陽離子交換樹脂分離混合氨基酸實驗報告

⑴ 請問用陽離子交換樹脂提取氨基酸，用氨水洗脫後怎樣去除其中的氨水

減壓濃縮，體積太大，消耗能源成本過高！
洗脫液一般濃度很低。可以先用反滲透慮版去大部分氨水，權收集配製下次洗脫用氨水！
再用真空減壓濃縮。氨水被蒸發掉（蒸餾水冷凝回收氨水）這樣提高了氨基酸濃度的同時趕掉氨水！

⑵ 急求：離子交換柱層析分離氨基酸的講義

一、目的

學慣用陽離子交換樹脂柱分離氦基酸的操作方法和基本原理。

二、原理

各種氨基酸分子的結構不同，在同一PH時與離子交換樹脂的親和力有差異，因此可依親和力從小到大的順序被洗脫液洗脫下來，達到分離的效果。

三、器材

1、20cmX 1cm層析管 2、試管

3、吸管． 4、恆壓洗脫瓶

5、部分收集器 6、搪磁杯

7、電爐 8、分光光度計

四、試劑和材料

1、．苯乙烯磺酸鈉型樹脂（強酸 lx 8，l00一200目，可用上海華東化工學院產品）

2 、2 mol／L鹽酸溶液

3、2mol／L氫氧化鈉溶液

4、標准氨基酸溶液 天冬氨酸、賴氨酸和組氨酸均配製成 2 mg／mL的0.1M鹽酸溶液。

5、混合氫基酸溶液將上述天冬氨酸、賴氨酸和組氨酸溶液按1：2．5：10的比例混合。

6、檸檬酸－氫氧化鈉一鹽酸沖液（pH5.8），鈉離子濃度0 .45M）

取檸檬酸（C6O7H8.H20 ）14.25g、氫氧化鈉9.30g和 濃鹽酸 5．25 mL溶於少量水後，定容至 500 mL，冰箱保存。

7、顯色劑 2 g水合茚三酮溶於 75mL乙二醇單甲醚中．加水至 100 mL。

8、50%乙醇水溶液

五、操作

1、層析柱的准備：將強酸型陽離子交換樹脂用氫氧化鈉處理成Na+型後洗至中性（處理方法見第三篇實驗十二）．攪拌一小時後裝成一個直徑1cm．高 16～18 cm的層析柱。

2、氨基酸的洗脫：用P H5.8的檸檬酸緩沖液流洗平衡交換住（裝置如圖）。調節流速為 0.5 mL／min，流出液達床體積的4倍時即可上樣。由柱上端仔細加人氨基酸混合液0．25—0．5 mL，同時開始收集流出液。當樣品液彎月面靠近樹脂頂端時，即刻加入0.5 mL擰檬酸緩沖液沖洗加樣品處。待緩沖液彎月面靠近樹脂頂端時。再加入0．5 mL緩沖液。如此重復兩次，然後用滴管小心注入檸檬酸緩沖液（切勿攪動床面），並將柱與洗脫瓶和部分收集器相連。開始用試管收集洗脫液，每管收集lmL．共收集60一80管。

3、氨基酸的鑒定：向各管收集液中加lmL水合茚三酮顯色劑並混勻，在沸水浴中淮確加熱15分鍾後冷卻至室溫．再加15 mL的50％乙醇液。放置10分鍾。以收集液第2管為空白，測定A570nm波長的光吸收值。以光吸收值為縱坐標，以柱洗脫體積為橫坐標繪制洗脫曲線。以已知3種氨基酸的純溶液為樣品，按上述方法和條件分別操作，將得到的洗脫曲線與混合氨基酸的洗脫曲線對照．可確定3個峰的大致位置及各蜂為何種氨基酸。

⑶ 如何應用離子交換層析分離氨基酸混合物

離子交換樹脂是一種合成的高聚物,不溶於水,能吸水膨脹.高聚物分子由能電離回的極性基團及非極答性的樹脂組成.極性基團上的離子能與溶液中的離子起交換作用,而非極性的樹脂本身物性不變.通常離子交換樹脂按所帶的基團分為強酸(＝R＝S03H)

