Ⅰ 大豆異黃酮的工藝路線
為了使ISO與其它非異黃酮成分分開，以期得到高純度的ISO和ISO中的相關單體化
合物，有必要對ISO的粗提物進一步分離純化。目前ISO的純化方法主要有傳統柱色
譜法、大孔吸附樹脂法、高速逆流色譜法、固相萃取、膜分離技術等。 2.1 傳統柱色譜法
硅膠柱、聚酞胺柱及葡聚糖凝膠柱色譜在分離純化中葯有效成分中廣泛應用，它
們同樣也可用於大豆異黃酮的分離純化。姚開等比較了這三種不同柱層析法對ISO
主要單體的分離效果，採用300～400目硅膠，用氯仿和甲醇以5:1的混合溶液洗脫
可使染料木苷、大豆苷、染料木素和大豆素4種單體組分分離；採用聚醯胺柱層析
時，用不同濃度的甲醇洗脫，可得到極性較大的結合型ISO，含量分別為85．3%的
大豆苷和87.0%的染料木苷；採用LH-20葡聚糖凝膠柱，用90%甲醇作洗脫劑，可得
到含量高達95%以上的大豆苷和染料木苷。徐德平等分別對ISO進行乙酸乙酯和正丁
醇萃取後，將乙酸乙酯部分進行硅膠柱層析，用氯仿、乙醇梯度洗脫，可得到大豆
素和染料木素；將正丁醇部分進行Sephadex LH-20柱層析，用甲醇、水洗脫，可得
到大豆苷和染料木苷。但實驗中都需要反復上柱，操作較為煩瑣。在ISO的體內代
謝研究中，也可應用傳統柱色譜法富集後檢測，Satu-Maarit等應用Sephadex LH-
20對ISO的體內代謝產物進行純化，檢測到原形大豆異黃酮和其新的代謝產物。
2.2 大孔吸附樹脂法
由於採用硅膠柱層析和葡聚糖凝膠柱層析時，多使用有毒性的有機溶劑且操作過程
較為復雜，因此目前大多選擇大孔吸附樹脂柱層析來分離純化ISO，它具有選擇性
好、解吸容易、無毒、無污染等優點。潘廖明等比較了9種不同型號的弱極性大孔
吸附樹脂對ISO的吸附性能。研究表明LSA-8型樹脂對ISO具有較好的選擇性和解吸
能力，該樹脂在35℃時，對ISO有較好的吸附效果，其動態最大吸附量為204.6 mg
/g干樹脂，採用70%乙醇溶液解吸5 h，ISO的含量達到57.0%，比原來提高了4.8倍
。郭文勇等研究了採用大孔吸附樹脂分離、純化淡豆豉中ISO的工藝，比較了7種大
孔樹脂對大豆素的吸附性能，結果表明，905型大孔吸附樹脂對大豆素的吸附性能
優於其它，在pH＝5.0，溫度為室溫時，大豆素得率大於
8％。
2.3高速逆流色譜法
高速逆流色譜法(HSCCC)是一種不需固態載體的液液分配色譜技術，該技術與傳
統方法比較具有分離效率高、操作簡便、可避免因不可逆吸附而引起的樣品損失等
無可比擬的優
點，因此已被廣泛應用於天然產物有效成分的分離制備當中。目前在HSCCC中用來
對ISO中各成分進行分離的溶劑體系有氯仿-甲醇-水（4:3:2，v/v），主要用於分
離制備極性較小的異黃酮，如glycitein、daidzein、acetylgenistin、acetylda
idzin;氯仿-甲醇-正丁醇-水（4:3:0.5:2, v/v）主要用於分離制備極性稍大的異
黃酮，如genistin、glycitin、daidzin;而genistin和glycitin,則可使用甲基叔
丁基醚-四氫呋喃-0.5%三氯醋酸-水（2:2:0.15:4，v/v）的溶劑體系分離得到。也
有報道，使用正己烷-乙酸乙酯-正丁醇-甲醇-醋酸-水（12:1:1:5:1，v/v）的溶劑
體系，可從3 g ISO粗提物中一次分離得到203 mg daidzin, 241 mg genis-tin，
