超濾細菌內毒素

❶ 水廠是如何凈化水的

通常來講飲用水的原水雜質主要是泥沙（懸浮物）、有機顆粒（膠體）和鹽類（如鐵鹽，屬於溶解物質），成分相對單一，處理流程相對簡單。最常規的一套流程便是「原水-投葯-混凝-沉澱-過濾-消毒-用戶」，對於特殊的原水水質（比如受到了污染），則可以在初期增加預氧化，在後期附加活性炭吸附、氣浮等。
但需要注意的是，飲用水的出水指標要求是很嚴的，濁度、色度、臭閾值以及大腸菌群數、有機物濃度、重金屬離子濃度、放射性等必須符合《生活飲用水衛生標准》（GB 5749-2006）。
污水的成分相對復雜得多，因而相應的處理流程也很繁瑣。通常來講，城市排水管網里的污水主要包括城市生活污水和工業廢水。工業廢水在出廠時就已進行了初級處理，水質必須符合國家頒布的工業廢水排放標准；而城市生活污水裡的雜質大到果皮等生活垃圾，小到含氮、含磷的小分子有機物，無所不包。可見，城市污水處理的重點集中在生活污水上。生活污水的含碳類有機物含量很高，氮、磷也不少，直接排放會導致河湖水體腐敗，生物死亡以及富營養化等後果，必須進行處理。考慮到成本的因素，目前國內的污水廠主要採用生物處理法。
污水常見的一套處理流程便是「污水-格柵-沉砂池-初級沉澱池-曝氣池-二級沉澱池-消毒-排放」，這便是傳統的活性污泥法。此外，與之平行的還有生物膜法，原理都是利用微生物對污染物的降解來提高水質，只是具體的生物反應器有所不同。這些均是好氧生物處理，對於高濃度的有機廢水，先進行厭氧生物處理往往會取得更好的效果。厭氧生物處理工藝有氧化塘、上升式厭氧污泥床（UASB）、厭氧流化床（AFB）等。
此外，脫氮除磷往往是污水處理中很重要的一個方面。國外對活性污泥法進行改進後，用以脫氮。如三級生物脫氮工藝「進水-BOD去除/氨化-沉澱-硝化-沉澱-反硝化-沉澱-出水」，二級脫氮工藝「進水-BOD去除/氨化/硝化-沉澱-反硝化-沉澱-出水」。對於脫氮，當然還有SHARON工藝、ANAMMOX工藝等新式工藝。除磷常用的有厭氧-好氧工藝（A/O法）「進水-厭氧池-好氧池-二沉池-出水」、厭氧-缺氧-好氧工藝（A2/O法）「進水-厭氧池-缺氧池-好氧池-二沉池-出水」，另外還有Phostrip、Phoredox、UCT、VIP等除磷工藝。
還需說明的是，與污水處理同時進行的是污泥的處置，這是兩套系統。常用的流程是「/初沉池污泥-一級硝化-二級硝化-脫水-填埋/外運」。
總之，飲用水處理追求的是精益求精，出水水質要求高；污水處理面對的是高濃度污染物的問題，首要任務是有效地降低其濃度，兩者的出發點是不同的。

❷ 細菌內毒素精密過濾器有什麼要求

精密過濾是採用成型的濾材，原液通過濾材，濾渣留在濾材壁上，濾液透回過濾材流出，從答而達到過濾的目的。成型的濾材有：濾布、濾網、濾片、燒結濾管、線繞濾芯、熔噴濾芯、微孔濾芯及多功能濾芯。因濾材的不同，過濾孔徑也不相同。保安精密過濾是介於砂濾（粗濾）與超濾之間的一種過濾，過濾孔徑一般在0.1-120μm范圍。同種形式的濾材，按外形尺寸又分為不同的規格。
過濾細菌內毒素對精密過濾器的要求主要在濾芯精度上，常規精密過濾器精度在5μm，細菌內毒素精密過濾器要求精度需要小於5μm，因此需要選擇對應精度的濾芯，具體濾芯精度和濾芯材質的選擇需要參考水質參數。