⑷ 求問怎麼用離子交換樹脂層析分離混合氨基酸

【原理】離子交換樹脂是一種合成的高聚物,不溶於水,能吸水膨脹.高聚物分子由能電離的極性基團及非極性的樹脂組成.極性基團上的離子能與溶液中的離子起交換作用,而非極性的樹脂本身物性不變.通常離子交換樹脂按所帶的基團分為強酸(＝R＝S03H)、弱(＝COOH)、強鹼 (＝N+＝R：)和弱鹼(＝NH2＝NHR＝NR2).離子交換樹脂分離小分子物質如氨基酸、腺苷、腺苷酸等是比較理想的.但對生物大於物質如蛋白質是不適當的,因為它們不能擴散到樹脂的鏈狀結構中.故如分離生物大子、可選用以多糖聚合物如纖維素、葡聚糖為載體的離子交換劑.本實驗用磺酸陽離子交換樹脂分離酸性氨基酸(天冬氨酸)、中性氨基酸(丙氨酸)鹼性氨基酸(賴氨酸)的混合液.在特定的pH條件下,它們解離程度不同,通過改變脫液的pH或離子強度可分別洗脫分離.【材料】1．實驗器材層析柱（1.6X20cm）；恆流泵；梯度混合器；試管及試管架；紫外分光光度計、磺酸陽離子交換樹脂(Dowex 50)2．實驗試劑(1)2mol／L HCl(2)2mol／L NaOH(3)0.1mOl／L HCl(4) 0.1mol／L NaOH(5)pH4.2的檸檬酸緩沖液：0.lmol／L檸檬酸54m1加0.1mol／L檸檬酸鈉46ml(6)pH5的醋酸緩沖液：0.2mol／L NaAc 70ml加 0.2mol／L HAc 30ml(7)0.2％中性茚三酮溶液：0.2g茚三酮加100ml丙酮(8)氨基酸混合液：丙氨酸、天冬氨酸、賴氨酸各10m1加0.1mol／L HCl 3m【方法】1.樹脂的處理100ml燒杯中置約10g樹脂,加25ml 12mo1／L HCl攪拌2h,傾棄酸液,用蒸餾水充洗滌樹脂至中性.加25ml 12mol／L NaOH至上述樹脂中攪拌2h,傾棄鹼液,用蒸餾水洗滌至中性.將樹脂懸浮於50ml pH4.2檸檬酸緩沖液中備用.2.裝柱取直徑0.8cm～1.2cm、長度 10cm～12cm的層析柱,底部墊玻璃棉或海綿圓墊,自頂部注入經處理的上述樹脂懸浮液,關閉層柱出口,待樹脂沉降後,放出過量的溶液,在加入一些樹脂,至樹脂沉積至8cm～10cm高度即可.於柱子頂部繼續加入pH4.2檸檬酸緩沖液洗滌,使流出液pH為4.2為止,關閉柱子出口,保持液面高出樹脂表面1cm左右.3.加樣、洗脫及洗脫液收集打開山口使緩沖液流出,待液面幾乎平齊樹脂表面時關閉出口(不可使樹脂表面乾燥).用長滴管將15滴氨基酸混合液仔細直接加到樹脂頂部,打開出口使其緩慢流入柱內.當液面剛平樹脂表面時,加入0.1mol／L HCl 3ml,以10滴／min～12滴／min的流速洗脫,收集洗脫液,每管20滴,逐管收存.當HCl液面剛平樹脂表面時,用1m1 pH4.2檸檬酸緩沖液沖洗柱壁一次,接著用2ml pH4.2檸檬酸緩沖液洗脫,保持流速10滴／min～12滴／min並注意勿使樹脂表面乾燥.在收集洗脫液的過程中,逐管用茚三酮檢驗氨基酸的洗脫情況,方法是：於各管洗脫液中加10滴pH5醋酸緩沖液和10滴中性茚三酮溶液,沸水浴中煮10min,如溶液呈紫藍色,表示已有氨基酸洗脫下來.顯色的深度可代表洗脫的氨基酸濃度,可比色測.在用pH4.2檸檬酸緩沖液把第二個氨基酸洗脫出來之後,再收集兩管茚三酮反應陰性部分,關閉層析柱出口,將樹脂頂部剩餘的pH4.2檸檬酸緩沖液移去.於樹脂頂部加入2ml 0.1mo1／L NaOH,打開出口使其緩慢流入柱內,按上面I續用0.1mo1／L NaOH洗脫並逐管收集 (注意仍然保持流速10滴／min～12滴／min),每管20滴.做洗脫液中氨基酸檢驗,在第三個氨基酸用0.1mo1／L NaOH洗脫下來以後,再繼續收集兩管茚三酮反應陰性部分.最後以洗脫液管號為橫坐標,洗脫液各管光密度（以水作空白,在570nm波長讀取吸光度）或顏色深淺（以 -,±,+,++．．．表示）為縱坐標作圖,即可畫出一條洗脫曲線.【注意事項】1.一直保持流速10滴/min～12滴／min,並注意勿使樹脂表面乾燥.2.在裝柱時必須防止氣泡、分層及柱子液面在樹脂表面以下等現象發生.

