會造成染菌;過濾應該是費力的,如果感覺很輕松,則濾膜已破。0.45微米的濾膜一般用於兩次過濾的第一次,以防止0.22堵塞。注射器,若能高壓更好些。
如果量大,正壓可用蠕動泵接皮管接不銹鋼濾器大張濾膜,這些都是要高壓的。負壓可用抽濾。

C. 什麼叫過濾除菌它的基本原理是什麼

過濾除菌法(filtration)
是用物理阻留的方法將液體或空氣的細菌除去,以達到無菌目的。專所用的器具是含有微小孔徑的屬濾菌器(filter)。主要用於血清、毒素、抗生素等不耐熱生物製品及空氣的除菌。常用的濾菌器有薄膜濾菌器(0.45μm和0.22μm孔徑)、陶瓷濾菌器、石棉濾菌器(即Seitz濾菌器)、燒結玻璃濾菌器等。

D. 請問制備培養基時如何過濾除菌

1、滅菌方法
培養基的滅菌方法主要有兩種,高壓除菌及.22um微孔濾膜過濾除菌。與過濾相比,高壓滅菌的工作強度小,成本較低,但易造成營養成分的流失,而且在多次加樣(無菌谷氨醯胺溶液,無菌碳酸氫鈉溶液等)過程中容易造成二次污染。大多數培養基採用0.1~0.2μm孔徑的微孔濾膜進行過濾滅菌,並且已成為培養基除菌的發展方向,它可低限度地減少培養基的營養損失。
1.1 高壓滅菌

某些培養基(如MEM)可進行高壓滅菌,例如清大天一的MEM培養基中的MD605、MD609等。這類培養基一般不含有L-谷氨醯胺和碳酸氫鈉,一般是在培養基高壓滅菌後加入L-谷氨醯胺和碳酸氫鈉的無菌的液體。另外可高壓的谷氨酸鹽(如L-丙氨醯-L-谷氨醯胺)可代替L-谷氨醯胺。
可高壓滅菌的培養基在121℃、15psi,15分鍾的條件下完全可達到滅菌效果及營養成分的最小損失,不需將滅菌時間延長。為保證高壓滅菌的效果,滅菌設備的驗證很關鍵。
1.2 過濾滅菌
可供過濾滅菌使用的濾膜很多,其材料多為polyethersulphone(PES)、尼龍、多聚碳酸鹽、醋酸纖維素、硝酸纖維素、PTFE、陶瓷等。一般情況下採取正壓過濾,正壓過濾較之負壓過濾具有流速高、過濾快、不易污染,可避免蛋白質產生大量氣泡等優點。一般使用過濾器可參照各供應商的產品說明書。
目前大多數實驗室和制葯企業採用微孔濾膜濾器(如Zeiss濾器)或立式微孔濾器(Millipore、Pall)除菌。微孔濾膜濾器為不銹鋼,中間可夾放0.22um濾膜。使用這種濾器最重要步驟是安裝濾膜及無菌過濾過程。如在使用Zeiss濾器時,先要用培養用水將濾膜充分潤濕,在安裝濾膜時可在其上放置一層定性濾紙再固定。消毒時旋鈕不要扭太緊,凡與空氣接觸部位都要包好(可用牛皮紙、紗布、無紡布等);高壓滅菌後,在無菌環境中立即將旋鈕扭緊。過濾除菌結束後,要打開濾器,檢查濾膜是否完整,如果濾膜破裂,需重新進行過濾除菌過程。立式微孔濾器可以選用不同的微孔濾柱體積,因為濾膜的折疊,膜面積顯著增大,液體處理量大,而且不容易發生堵塞現象。

E. 如何給乙醇做無菌過濾(微生物培養基用)

一般不需要除菌的,無水乙醇本來就不能長菌,如果一定要做過濾的操作的內話,可以選用容0.33μm的過濾器,用注射器裝乙醇,然後通過過濾器過濾到已滅菌的容器里,當然,要在超凈台里操作。這樣就沒問題了,一般抗生素,溶菌酶什麼的都是這么過濾的。

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