❸ 如何去除內毒素

問題一：如何去除質粒中的內毒素 內毒素，即脂多糖或LPS，是革蘭氏陰性菌（如大腸桿菌）細胞膜的組成部分。細菌外膜的外層脂質部分是完全由內毒素分子所構成的。單個大腸桿菌細胞約包含兩百萬個LPS分子，每個LPS分子由疏水的脂質A（lipid A）部分、復雜的糖類殘基陣列部分及負電性的磷酸基團所組成。因此，每個內毒素分子都具有疏水域、親水域和電荷域，這使它在與其他分子相互作用時具有其獨特的自身性質。細菌在其活性生長期向其周圍微環境中散布少量的內毒素，在死亡時則釋放大量內毒素。
在質粒制備的細菌細胞裂解過程中，內毒素分子被從外膜釋放到溶菌液中。

去除內毒素

獲得專利的EndoFree Pla *** id制備方法在標準的QIAGEN Pla *** id純化方案中整合了對內毒素的去除步驟。使用QIAfilter Cartridge過濾中性的細菌裂解液，並加入專門的不含內毒素緩沖液（緩沖液ER）在冰上進行共同孵育。不含內毒素緩沖液能夠避免LPS分子與QIAGEN-tip中散悄態的樹脂結合，從而使每微克質粒DNA中含有的內毒素少於0.1EU。

問題二：怎樣去除內毒素 您好，去除內毒素的方法很多，但要結合實際情況採用不同的方法，您是什麼東西要除內毒素呢，比如玻璃試管，金屬製品等可採用乾熱法（如250度干烤3場分鍾），如果是液體的，可採用強酸強鹼等處理，或根據內毒素的帶點性及分子量等，可採用些特殊的方法。當然採用這些方法去除內毒素時的工藝等也還是有講究的。

問題三：細菌內毒素引入途經及消除方法 細菌內毒素主要來自於細菌污染。也有可能是采購的原料被污染後滅菌處理殘留。
消除的方法一般是高溫處理，玻璃器皿250度或者180度處理。如果是樣品珍貴的，也可以用去除內毒素的凝膠顆粒吸附。

問題四：怎樣能去除水的的內毒素(求助) 去除水中的內毒素（熱源），可以選用超純水系統來去除。特別是在做細胞和組織培養、蛋白質分析和蛋白質純化等實驗時，內毒素（熱源）的存在會直接導致培養物的污染而失敗，為此，應該用超純水系統來除實驗室用水中的熱源。如果進水為自來水，則一般的順序是：1、預處理 2、RO（反滲透）3、初級純化（離子交換）4、雙波長UV燈消毒 5、超濾柱（去內毒素）6、終端過濾器（最後一道過濾）。這樣得出的水就是實驗室級超純水，一定會符合你的需要。 現在生產超純水的廠家很多，論售後服務等，比較優秀的 HEAL FORCE品牌，你可以運灶考慮考慮。

問題五：含蛋白溶液裡面的內毒素如何去除 如果是大腸桿菌發酵後的蛋白溶液中內毒素的含量非常高，要去除需要進行多步處理，而且具體不同的蛋白處理的方法也不一樣。

問題六：緩沖液如何去除內毒素 可以用以下2種方法:（僅供參考）
1) 先配好緩沖液,然後用超濾的方法(截留分子量一般10萬,而且常以聚體形式存在.
2) 干烤>180度(通常選250度) 2-4小時,可以去除內毒素; 如果你的緩沖物質耐高溫,可以考慮先干烤,再用無熱源水配製緩沖液.

問題七：如何去除塑料製品中的內毒素 1用無水酒精清洗（無水乙醇），用布沾酒精輕輕擦拭便可去除。2找一塊軟質的繪圖橡皮就可以搞定，用橡皮在有污跡的地方來回輕輕的擦，可擦得很乾凈。3用風油精倒一點到布上，就可以沖源清除了，對許多種不幹膠的清除效果很好，你也可以試試。4用布蘸上防蚊用的「六神花露水」，擦起來很容易。5也可用指甲水擦拭試試，一般也很有效。

❹ 如何建立新葯的細菌內毒素檢查方法

[摘要] 目的：建立新葯的細菌內毒素檢查方法。方法：採用鱟試驗檢查法對新葯中的細菌內毒素進行檢查。結果：介紹了如何建立新葯的細菌內毒素檢查方法，重點是細菌內毒素檢查限值的確認以及如何進行干擾試驗。結論：細菌內毒素檢查法為新葯的質量控制以及應急檢驗提供了有益的基礎。