158mg 6"-0-malonyldaidzin，135mg 6"-0-malonyl-genistin，純度均在90%以上
，以上表明HSCCC
適合於ISO中各單體成分大規模的生產制備。
2.4 固相萃取
固相萃取（SPE）技術是由液固萃取和柱液相色譜技術相結合發展而來的預處
理技術，用SPE可以有效地將分析物與干擾組分分離，Mauricio等對大豆樣品進行
了固相萃取，並將樣品在8種不同SPE填料中進行了回收率比較，結果顯示，使用S
trata X填料，ISO中各成分回收率最高，平均回收率為99.37%，並且具有污染小、
可處理小
體積試樣等優點，可用於大豆產品中異黃酮的分離純化。但SPE具有多步操作、樣
品前處理時間較長等缺點。固相微萃取（SPME）是集采樣、萃取和富集於一體的新
的樣品前處理方法，該方法樣品用量少，靈敏度高。Mary等採用固相微萃取與高效
液相色譜聯用技術對生物樣品中的大豆素和染料木素進行了檢測，並討論了測定模
式、萃取頭、萃取時間、解吸時間等對萃取效率的影響。結果發現:使用CW-TPR的
效果最好，萃取5 min、解吸6 min時
即達到檢測要求，大豆素和染料木素的最低檢測限分別為25.4 pg/mL和2.70 pg/m
L,均低於使用其它方法測得的檢測限濃度。可見，SPME可用於生物樣品中微量ISO
成分的分離純化。
2.5 膜分離技術
膜分離技術(MS)是近年來迅速崛起的一項新技術，它作為一種新的分離純化和濃縮
方法，具有耗能低、分離效率高、無二次污染、工藝簡單等優點。Lei等採用超濾
和滲濾相結合的方法從豆製品加工廢液中回收ISO，超濾技術將蛋白質等大分子物
質截留，使ISO等低分子物質和鹽類隨水分子一起透過膜孔，結合滲濾技術後，使
ISO的純度和收率提高，再通過反滲透技術將ISO濃縮，最終ISO的回收率可以達到
50%以上。本方法也可以用於從脫脂大豆產品中回收ISO。
3 結語
天然產物的提取方法正向著操作簡便、高效率、無污染的方向發展。ME、SE、SFE
、HSCCC、MS、SPE等技術為ISO的提取、分離及純化提供了有力的手段。隨著現代
新型技術的涌現，天然產物中的ISO成分將更進一步的被人們所認知並加以開發利
用。
技術的確是花樣繁多，但是目前的國內生產水平來看，大多數生產者都會選擇成本
較低的技術，一些成本較高的技術設備的添置尚需實力和金錢說話。
Ⅱ 膜分離技術可以完成糖類物質分離嗎
到現在為止膜分離技術暫時不可以完成糖類物質分離。
可以完成糖類物質分離的方法： 分步沉澱法、柱層析法、陰離子交換法、凝膠色譜法、大孔樹脂柱色譜、超濾法
先將糖類物質提取出來
分步沉澱法
多糖的結構和分子量不同，其極性大小不同，在有機溶劑（如醇或酮）中的溶解度不同，根據這一原理，可以依次增加醇濃度，從而將多糖按分子量從大到小的沉澱出來。仍需要藉助柱層析法等進一步純化，方可得到均一性的多糖。
柱層析法
要獲得均一性的多糖，一般是先經過陰離子交換柱進行粗步純化，然後再用凝膠柱進一步純化。有些多糖也採用大孔樹脂柱進行純化。下面對這三種柱層析法進行詳細介紹。
陰離子交換法
一般使用陰離子交換柱對真菌、藻類和高等植物的多糖進行初步分離。陰離子交換色譜常用的介質有DEAE-纖維素、DEAE-瓊脂糖凝膠、DEAE-葡萄糖凝膠。
凝膠色譜法
