流動相為什麼需要過濾和超聲波脫氣

⑴ 液相色譜儀的流動相為什麼要脫氣常用的脫氣方法有哪幾種

氣泡會影響柱的分離效果，影響檢測器的靈敏度、基線的穩定，甚至無法工作

1.如果不排氣，容易在系統內逸出氣泡，影響泵的工作

2.溶解氣體會引起溶劑pH的變化，給分析或分離帶來誤差

3.溶解在流動相的氧還可能與樣品、流動相甚至固定相（如烷基胺）反應。

4.溶解氧能與某些溶劑（如甲醇、四氫呋喃）形成有紫外吸收的配合物，會提高背景吸收，並導致檢測靈敏度的輕微降低。

5.在梯度洗脫時會造成基線漂移或形成鬼峰（假峰）

6.在熒光檢測中，溶解氧在一定條件下還會引起猝滅現象，特別是對芳香烴、脂肪醛、酮等

常用的脫氣方法有超聲波震動脫氣、抽真空脫氣、加熱迴流脫氣、吹氦氣脫氣以及在線真空脫氣。

最簡單的脫氣方法是超聲震動脫氣，脫氣效果最佳的是在線真空脫氣。

⑵ 為什麼高效液相色譜儀的流動相在使用前必須過濾，脫氣

用於高效液相色譜的流動相必須事先除氣，否則容易在系統中逸出氣泡，影響泵的工作。氣泡還會影響色譜柱的分離效率、檢測器的靈敏度、基線的穩定性，甚至使其無法檢測。

噪音增加，基線不穩定，突然跳躍。此外，溶解在流動相中的氧可以與樣品、流動相甚至固定相（如烷基胺）發生反應。溶解氣體也會引起溶劑ph值的變化，從而導致分離或分析結果的誤差。

常用的除氣方法有加熱沸騰、抽真空、超聲波、吹氦等。

高效液相色譜（hplc）是色譜的一個重要分支。以液體為流動相，高壓輸液系統，將不同極性的單溶劑或不同比例的混合溶劑、緩沖液等流動相泵入固定相色譜柱。分離柱中的組分後，用檢測器檢測。實現了樣品的分析。

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液相色譜-質譜聯用（LC-MS）可增加額外的分析能力，准確識別和量化細胞和組織裂解物、血液、血漿、尿液和口服液等復雜樣品基質中的微量化合物。

流動相和固定相都是液體。流動相與固定相應不相容（極性不同，避免固定液流失），界面清晰。當樣品進入色譜柱時，溶質分布在兩相之間。達到平衡後，遵循高效液相色譜的計算公式。

公式中cs溶質在固定相的濃度、cm溶質在流動相的濃度、vs固定相的體積和vm流動相的體積。llpc與gpc有相似之處，即分離順序取決於k值較大的組分的保留值，但也存在差異。在gpc中，流量對k的影響較小，而llpc流量對k的影響較大。

⑶ 液相色譜儀的流動相為什麼要脫氣常用的脫氣方法有哪幾種

一、液相色譜儀的流動相脫氣的必要性

流動相脫氣是HPLC 系統能得到可靠數據的一個很有效的措施。HPLC 泵在輸送液體時要產生很大的力量，由於氣體的壓縮比與液體相比大的多，因而當氣泡存在時，我們發現瞬間的流速降低和系統壓力下降。如果這個氣泡足夠大，液相泵將不能輸送任何溶劑，而且如果壓力低於預先設定的壓力低限，泵將停止工作。當一個氣泡通過輸液泵時，由於系統壓力大，氣泡通常會溶解在流動相溶液中，隨流動相通過柱子。但是到達檢測器流通池時系統壓力又恢復到了大氣壓，因而氣泡可能在檢測器流通池中又顯現，在色譜圖上會出現不規律的毛刺。

二、脫氣方法
1. 吹氦脫氣法。
利用氦氣在液體中溶解度比空氣低的特性，在0.1MPa 壓力下，以約60 mL/min 流速通入流動相儲液容器中10～15min，可以很有效地從流動相中排除溶解的空氣，能排除接近80%的氧氣。採用一個分布式噴射流裝置，一體積的氦氣可從流動相中將等體積的幾乎全部氣體排除。這意味著1L 氦氣通過1L 流動相就可完成排氣這個工作。這種脫氣方法雖然好，但氦氣價格較高，很少使用。
2. 加熱迴流法。
此法的脫氣效果較好。在操作時要注意冷凝塔的冷卻效率，否則溶劑會丟失，混合流動相的比例會有變化。
3. 抽真空脫氣法。
此法可使用真空泵，降壓至0.05～0.07MPa ，即可除去溶解的氣體。但是由於真空脫氣會使混合溶劑組成發生變化，從而影響到實驗的重現性，因此多用於單溶劑體系的簡單分析。
4. 超聲波脫氣法。
欲脫氣的流動相置於超聲波清洗器中，用超聲波震盪10～20min。此法的脫氣效果zui差。
5. 在線脫氣法。
HPLC 儀器均可配我公司研製的在線脫氣機。在線脫氣使用簡單，低故障，有效。
為了保證液相色譜結果的准確性，脫氣是一個當要的環節。

⑷ 液相色譜使用前為什麼要過濾和脫氣

一般抄流動相在上儀器前必須經過兩個襲步驟：減壓抽濾和超聲
減壓抽濾有兩個目的，
一個是過濾掉氣體，尤其是有機相和水相混合的時候，會產生大量的氣泡。這些氣泡進入儀器就會堵住儀器和色譜柱，所以要除掉。
一個是過濾掉不溶性微粒。你看一般的過濾膜是4.5um孔徑的，這個是針對你的色譜柱而定的。色譜柱一般是5um的粒徑，保證過濾的流動相裡面小的毛絮啊，顆粒啊都不會進入色譜柱。

超聲的主要目的也是為了脫氣，另外還有助溶和令溶液混合均勻等作用。不過超聲主要是為了去掉溶劑瓶瓶壁和瓶底的氣泡，所以沒必要超聲太久的時間，3-5min足夠了。

總而言之，都是為了保護儀器和色譜柱，防止氣泡和雜質進入。