[關鍵詞] 新葯；細菌內毒素檢查法；干擾試驗
[中圖分類號] R927.12 [文獻標識碼] B [文章編號] 1673-7210（2011）11（b）-159-03

How to establish the method of bacterial endotoxin test for new drugs
XIAO Guinan, SUN Qingping, SHENG Yingmei
Guangdong Institute for Drug Control in Guangdong Province, Guangzhou 510180, China
[Abstract] Objective: To establish the method of bacterial endotoxin test for new drugs. Methods: Tachepleus amebocyte lysate test was applied to detect bacterial endotoxins in new drugs. Results: How to establish the method of bacterial endotoxin test for new drugs was introced, and especially focused on how to define the limit of bacterial endotoxins and carry out the interference test. Conclusion: Bacterial endotoxin test provides useful bases in quality control and emergency test for new drugs.
[Key words] New drugs; Bacterial endotoxin test; Interference test

新葯以細菌內毒素檢查方法代替既往的家兔熱原檢查法是一個趨勢，在葯害事件的應急處理中有一定的應用價值，這也符合國際上對動物實驗的「3R」原則（優化、減少、替代）的要求。現行細菌內毒素檢查方法是1968年美國科學家Levin和Bang所建立的鱟試驗法[1]。從開展內毒素檢查的現狀來看，部分單位未能參照《中國葯典》2010年版二部的要求進行實驗和設計，本文著重介紹在建立新葯細菌內毒素檢查法中容易出現問題的細菌內毒素限值的確定及干擾試驗這兩個環節，力圖為新葯的質量控制以及應急檢驗提供有益的參考依據。
1 新葯細菌內毒素檢查限值的確認
1.1 細菌內毒素檢查限值的計算公式
新葯細菌內毒素檢查限值（L）的確定是整個方法學建立的前提和基礎，現在一般按照《中國葯典》2010版二部附錄XI E進行確定[2]。計算公式為L=K/M，K為人每千克體重每小時最大可接受的內毒素劑量，以EU/（kg・h）表示，非放射性注射劑K=5 EU/（kg・h），放射性注射劑K=2.5 EU/（kg・h），鞘內用注射劑K=0.2 EU/（kg・h）；M為人用每千克體重每小時的最大供試品劑量，成人體重按60 kg計算，體表面積為1.62 m2。部分抗腫瘤葯物及抗生素的使用劑量以體表面積描述時，可將每平方米體表面積劑量乘以0.027，即可轉換為每千克體重劑量。
1.2 細菌內毒素檢查限值的確認程序
首先根據所研究的新葯品種說明書，通過查閱最新版《臨床用葯須知》等相關權威資料，得到人用每千克體重每小時的最大供試品劑量（M值）並求出L值，將所求得的L值與相關的質量標准（《美國葯典》、《英國葯典》、《日本葯局方》、《歐洲葯典》）以及國家食品葯品監督管理局頒布的轉正標准或注冊標准散件中關於該品種的細菌內毒素限值進行參考對比。
還有一種方法是參考該品種的熱原檢查劑量（可視為M值），因為熱原劑量的設置一般為成人臨床用量的1～3倍，與常用的安全系數3～10倍較為接近，這種參考熱原檢查劑量的做法在以前頗為盛行，現在已逐漸少用。
1.3 細菌內毒素限值計算的常見誤區
1.3.1 將成人日均用量誤作最大用量 大多數情況下，說明書或資料往往只提供了某葯的單次或每日用量，實踐中不少人往往將單次用量誤作最大用量進行限值計算，所得限值明顯偏寬。眾所周知，除極少數情況（急性、重症患者用葯）下的單次用量可作為最大用量外，多數情況的日常用量換算成最大用量，還需考慮一定的安全系數（一般取3～10倍）。
1.3.2 誤將每日總用量當成每次最大用量 只根據說明書或資料提供的某葯的每日總用量，未考慮該葯品總量的靜脈滴注時間已經遠不止1 h，這樣求得的限值難於真實反映實際限值，因為M值是反映人用每千克體重每小時能接受的最大供試品劑量，而非全日的總用量。
1.3.3 對於大輸液的細菌內毒素限值確定過於按部就班 沒有考慮大輸液的特殊要求，大輸液的主葯成分只佔其中很少的一部分，實際多為葡萄糖注射液或生理鹽水注射液，如果按主葯成分計算細菌內毒素限值的話，容易偏寬，因而如無特殊情況一般將熱原檢查劑量10 ml/kg視為最大臨床用量，將大輸液細菌內毒素限值定為0.5 EU/ml。
1.3.4 忽視滴注時帶入的外源性細菌內毒素 某些新葯在臨床使用時是溶於大輸液進行滴注的。假設某抗生素葯品的規格是1 g/支，其使用方法是溶於5%葡萄糖注射液250 ml，在1 h內滴注完畢。可參照下述方法計算該抗生素細菌內毒素限值，此時K=5 EU/（kg・h），因而60 kg的成人每小時體內可以接受細菌內毒素的最大量為300 EU，而在1 h內250 ml的5%葡萄糖注射液最大可帶來125 EU的細菌內毒素，1 g的該葯最多隻能帶入175 EU（125～300 EU）的細菌內毒素，因而該抗生素其細菌內毒素限值可定為0.175 EU/mg。如果按常規計算的話，求得限值為0.300 EU/mg。
1.3.5 沒有考慮到主葯外的其他成分 在細菌內毒素限值的確定過程中，特別是原料，要注意扣除主葯外的其他成分（如金屬離子：頭孢噻肟鈉中的鈉，西司他丁鈉中的鈉），因為標准一般規定為每毫克中頭孢噻肟或西司他丁所含的細菌內毒素量不得過多少EU，而製成的原料往往是含鈉等其他成分的。
2 鱟試劑靈敏度復核試驗
2.1 前期准備工作
試驗所用的器皿需經處理，以去除可能存在的外源性內毒素。若使用塑料器械，如微孔板和與微量加樣器配套的吸頭等，應選用標明無內毒素並且對試驗無干擾的器械。耐熱器皿常用乾熱滅菌法（250℃，30 min以上）去除，部分物品也可採用其他確證不幹擾細菌內毒素檢查的適宜方法（如強酸強鹼浸泡法），但需經過確證不幹擾鱟試驗檢查。
2.2 靈敏度復核試驗