凝膠色譜法根據被分離組分尺寸大小與凝膠的孔徑關系實現分離，類似於分子篩的作用。常用的凝膠有葡聚糖凝膠（SephadexG）、Sephadex LH-20、聚丙烯酸凝膠Toyopearl HW等。多糖的進一步分離往往會選擇用各種凝膠進行分離純化。
大孔樹脂柱色譜
大孔樹脂柱色譜是利用大孔樹脂的選擇性吸附作用和分子篩作用分離純化多糖。比如用AB-8大孔樹脂從青錢柳葉中分離純化出均一性多糖。
超濾法
超濾是以壓力為推動力的膜分離技術，應用膜分離原理將小分子溶質和溶劑除去而留下大分子溶質，從而使大分子物質得到純化。
Ⅲ 怎樣提取那麼小的病毒
提取小病毒的方法可以用超濾法：
1、超濾法的關鍵是超濾膜，可以簡單理解為孔徑極小的篩子。
2、當含有病毒的溶液通過超濾膜時，病毒就被留在了篩子上，而溶質和小分子物質如各種無機鹽等就被濾過了，之後再拿一定體積的液體把病毒從篩子上溶解下來，就實現了濃縮。
要求獲取的濃縮病毒大分子雜質含量很低時，就可以選擇超離法超速離心了：
超速離心簡單說，就是利用變態的重力把含病毒溶液里的病毒甩下來。
在病毒純化時,常用的方法是密度梯度離心法：
1、首先，在離心管中按濃度低至高配置離心介質
2、然後放到變態離心機里高速甩倆小時候，要分離的樣品里的物質就按密度排列在離心管里了。這時再按密度取出需要的條帶並重新溶解就好了。
Ⅳ 求黃芩提取物的具體提取方法，水提還是醇提，說具體點，可以加分哦
黃芩提取方法有水提取酸沉澱法、超聲法、超濾法、醇提取酸沉澱法、微波提取法等，而常用的為水提取酸沉澱法，但水提取存在黃芩有效成分提取不完全、提取出的雜質較多等缺點。採用液-液雙向萃取法提取黃芩有效成分[3]，並與常用的水提法進行比較|：
提取方法
1、液-液雙向萃取 精密稱取黃芩葯材粉末約5g，以煮沸的pH=2的磷酸緩沖液30mL燙過，冷卻至38℃左右接入液-液雙向萃取儀中。從迴流管上端以漏斗加入乙酸乙酯至b瓶的1/3處，a瓶浸入38℃左右的油浴中，b瓶進行加熱攪拌，使乙酸乙酯形成迴流。迴流提取四小時後收集乙酸乙酯液，於旋轉蒸發儀上回收乙酸乙酯，得葯材提取物備用。
2、普通方法提取 精密稱取黃芩葯材粉末約5g，提取三次，第一次以10倍量沸水燙過煎煮2小時，第二、三次分別加8倍量水進行煎煮、每次1小時，合並煎液，濾過，濾液加2mol/L鹽酸（80℃）調節pH值至2保溫1小時，靜置24小時，濾取沉澱，用水洗至pH5.0，繼用70%乙醇洗滌至pH7.0，低溫乾燥，即得。
3.樣品測定 樣品提取物中加入少量70%乙醇微熱使溶解，轉入100 mL容量瓶中，超聲溶解30min，以70%乙醇定容，濾過，棄去初濾液，精密吸取5.0mL續濾液以70%乙醇定容於50 mL量瓶中,精密吸取1.0 mL置於25mL容量瓶中，加入20mL0.2mol/L鹽酸，再加70%乙醇至刻度，搖勻。於276nm波長處測定吸光度。
Ⅳ 蛋白質的分離方法有哪些它們各依據蛋白質的什麼性質或特點
（一）水溶液提取法
稀鹽和緩沖系統的水溶液對蛋白質穩定性好、溶解度大、是提取蛋白質最常用的溶劑,通常用量是原材料體積的1-5倍,提取時需要均勻的攪拌,以利於蛋白質的溶解.提取的溫度要視有效成份性質而定.一方面,多數蛋白質的溶解度隨著溫度的升高而增大,因此,溫度高利於溶解,縮短提取時間.但另一方面,溫度升高會使蛋白質變性失活,因此,基於這一點考慮提取蛋白質和酶時一般採用低溫（5度以下）操作.為了避免蛋白質提以過程中的降解,可加入蛋白水解酶抑制劑（如二異丙基氟磷酸,碘乙酸等）.