⑸ 離子交換層析分離混合氨基酸實驗能否用陰離子交換樹脂

您好！離子交換層析分離混合氨基酸實驗也能用陰離子交換樹脂，但是一般都版是用強陽權性離子交換樹脂在pH2-3之間進行分離。
因為大部分氨基酸等電點都偏酸，如果用強陰離子交換樹脂的話，洗脫鹽濃度較大，而且分離效果不如陽離子交換的好。

網路教育團隊【海納百川團】為您解答。
感謝您的採納，O(∩_∩)O 如有疑問，歡迎追問。

⑹ 用強酸性陽離子交換樹脂分離氨基酸混合物時，為什麼要逐步提高洗脫液的pH和離子強度

用強酸性陽離子交換樹脂分離氨基酸混合物時，氨基酸都是以陽離子的形式版，被吸附到樹脂權的離子交換位上。
由於氨基酸是兩性化合物，既有酸性，也有鹼性，因此氨基酸都有等電點，pH低於等電點時，呈陽離子狀態，pH高於等電點時，呈陰離子狀態。氨基酸被強酸性離子交換樹脂吸附後，都是以陽離子形式存在的，轉變為陰離子就會被洗脫。通過逐漸提高洗脫液的pH，利用氨基酸不同的等電點，使不同的氨基酸逐漸從陽離子改變為陰離子，而被洗脫出來，從而達到分離效果。