當使用新批號的鱟試劑或試驗條件發生了任何可能影響檢驗結果的改變時，應進行鱟試劑靈敏度復核試驗。需要注意的是，當實測靈敏度λc在0.5λ～2.0λ（包括0.5λ～2.0λ，λ為鱟試劑靈敏度的標示值）時，方可用於細菌內毒素檢查，並以標示靈敏度λ為該批鱟試劑的靈敏度，日常檢驗中部分檢驗者誤將實測的靈敏度作為批鱟試劑的靈敏度來進行常規檢查或干擾試驗。
3 鱟試驗檢查的干擾試驗
3.1 最大有效稀釋倍數（MVD）的確認
MVD是指在試驗中供試品溶液被允許達到稀釋的最大倍數，計算公式為MVD=C・L/λ，式中L為供試品的內毒素限值，λ為鱟試劑的標示靈敏度（EU/ml），或是在光度測定法中所使用的標准曲線上最低的內毒素濃度；C為供試品液的濃度，當L以EU/ml表示時，則C等於1.0；如供試品為注射用無菌粉末或原料葯，則MVD取1，可計算供試品的最小有效稀釋濃度C=λ/L。
此處往往根據市售主要的鱟試劑靈敏度范圍（0.03～1.00 EU/ml）來計算干擾試驗中的有效濃度稀釋范圍。
3.2 干擾預試驗
取本品1支（原料精密稱取不低於10 mg的量），按照擬定內毒素限值，原料或注射用粉針加內毒素檢查用水溶解並稀釋至不超過MVD規定的系列濃度，注射液直接稀釋至不超過最小有效稀釋濃度的系列濃度，預試驗時一般可取一個廠家靈敏度為0.125 EU/ml或0.250 EU/ml的鱟試劑，對供試品原液及其系列稀釋液（供試品陰性對照，NPC）進行干擾檢驗，另外設立陽性對照（PC）、陰性對照（NC）、供試品陽性對照（PPC），每個濃度平行做兩管，最終得出供試品（批號：20100802）在某濃度及以下濃度對鱟試驗檢查不產生干擾作用（PPC首次出現「++」的濃度）的結論。供試液的干擾預試驗結果，見表1。
由表1可以看出，供試品在不高於20 mg/ml的濃度下不幹擾鱟試驗的檢查。
3.3 正式干擾試驗
按表2制備各系列溶液，使用的供試品溶液應為未檢驗出內毒素且不超過MVD的溶液，參照鱟試劑靈敏度復核試驗項下操作，記錄供試液的干擾情況。