下面著重討論提取液的pH值和鹽濃度的選擇.
1、pH值
蛋白質,酶是具有等電點的兩性電解質,提取液的pH值應選擇在偏離等電點兩側的pH
范圍內.用稀酸或稀鹼提取時,應防止過酸或過鹼而引起蛋白質可解離基團發生變化,從而導致蛋白質構象的不可逆變化,一般來說,鹼性蛋白質用偏酸性的提取液提取,而酸性蛋白質用偏鹼性的提取液.
2、鹽濃度
稀濃度可促進蛋白質的溶,稱為鹽溶作用.同時稀鹽溶液因鹽離子與蛋白質部分結合,具有保護蛋白質不易變性的優點,因此在提取液中加入少量NaCl等中性鹽,一般以0.15摩爾.升濃度為宜.緩沖液常採用0.02-0.05M磷酸鹽和碳酸鹽等滲鹽溶液.
（二）有機溶劑提取法
一些和脂質結合比較牢固或分子中非極性側鏈較多的蛋白質和酶,不溶於水、稀鹽溶液、稀酸或稀鹼中,可用乙醇、丙酮和丁醇等有機溶劑,它們具的一定的親水性,還有較強的親脂性、是理想的提脂蛋白的提取液.但必須在低溫下操作.丁醇提取法對提取一些與脂質結合緊密的蛋白質和酶特別優越,一是因為丁醇親脂性強,特別是溶解磷脂的能力強；二是丁醇兼具親水性,在溶解度范圍內（度為10%,40度為6.6%）不會引起酶的變性失活.另外,丁醇提取法的pH及溫度選擇范圍較廣,也適用於動植物及微生物材料.
二、蛋白質的分離純化
蛋白質的分離純化方法很多,主要有：
（一）根據蛋白質溶解度不同的分離方法
1、蛋白質的鹽析
中性鹽對蛋白質的溶解度有顯著影響,一般在低鹽濃度下隨著鹽濃度升高,蛋白質的溶解度增加,此稱鹽溶；當鹽濃度繼續升高時,蛋白質的溶解度不同程度下降並先後析出,這種現象稱鹽析,將大量鹽加到蛋白質溶液中,高濃度的鹽離子（如硫酸銨的SO4和NH4)有很強的水化力,可奪取蛋白質分子的水化層,使之「失水」,於是蛋白質膠粒凝結並沉澱析出.鹽析時若溶液pH在蛋白質等電點則效果更好.由於各種蛋白質分子顆粒大小、親水程度不同,故鹽析所需的鹽濃度也不一樣,因此調節混合蛋白質溶液中的中性鹽濃度可使各種蛋白質分段沉澱.
影響鹽析的因素有：（1）溫度：除對溫度敏感的蛋白質在低溫（4度）操作外,一般可在室溫中進行.一般溫度低蛋白質溶介度降低.但有的蛋白質（如血紅蛋白、肌紅蛋白、清蛋白）在較高的溫度（25度）比0度時溶解度低,更容易鹽析.（2）pH值：大多數蛋白質在等電點時在濃鹽溶液中的溶介度最低.（3）蛋白質濃度：蛋白質濃度高時,欲分離的蛋白質常常夾雜著其他蛋白質地一起沉澱出來（共沉現象）.因此在鹽析前血清要加等量生理鹽水稀釋,使蛋白質含量在2.5-3.0%.
