超濾管擺放水平

A. 如何用蛋白濃縮管

選擇合適的超濾管，主要考慮MWCO和濃縮體積，最常見的是Ultra-15（10kD）。

通常應截留分子量不應大於目的蛋白分子量的1/3，比如目的蛋白分子量為35kDa，就可以選擇10kDa截留分子量的超濾管。若目的蛋白分子量為10kD左右，則可以用截留分子量3kD的超濾管。認真閱讀使用說明書，注意超濾膜對各種化學物質的耐受程度有所不同。

新買來的超濾是乾燥的，使用前加入MilliQ水，水量完全過膜，冰浴或冰箱里預冷幾分鍾。然後將水倒出，即可加入蛋白液，加入的多少，以不超過管頂的白線為准。操作要輕，加入蛋白液前，超濾管需要插在冰上預冷。

(1)超濾管擺放水平擴展閱讀：

超濾濃縮離心管，最新推出專利產品Hydrosart膜2K型，具有極低的蛋白吸附特性，高流速、高通量，是免疫球蛋白濃縮和脫鹽的理想用膜。

備有四種材質的超濾膜：聚醚碸、三醋酸纖維素、再生纖維素和Hydrosart，可根據不同要求靈活選用；兩種回收濃縮液的方法：既可用吸管直接吸取並回收，又可將離心管放入離心機反甩，將濃縮液甩入回收帽中，加蓋保存。這兩種方法都可使濃縮液達到近乎完全回收；

B. 超濾離心管怎麼使用

蛋白濃縮和換Buffer通常使用的超濾管，常用Millipore的Amicon-Ultra-15超濾管（MWCO10kD）。也有其它型號的、不同體積大小和MWCO超濾管可選，視目的蛋白的分子量與濃縮前體積、濃縮目標體積而定。可重復使用。
1、選擇合適的超濾管，主要考慮MWCO和濃縮體積，通常應截留分子量不應大於目的蛋白分子量的1/3，比如目的蛋白分子量為35kDa，就可以選擇10kDa截留分子量的超濾管。若目的蛋白分子量為10kD左右，則可以用截留分子量3kD的超濾管。
2、新買來的超濾是乾燥的，使用前加入MilliQ水，水量完全過膜，冰浴或冰箱里預冷幾分鍾。然後將水倒出，即可加入蛋白液，加入的多少，以不超過管頂的白線為准。操作要輕，加入蛋白液前，超濾管需要插在冰上預冷。
3、平衡。質量和重心二者都要達到平衡。注意轉速和加速度不可太快，否則直接損壞超濾膜。開始離心超濾（離心機預冷至4度）。膜與轉軸的方向根據說明書調整（角轉離心機的情況是膜與軸垂直）。在實際使用中，一般轉速開的比說明書里的要低，這樣可以延長離心管的使用壽命。
4、當濃縮到剩下1ml時，【取50ul國產Bradford溶液，加入10ul流穿，看有沒變藍色，以此判斷超濾管是否漏掉蛋白。如果管漏了，將上層和流穿重新倒入新管中開始超濾。要精確判斷是否漏管，用5mg/ml的BSA離心10min，再取流穿，跑蛋白膠或Bradford粗測】，繼續加入剩下的蛋白液濃縮（在冰上操作，防止蛋白受熱），直到所有濃縮液都加完為止。離心過程中注意是否發生蛋白沉澱，導致堵管。若發生沉澱，要確定沉澱的具體原因，是蛋白濃度過高還是Buffer不合適；前者可用多根超濾管同時超濾，降低濃度的辦法解決，後者的方法是換不同的Buffer，直到蛋白不發生沉澱為止。
5、前面幾步用以濃縮蛋白，如果要換Buffer，在總蛋白液濃縮至1ml左右的時候，輕輕加入新的Buffer（經0.22um超濾膜超濾），再濃縮至1ml左右，連續三次，最後一次的濃縮終體積根據需要的蛋白濃度而定，一般不多於500ul，也有濃縮至200ul以內的情況。按照每次至少10倍左右的體積濃縮算，三次達到1000倍以上，基本上可以達到換buffer的目的。
6、取出最終蛋白濃縮液的操作在冰上操作，用黃槍頭（200ul）取，輕輕順著邊緣插入槍頭，輕輕吹打、混勻蛋白液，注意不要碰到超濾膜，然後吸取濃縮液，每次吸接近200ul，直到吸完。管底剩下的最後一點濃縮液不必吸取，否則難度太大，有可能損壞超濾膜。最後加入MilliQ水到超濾管中，沒過超濾膜，防止膜失水變干。
7、以下是處理超濾管，重復利用超濾管的步驟。
8、倒出超濾管里的水，用milliQ水輕輕潤洗幾次，【若管底有可見的蛋白沉澱，可以先加入水，然後用槍頭吹打，注意不要碰到膜，吹打至沉澱懸起，然後倒掉，不可用自來水猛沖】然後加入0.2M的NaOH溶液，室溫放置20min，期間平衡超濾管。再離心10min。倒出殘留的NaOH溶液，將管芯浸入MilliQ水的燒杯(1或2L)中,放置幾個小時,再換新的水,放置幾個小時，不斷稀釋NaOH濃度。50ml管和蓋子用自來水洗，內壁再用MilliQ水洗干凈。
9、取出浸沒的管芯，加至接近滿的MilliQ水，50ml管也加滿MilliQ水，將管芯慢慢放入50ml
離心管，排出部分水，然後蓋上蓋子，放4度保存，直到下次使用。一般來說，按照上述步驟和注意事項，每根管用三四年不會壞。