只有當供試品溶液和陰性對照溶液的平行管都為陰性，且鱟試劑標示靈敏度的對照系列溶液的結果在鱟試劑靈敏度范圍內時，試驗方為有效，計算系列鱟試劑標示靈敏度的對照系列溶液和干擾試劑系列溶液的反應終點濃度的幾何平均值（Es和Et）。當Es在0.5λ～2.0λ及Et在0.5Es～2.0Es時，認為供試品在該濃度下無干擾作用。若供試品溶液在小於MVD的稀釋倍數下對試驗有干擾，應將供試品溶液進行不超過MVD的進一步稀釋，再重復干擾試驗。
當進行新葯的內毒素檢查試驗前或無內毒素檢查項的品種建立內毒素檢查法時，須進行干擾試驗；當鱟試劑、供試品的處方、生產工藝改變或試驗環境中發生了任何有可能影響試驗結果的變化時，須重新進行干擾試驗。
4 排除供試液干擾的方法[3]
4.1 樣品稀釋法
選用較高靈敏度的鱟試劑，將供試品進一步稀釋（低於最大有效稀釋倍數）後進行干擾試驗，一般情況下大部分的干擾作用均能得到有效控制。
4.2 調節pH法
測定供試液的pH值，若不在鱟試劑的有效緩沖pH范圍（6.0～8.0），可選用一定濃度的HCl或NaOH將pH值調節至6.0～8.0，但要注意應進行方法學驗證（干擾試驗），確保不幹擾鱟試驗檢查，且對內毒素檢查結果無影響。
4.3 超濾法
通過專用超濾系統，將影響內毒素檢查的葯物小分子雜質濾除，內毒素則留存於濾器內，濾器內加入相應的內毒素檢查用水進行檢查，可在幾乎不影響內毒素濃度的前提下盡量避免小分子葯物的干擾作用。
4.4 其他方法
微溫保持加熱法；使用去G因子鱟試劑或廠家提供的專用抗增液對樣品進行稀釋（此時須進行干擾試驗）。
5 常規檢查
使用最大有效稀釋倍數（MVD） 並且已經排除干擾的供試品溶液來制備溶液供試品溶液和供試品陽性對照溶液，進行細菌內毒素的常規檢測。
6 討論
建立新葯品種的細菌內毒素檢查法，首先要結合臨床最大用量確定其細菌內毒素限值，應用兩個廠家的鱟試劑對3批樣品進行鱟試驗檢查（普通凝膠法或動態濁度法定量試驗），如結果能證實樣品在不低於最大有效稀釋濃度時對細菌內毒素檢查無干擾作用，且樣品的細菌內毒素常規檢查結果為陰性，此時方可建立該品種的細菌內毒素檢查法[4-7]。
根據臨床最大用量規定及實驗結果，將所研究的新葯細菌內毒素限值定為每毫克主葯（或每毫升）中含內毒素的量應小於若干EU。經干擾實驗確證，該新葯在某個濃度或低於該濃度時（但不低於最大有效稀釋濃度MVC）對細菌內毒素檢查無干擾作用。取本品3批，按擬定的標准檢驗，其內毒素檢查結果均符合規定。

❺ 內毒素去除方法

注射用水內毒素超標的因素有三個：1、注射用水管道受污染：2、注射用水管道不密封：3、出水口污染未清洗干凈

❻ 0.22除菌級濾膜能不能除去細菌內毒素

能去除一部分，0.22微米的濾膜孔徑是正態分布的不是絕對的過濾孔徑，因此會有一些內毒素會透過！建議採用6000道爾頓的超濾膜來去除

❼ 舉例幾種熱原的去除方法

使用UF法的注射用水生產設備：

使用UF法生產注射用水的設備，可通過截留分子量6,000以下的UF膜組件對精製水進行過濾，從而獲取注射用水3）（圖1）。在UF系統中，精製水以十字流過濾方式3）（交叉流動過濾，圖2）在UF膜組件中循環，精製水中的微生物以及熱原物質通過UF膜表面的微孔進行阻隔。