蛋白質鹽析常用的中性鹽,主要有硫酸銨、硫酸鎂、硫酸鈉、氯化鈉、磷酸鈉等.
其中應用最多的硫酸銨,它的優點是溫度系數小而溶解度大（25度時飽和溶液為4.1M,即767克/升；0度時飽和溶解度為3.9M,即676克/升）,在這一溶解度范圍內,許多蛋白質和酶都可以鹽析出來；另外硫酸銨分段鹽析效果也比其他鹽好,不易引起蛋白質變性.硫酸銨溶液的pH常在4.5-5.5之間,當用其他pH值進行鹽析時,需用硫酸或氨水調節.
蛋白質在用鹽析沉澱分離後,需要將蛋白質中的鹽除去,常用的辦法是透析,即把蛋白質溶液裝入秀析袋內（常用的是玻璃紙）,用緩沖液進行透析,並不斷的更換緩沖液,因透析所需時間較長,所以最好在低溫中進行.此外也可用葡萄糖凝膠G-25或G-50過柱的辦法除鹽,所用的時間就比較短.
2、等電點沉澱法
蛋白質在靜電狀態時顆粒之間的靜電斥力最小,因而溶解度也最小,各種蛋白質的等電點有差別,可利用調節溶液的pH達到某一蛋白質的等電點使之沉澱,但此法很少單獨使用,可與鹽析法結合用.
3、低溫有機溶劑沉澱法
用與水可混溶的有機溶劑,甲醇,乙醇或丙酮,可使多數蛋白質溶解度降低並析出,此法分辨力比鹽析高,但蛋白質較易變性,應在低溫下進行.
（二）根據蛋白質分子大小的差別的分離方法
1、透析與超濾
透析法是利用半透膜將分子大小不同的蛋白質分開.
超濾法是利用高壓力或離心力,強使水和其他小的溶質分子通過半透膜,而蛋白質留在膜上,可選擇不同孔徑的瀘膜截留不同分子量的蛋白質.
2、凝膠過濾法
也稱分子排阻層析或分子篩層析,這是根據分子大小分離蛋白質混合物最有效的方法之一.柱中最常用的填充材料是葡萄糖凝膠（Sephadex
ged）和瓊脂糖凝膠（agarose gel）.
（三）根據蛋白質帶電性質進行分離
蛋白質在不同pH環境中帶電性質和電荷數量不同,可將其分開.
1、電泳法
各種蛋白質在同一pH條件下,因分子量和電荷數量不同而在電場中的遷移率不同而得以分開.值得重視的是等電聚焦電泳,這是利用一種兩性電解質作為載體,電泳時兩性電解質形成一個由正極到負極逐漸增加的pH梯度,當帶一定電荷的蛋白質在其中泳動時,到達各自等電點的pH位置就停止,此法可用於分析和制備各種蛋白質.
2、離子交換層析法
離子交換劑有陽離子交換劑（如：羧甲基纖維素；CM-纖維素）和陰離子交換劑（二乙氨基乙基纖維素；DEAE?FONT
FACE="宋體"
LANG="ZH-CN">纖維素）,當被分離的蛋白質溶液流經離子交換層析柱時,帶有與離子交換劑相反電荷的蛋白質被吸附在離子交換劑上,隨後用改變pH或離子強度辦法將吸附的蛋白質洗脫下來.（詳見層析技術章）
（四）根據配體特異性的分離方法－親和色譜法
親和層析法（aflinity
chromatography）是分離蛋白質的一種極為有效的方法,它經常只需經過一步處理即可使某種待提純的蛋白質從很復雜的蛋白質混合物中分離出來,而且純度很高.這種方法是根據某些蛋白質與另一種稱為配體(Ligand）的分子能特異而非共價地結合.其基本原理：蛋白質在組織或細胞中是以復雜的混合物形式存在,每種類型的細胞都含有上千種不同的蛋白質,因此蛋白質的分離（Separation）,提純（Purification）
和鑒定（Characterization）是生物化學中的重要的一部分,至今還沒的單獨或一套現成的方法能移把任何一種蛋白質從復雜的混合蛋白質中提取出來,因此往往採取幾種方法聯合使用.