⑺ 離子交換層析分離氨基酸混合物的方法是根據氨基酸的什麼性質

氨基酸的分離鑒定——紙層析法 一,實驗目的 掌握氨基酸紙層析的方法和原理,學會分析待 測樣品的氨基酸成分. 二,實驗原理 紙層析是以濾紙為惰性支持物的分配層析.濾紙纖維上的羥基具有親水性,吸附一層水作為固定相,有機溶劑為流動相.當有機相流經固定相時,物質在兩相間不斷分配而得到分離. 溶質在濾紙上的移動速度用Rf值表示: Rf=原點到層析斑點中心的距離/原點到溶劑前沿的距離 在一定的條件下某種物質的Rf值是常數.Rf值的大小與物質的結構,性質,溶劑系統,層析濾紙的質量和層析溫度等因素有關.本實驗利用紙層析法分離氨基酸. 三,實驗器材 (1)大燒杯(5000mL):1隻/組 (2)微量注射器(100 L):1隻/ 組. (3)噴霧器:公用. (4)培養皿:1隻/組. (5)層析濾紙(長22cm,寬14cm的新華一號濾紙):1張/組. (6)直尺,鉛筆:自備. (7)電吹風:1隻/組. (8)托盤,針,白線:1套/組. (9)手套:1雙/組. (10)塑料薄膜:公用. (11)小燒杯:50mL,1隻/組. 四,實驗試劑 (1)擴展劑:將4體積正丁醇和1體積冰醋酸放入分液漏斗中,與5體積水混合,充分振盪,靜置後分層,棄去下層水層. (2)氨基酸溶液:0.5%的已知氨基酸溶液3種(賴氨酸,苯丙氨酸,纈氨酸),0.5%的待測氨基酸液1種. (3)顯色劑:0.1%水合茚三酮正丁醇溶液. 實驗試劑 五,實驗操作 檢查培養皿是否乾燥,潔凈;若否,將其洗凈並置於乾燥箱內120℃烘乾. (1)平衡:剪一大塊塑料薄膜鋪在桌面上,將層析缸或大燒杯到置於塑料薄膜上,再把盛有約20mL展層溶液的小燒杯置於倒置的層析缸或大燒杯中,用塑料薄膜密封起來,平衡20min. (2)規劃:帶上手套,取寬約14cm,高約22cm的層析濾紙一張.在紙的下端距邊緣2cm處輕輕用鉛筆劃一條平行於底邊的直線A,在直線上做4個記號,記號之間間隔2cm,這就是原點的位置.另在距左邊緣1cm處畫一條平行於左邊緣的直線B,在B線上以A,B兩線的交點為原點標明刻度(以厘米為單位),參見左圖. (3)點樣:用微量注射器分別取10mL左右的氨基酸樣品(每取一個樣之前都要用蒸餾水洗滌微量注射器,以免交叉污染),點在這四個位置上.擠一滴點一次,同一位置上需點2～3次,2～3mL/次,每點完一點,立刻用電吹風熱風吹乾後再點,以保證每點在紙上擴散的直徑最大不超過3mm.每人須點4個樣,其中3個是已知樣,1個是待測樣品. (4)層析:用針,線將濾紙縫成筒狀,紙的兩側 邊緣不能接觸且要保持平行,參見圖3-3.向培養皿中加入擴展劑,使其液面高度達到1cm左右,將點好樣的濾紙筒直立於培養皿中(點樣的一端在下,擴展劑的液面在A線下約1cm),罩上大燒杯,仍用塑料薄膜密封.當擴展劑上升到A線時開始計時,每隔一定時間測定一下擴展劑上升的高度,填入表3-1中.當上升到15～18cm,取出濾紙,剪斷連線,立即用鉛筆描出溶劑前沿線,迅速用電吹風熱風吹乾. (5)顯色:用噴霧器在通風廚中向濾紙上均勻噴上0.1%茚三酮正丁醇溶液,然後立即用熱風吹乾,即可顯出各層析斑點,參見左圖. (6)計算各種氨基酸的Rf值,並判斷混合樣品中都有哪些氨基酸,各人將自己的實驗結果貼在實驗報告上,見表3-2. (7)以層析時間為橫坐標,擴展劑上升高度為縱坐標畫圖,求出擴展劑上升到18cm時所需要的時間. (8)將微量注射器內外用蒸餾水清洗干凈,倒掉用過的展層液和平衡液,將培養皿洗凈,整理好桌面上的儀器和試劑

⑻ 離子交換樹脂提取生物鹼的原理是什麼

通過離子交換樹脂的聚合多孔性及官能團進行吸附，由於這一交換過程速度很快，離子交換樹脂對生物鹼的親和性也很好，水處理填料樹脂因此在這個過程中，有機物對離子交換樹脂的污染很小。吸附飽和後，再用稀濃度的酸液進行分布洗脫，稀的酸液洗下的是正電荷很弱的雜質，它們可以與活性官能鍵結合，但是不穩定，然後再用較高濃度的酸液將吸附的生物鹼洗脫，最後用高濃度的酸液洗脫與活性官能團結合很牢固的陽離子雜質。為了確保離子交換樹脂的吸附容量，往往在使用到一定周期後，會採用NaOH溶液進行逆轉型復甦。

⑼ 如何用離子交換樹脂分離提純牛磺酸，以除去雜質氨基酸

牛磺酸是氨基酸的來一種，分離自提純主要利用各種氨基酸物質的等電點不同，通過調節料液的PH值，用離子交換樹脂進行吸附分離純化生產牛磺酸結晶體。一般是將PH調到4-5左右，用陽離子交換樹脂即可吸附。製造純度在98%以上牛磺酸結晶體。也有使用陽樹脂（C107）和陰樹脂（D354）串聯使用。如有需要，我可提供樹脂樣品和試驗方案給您。