離子交換層析效果不好的原因

1. 什麼因素可影響離子交換柱層析法分離氨基酸

柱溫；
柱長徑比；
進料量；
進料濃度；
洗脫速度；
洗脫液pH；
交換柱配體的極性強弱；
樹脂交聯度；
樹脂粒徑等因素都會有影響。

2. 離子交換層析法分離純化蛋白質有哪些局限性

光用一種分離方法想分出純品是不可能的，離子交換的話得摸清你分離過程蛋白是否易變性。 分離出來稀釋倍數也很大。

3. 離子交換層析法分離純化蛋白質有哪些局限性

1. 因為抄離子交換吸附蛋白質並不是特異性吸附，在某些情況下可能難以判斷結合的蛋白質是否為當初設計的目的蛋白。

2. 離子交換吸附依賴於蛋白質表面的靜電荷，如果蛋白質結構比較特殊，可能會有在各種pH都難以結合上離子交換層析的情況。

3. 離子交換層析對於等電點與目標蛋白接近的雜蛋白並沒有很好的分離效果。

4. 請教離子交換層析與親和層析方面的問題

親和層析是通過層析介質表面鍵合的配基與目標物質特異性吸附，然後非目標物流穿，再改變流動相是目標物質的特異性吸附消失，從而達到純化目的。凝膠層析是通過層析介質孔徑的設定，使分子量大小相差比較大的物質通過的路徑不一樣，從而達到分離效果。離子交換是通過層析介質表面的帶電荷的基團與目標之間產生吸附，通過改變鹽濃度使吸附力的大小改變，從而使不同的物質解吸的速度不一樣，達到分離的效果。離子交換又分陰離子交換和陽離子交換。一般來說以上三種，離子交換應用面最廣，親和特異性最好，體積排阻的話只能對分子量差距很明顯的物質進行分離。

5. 請教：如何提高離子交換層析的分離度

離子交換層析是根據蛋白質所帶電荷的差異進行分離純化的一種方法。蛋白質的帶電性是由蛋白質多肽中帶電氨基酸決定的。由於蛋白質中氨基酸的電性又取決於介質中的pH，所以蛋白質的帶電性也就依賴於介質的pH。當pH較低時，負電基團被中和

6. 洗脫液的流速過快或過慢時，對分離效果有什麼影響

洗脫液的流速過快時目的物的過早解吸，會引起區帶擴散；過慢時，目的物的過晚解吸會使峰形過寬。

梯度洗脫中為保證流速的穩定，必須使用恆流泵，否則難獲重復結果。梯度洗脫常用一個弱極性的溶劑A和一個強極性的溶劑B。

洗脫液體積應足夠大，一般要幾十倍於床體積，從而使分離的各峰不致於太擁擠。梯度的上限要足夠高，使緊密吸附的物質能被洗脫下來。梯度不要上升太快，要恰好使移動的區帶在快到柱末端時達到解吸狀態。

(6)離子交換層析效果不好的原因擴展閱讀

根據吸附作用的強弱可選擇不同的洗脫液或不同濃度的同一溶劑對各類成分進行粗分。其一般方法如下：

1、用適量水洗，洗下單糖、鞣質、低聚糖、多糖等極性物質，用薄層色譜檢識，防止極性大的皂苷被洗下；

2、70%乙醇洗，洗脫液中主要為皂苷，但也含有酚性物質、糖類及少量黃酮，實驗證明30%乙醇不會洗下大量的黃酮類化合物；

3、3%～5%鹼溶液洗，可洗下黃酮、有機酸、酚性物質和氨基酸；

4、10%酸溶液洗，可洗下生物鹼、氨基酸；

5、丙酮洗，可洗下中性親脂性成分。

7. 反滲透分離法和離子交換分離法各有什麼優缺點

反滲透優點復：過濾精度高，可去除制大於0.0001微米的離子，通過半透膜的作用，簡單的說就是，通過反滲透膜後，只允許水通過，其他的鹽離子，微生物等等統統被截留。得到的水質較好。基本上不需要使用什麼化料（可能有些需要添加阻垢劑或做清洗），純物理法過濾，缺點就是能耗高，設備一次性投資大，使用若干年後換膜的費用也是一筆大支出。
離子交換的優點是可以選擇性除去陽離子或陰離子，或者選擇同時除去陽離子和陰離子，設備投資小。更換樹脂的費用也稍低，缺點就是需要經常做樹脂的再生，化料使用量大，同時帶來再生廢水的處理問題