C. 凈水器的優缺點是什麼

凈水器也叫凈水機、水過濾器，是按對水的使用要求對水質進行深度過濾、凈化處理的水處理設備。平時所說的凈水器，一般是指用作家庭使用的小型過濾器，技術核心為濾芯裝置中的過濾膜，目前主要技術來源於超濾膜和RO反滲透膜兩種，諾百納凈水器以這兩種來分析看。

一、優點不同

1、反滲透凈水機：集微濾、吸附、超濾、反滲透、紫外殺菌、超純化等技術於一體，更新鮮、更衛生、更安全。

2、超濾凈水機：產水可直接飲用；最新一代濾芯，過濾精度高、使用壽命長，其水錘、耐壓等測試均通過 NSF 測試標准。

二、缺點不同

1、反滲透凈水機：出水為可以直接飲用的純凈水，出水量較小，比例大概為4比1，排出的廢水是不能飲用的

2、超濾凈水機：超濾凈水器的出水比為2比1，過濾後的水可以直接喝下，但是前提是要正常的自來水，畢竟超濾膜只是一種物理過濾，對化學物質是無法過濾的，所以對一般的自來水過濾沒有問題。但是超濾膜過濾後的水口感並沒有反滲透膜好。

三、原理不同

1、反滲透凈水機：反滲透膜是通過透過性膜將溶解在水中對人體有害的重金屬離子去除掉，也可以過濾掉其他不利於身體健康的離子，並且很有效的溶解和去除水中的三氯甲烷、四氯化碳等有機物，將水中對人體有利的水分子留下，而其他雜質如細菌、污染物、病毒、水垢等，都會化成濃縮水被排除。

RO反滲透凈水器內部有一層RO膜，這種膜的孔徑微小至納米級別，而細小如病毒、細菌，其體積也是RO膜孔徑的的千倍。經過RO膜的基本上僅有水分，不含有其他元素，過濾出的水可以生飲也可以燒開。

2、超濾凈水機：超濾膜凈化技術是純物理的過濾，其依靠超濾膜表面密布的微孔進行篩分，過濾精度取決於超濾膜孔徑大小和孔徑均勻度，水中的懸浮物、微粒、細菌、膠體和病毒等大分子物質可被截留住。超濾凈水器內部有一層超濾膜，這層過濾膜的孔徑精度范圍為0.01~0.001μm，相比RO反滲透凈水器要大一個數量級。同時，超濾膜不僅可讓水分經過，同時也會讓一些體積較小的小分子物質經過。

D. 上清液用30kd超濾管超濾出現絮狀物是怎麼回事

以下是一些原因：
1、超濾管的選擇不當：經常使用的30KD超濾管過濾效果較好，如果採用了新的或不同品牌的超濾管，則可能會使得過濾效果受到影響，從而在上清液中出現絮狀物。
2、超濾管損壞或不適當的使用:如果超濾管已經損壞或瞎州塌沒有正確地安裝在設備中，就有可能產生細小的顆粒或細絲等雜質物，進而形成絮狀物。
3、上清液樣品本身存在問題:如果上跡衫清液中存在高濃度的蛋白質、沉澱或其他大分子物質，這些物質磨圓即使通過超濾管過濾，也很難被完全去除，從而導致上清液出現絮狀物。
4、超濾條件不合適:超濾過程中溫度、pH值、離子強度等條件不符合要求，也可能會導致上清液中出現絮狀物。