細胞的破碎
1、高速組織搗碎：將材料配成稀糊狀液,放置於筒內約1/3體積,蓋緊筒蓋,將調速器先撥至最慢處,開動開關後,逐步加速至所需速度.此法適用於動物內臟組織、植物肉質種子等.
2、玻璃勻漿器勻漿：先將剪碎的組織置於管中,再套入研桿來回研磨,上下移動,即可將細胞研碎,此法細胞破碎程度比高速組織搗碎機為高,適用於量少和動物臟器組織.
3、超聲波處理法：用一定功率的超聲波處理細胞懸液,使細胞急劇震盪破裂,此法多適用於微生物材料,用大腸桿菌制備各種酶,常選用50-100毫克菌體/毫升濃度,在1KG至10KG頻率下處理10-15分鍾,此法的缺點是在處理過程會產生大量的熱,應採取相應降溫措施.對超聲波敏感和核酸應慎用.
4、反復凍融法：將細胞在-20度以下冰凍,室溫融解,反復幾次,由於細胞內冰粒形成和剩餘細胞液的鹽濃度增高引起溶脹,使細胞結構破碎.
5、化學處理法：有些動物細胞,例如腫瘤細胞可採用十二烷基磺酸鈉（SDS）、去氧膽酸鈉等細胞膜破壞,細菌細胞壁較厚,可採用溶菌酶處理效果更好.
無論用哪一種方法破碎組織細胞,都會使細胞內蛋白質或核酸水解酶釋放到溶液中,使大分子生物降解,導致天然物質量的減少,加入二異丙基氟磷酸（DFP）可以抑制或減慢自溶作用；加入碘乙酸可以抑制那些活性中心需要有疏基的蛋白水解酶的活性,加入苯甲磺醯氟化物（PMSF）也能清除蛋白水解酥活力,但不是全部,還可通過選擇pH、溫度或離子強度等,使這些條件都要適合於目的物質的提取.
濃縮、乾燥及保存
一、樣品的濃縮
生物大分子在制備過程中由於過柱純化而樣品變得很稀,為了保存和鑒定的目的,往往需要進行濃縮.常用的濃縮方法的：
1、減壓加溫蒸發濃縮
通過降低液面壓力使液體沸點降低,減壓的真空度愈高,液體沸點降得愈低,蒸發愈快,此法適用於一些不耐熱的生物大分子的濃縮.
2、空氣流動蒸發濃縮
空氣的流動可使液體加速蒸發,鋪成薄層的溶液,表面不斷通過空氣流；或將生物大分子溶液裝入透析袋內置於冷室,用電扇對准吹風,使透過膜外的溶劑不沁蒸發,而達到濃縮目的,此法濃縮速度慢,不適於大量溶液的濃縮.
3、冰凍法
生物大分子在低溫結成冰,鹽類及生物大分子不進入冰內而留在液相中,操作時先將待濃縮的溶液冷卻使之變成固體,然後緩慢地融解,利用溶劑與溶質融點介點的差別而達到除去大部分溶劑的目的.如蛋白質和酶的鹽溶液用此法濃縮時,不含蛋白質和酶的純冰結晶浮於液面,蛋白質和酶則集中於下層溶液中,移去上層冰塊,可得蛋白質和酶的濃縮液.