E. 如何選擇超濾管

你看你要截留那部分物質，就選擇比最小分子量小的，如果你要截留26KD的，你要的超濾管內就要比26小。但兩者也要有一定容的差距，比如，選擇20-25KD之間的就不合適，因為26的也可能會出去（這是由製造工藝決定的）。所以選擇20KD以下的超濾管比較合適。

F. 貝朗crrt機超濾過多怎麼處理

僅供參考，詳細步驟請參考說明書

貝朗
CRRT CVVH
簡易操作步驟

1
．

打開機器在
Diapact

CRRT
機器的背後有電源控制開關
ON/OFF
2
．

打開電源開關後，
必須確定兩個控制系統檢測一致，
用戶必須比較屏幕上顯示的特徵線，
並按
EQ
鍵確定。

3
．

用
和
鍵來選擇
連續性透析治療
，並用
鍵確定，再選擇
CVVH
並用
鍵確
定。

4
．

選擇好治療方式後，
機器開始硬體自檢測試，
A
繼電器自檢，
B
安全空氣檢測硬體檢測，
C
安全空氣檢測定標，
D
紅色（血液）檢測器自檢，
E
漏血監測器測試，
F
零壓力自檢

5
．

硬體測試通過後進行管路安裝及治療參數設臵。

管路安裝步驟：
A
掛鹽水袋和臵換液袋到秤上。

B
放濾器到濾器夾子里，靜脈（藍）端朝上。

C
安裝和連接臵換液管（綠），夾住不用的接頭。

D
掛超濾收集袋到秤上，夾住出口。

E
穿過漏血，安裝超濾管（黃），夾住不用的側管。

F
掛靜脈收集袋到輸液桿。

G
安裝和連接靜脈管（藍）和動脈管（紅）。

6
．

確認必要的夾子是打開的，然後啟動「預沖」血泵自動運轉。

7
．

在准備階段結束後，
系統會出現聲音信號並且顯示
治療選擇
的功能，
按顯示的指導操作。

（如果需要，可以繼續按
沖洗
鍵進行沖洗）

8
．

通過「進入治療」鍵可以自動進行用戶參數設臵。

9
．

設臵好參數通過「進入治療」進入治療狀態。

10
．處於治療狀態。用
EQ
鍵確認漏血校正，血泵開始轉動進行血循環。

11
．停血泵連接病人，並調節血泵轉速，檢查動靜脈壓力是否正常。

12
．當血泵運行
2-3
分鍾後沒有報警就可以開始治療了，按治療

鍵來激活進入治療。

注意
:
治療過程中動脈壺面應為
50%
壺高，靜脈壺面應為
80%
壺高。

13
．在菜單選擇中可以選擇結束治療。當結束治療階段被激活後，
雖然補液泵停止，但血泵
仍然轉動，轉速降低
(50ml/min)
14.
用戶將動脈管路從病人身上取下，連接到鹽水袋上。連接至血液管路（前
/
後稀釋）的
臵換液必須停止。當體外血液迴流回人體時，血泵停止，將靜脈管路從病人身上取下。

注意
：需要換袋時，激活換袋功能。補液泵停止，換袋將不會引起報警。結束換袋後，
必須解除換袋功能。
然後治療過程會自動繼續。
結束換袋後，
必須檢查靜脈壺液面。

常用快捷鍵：
V+BE+ BP+/BP-
調節背景亮度
V+BE+
/

調節對比度

V+BE+ SN
調節語言
V+BE+
（壺液面下降）維修屏幕

V+BE+
▲按四秒

跳過自

G. 超濾離心管可以滅菌嗎

1、可以用70%的酒精消毒
2、如果是高溫高壓滅菌,要注意滅完菌後,管裡面的超濾膜是處於濕潤的狀態,所以需要立即使用,因為膜濕潤後就不能幹

H. 超濾管規格太小怎麼放進離心機

1、首先將超濾內管插入所提供的一個微量離心管中。
2、其次向超濾管內管中加入不超過500微升的樣本，並蓋上蓋子。
3、最後讓蓋子的連接帶朝著轉子的中央，用一個超濾管平衡即可。