4、吸收法
通過吸收劑直接收除去溶液中溶液分子使之濃縮.所用的吸收劑必需與溶液不起化學反應,對生物大分子不吸附,易與溶液分開.常用的吸收劑有聚乙二醇,聚乙稀吡咯酮、蔗糖和凝膠等,使用聚乙二醇吸收劑時,先將生物大分子溶液裝入半透膜的袋裡,外加聚乙二醇復蓋置於4度下,袋內溶劑滲出即被聚乙二醇迅速吸去,聚乙二醇被水飽和後要更換新的直至達到所需要的體積.
5、超濾法
超濾法是使用一種特別的薄膜對溶液中各種溶質分子進行選擇性過濾的方法,不液體在一定壓力下（氮氣壓或真空泵壓）通過膜時,溶劑和小分子透過,大分子受阻保留,這是近年來發展起來的新方法,最適於生物大分子尤其是蛋白質和酶的濃縮或脫鹽,並具有成本低,操作方便,條件溫和,能較好地保持生物大分子的活性,回收率高等優點.應用超濾法關鍵在於膜的選擇,不同類型和規格的膜,水的流速,分子量截止值（即大體上能被膜保留分子最小分子量值）等參數均不同,必須根據工作需要來選用.另外,超濾裝置形式,溶質成份及性質、溶液濃度等都對超濾效果的一定影響.Diaflo
超濾膜的分子量截留值：
膜名稱分子量截留值孔的大的平均直徑
XM－300300,000140
XM－200100,00055
XM－5050,00030
PM－30 30,00022
UM－2020,00018
PM－1010,00015
UM－21,00012
UM05500 10
用上面的超濾膜製成空心的纖維管,將很多根這樣的管攏成一束,管的兩端與低離子強度的緩沖液相連,使緩沖液不斷地在管中流動.然後將纖維管浸入待透析的蛋白質溶液中.當緩沖液流過纖維管時,則小分子很易透過膜而擴散,大分子則不能.這就是纖維過濾秀析法,由於透析面積增大,因而使透析時間縮短10倍.
二、乾燥
生物大分子制備得到產品,為防止變質,易於保存,常需要乾燥處理,最常用的方法是冷凍乾燥和真空乾燥.真空乾燥適用於不耐高溫,易於氧化物質的乾燥和保存,整個裝置包括乾燥器、冷凝器及真空乾燥原理外,同時增加了溫度因素.在相同壓力下,水蒸汽壓隨溫度下降而下降,故在低溫低壓下,冰很易升華為氣體.操作時一般先將待乾燥的液體冷凍到冰點以下使之變成固體,然後在低溫低壓下將溶劑變成氣體而除去.此法干後的產品具有疏鬆、溶解度好、保持天然結構等優點,適用於各類生物大分子的乾燥保存.
三、貯存
生物大分子的穩定性與保存方法的很大關系.乾燥的製品一般比較穩定,在低溫情況下其活性可在數日甚至數年無明顯變化,貯藏要求簡單,只要將乾燥的樣品置於乾燥器內（內裝有乾燥劑）密封,保持0－4度冰箱即可,液態貯藏時應注意以下幾點.
1、樣品不能太稀,必須濃縮到一定濃度才能封裝貯藏,樣品太稀易使生物大分子變性.
2、一般需加入防腐劑和穩定劑,常用的防腐劑有甲苯、苯甲酸、氯仿、百里酚等.蛋白質和酶常用的穩定劑有硫酸銨糊、蔗糖、甘油等,如酶也可加入底物和輔酶以提高其穩定性.此外,鈣、鋅、硼酸等溶液對某些酶也有一定保護作用.核酸大分子一般保存在氯化鈉或檸檬酸鈉的標准緩沖液中.
3、貯藏溫度要求低,大多數在0度左右冰箱保存,有的則要求更低,應視不同物質而定.