⑴ 島津液相色譜儀的問題。
目前液相色譜復只有極制少數可以用超純水沖洗，一般的C8和C18柱都不能用純水沖水，即使是說明書說可以用超純水清洗，也不益這么做，這樣易造成填料坍塌。泵壓高，這是很正常，但不建議用大流量沖冼，一般情況不能超過泵能承受的壓力，比泵的最高承受壓力低10Mpa。即使用純的甲醇和乙腈，雖壓力不會過線，但最好不要這樣用，因為這樣容易造成柱的填料坍塌，
⑵ 大連江申液相色譜儀LC-10P使用說明書
高效液相色譜儀使用說明
型號：LC-10AT 產地 日本島津 型號： L C - 10A T 高效液相色譜儀是日本島津公司 1996 年的產品, 檢測器為可變波長紫外檢測 器, 色譜柱為島津公司的 ODS - C18 。 2. 用途： 用途： 高效液相色譜法只要求樣品能製成溶液, 不受樣品揮發性的限制,流動相可選擇的范圍寬, 固定相的種類繁多,因而可以分離熱不穩定和非揮發性的、 離解的和非離解的以及各種分子 量范圍的物質。 與試樣預處理技術相配合，HPL C 所達到的高解析度和高靈敏度，使分離和同時測定 性質上十分相近的物質成為可能， 能夠分離復雜相體中的微量成分。 隨著固定相的發展, 有 可能在充分保持生化物質活性的條件下完成其分離。由於 HPL C 具有高解析度、高靈敏 度、速度快、色譜柱可反復利用, 流出組分易收集等優點,因而被廣泛應用到生物化學、食 品分析、醫葯研究、環境分析、無機分析等各種領域。高效液相色譜儀與結構儀器的聯用 是一個重要的發展方向。 3. 測定原理 高效液相色譜儀的系統由儲液器、泵、進樣器、色譜柱、檢測器、記錄儀等幾部分組成。 儲液器中的流動相被高壓泵打入系統， 樣品溶液經進樣器進入流動相,被流動相載入色譜柱 (固定相) 內, 由於樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數, 在兩相中作相對運 動時, 經過反復多次的吸附- 解吸的分配過程, 各組分在移動速度上產生較大的差別, 被 分離成單個組分依次從柱內流出, 通過檢測器時, 樣品濃度被轉換成電信號傳送到記錄 儀，數據以圖譜形式列印出來。 4. 使用方法 4.1 系統組成：本系統由 1 個 LC-10ATvp 溶劑輸送泵、Rheodyne 7725i 手動進樣閥、 SPD-10Avp 紫外-可見檢測器、色譜數據工作站和電腦等組成，另外還包括列印機、不間 斷電源等輔助設備。 4.2 准備 4.2.1 准備所需的流動相，用合適的 0.45?m 濾膜過濾，超聲波脫氣 20min。 4.2.2 根據待檢樣品的需要更換合適的洗脫柱（注意方向）和定量環。 4.2.3 配製樣品和標准溶液（也可在平衡系統時配製） ，用合適的 0.45?m 濾膜過濾。 3.2.4 檢查儀器各部件的電源線、數據線和輸液管道是否連接正常，特別注意輸液管道內 是否有氣泡。 4.3 開機：接通電源，依次開啟不間斷電源、溶劑輸送泵、先將機器預熱半小時，這時 的流動相用 85％甲醇溶液（已脫氣） ，而且要時刻注意輸液管道內是否有氣泡，如有氣泡 要進行排氣。預熱半小時後，開啟檢測器，待檢測器自檢結束後，打開列印機、電腦顯示 器、主機，最後打開色譜工作站。 4.4 各種參數設定 4.4.1 波長設定：在檢測器顯示初始屏幕時，按[func]鍵，用數字鍵輸入所需波長值，按 [Enter]鍵確認。按[CE]鍵退出到初始屏幕。 4.4.2 流速設定：在輸送泵顯示初始屏幕時，按[func]鍵，用數字鍵輸入所需的流速（柱在 線時流速一般不超過 1ml/min） ，按[Enter]鍵確認。按[CE]鍵退出。 4.5 更換流動相並排氣泡 4.5.1 將輸送管道的吸濾器放入裝有準備好的流動相的儲液瓶（已排氣）中； 4.5.2 逆時針轉動泵的排液閥 180 度，打開排液閥； 4.5.3 按泵的[purge]鍵，pump 指示燈亮，泵大約以 2ml/min 的流速沖洗，3min（可設定） 後自動停止； 4.5.4 將排液閥順時針旋轉到底，關閉排液閥。 4.5.5 如管路中仍有氣泡，則重復以上操作直至氣泡排盡。 4.5.6 如按以上方法不能排盡氣泡，從柱入口處拆下連接管，放入廢液瓶中，設流速為 5ml/min，按[pump]鍵，沖洗 3min 後再按[pump]鍵停泵，重新接上柱並將流速重設為規定 值。 4.6 平衡系統 4.6.1 按《大連江申色譜數據工作站操作規程》打開「在線色譜工作站」軟體，輸入實驗信 息並設定各項方法參數後，按下「數據收集」頁的 [查看基線] 按鈕。 4.6.2 等度洗脫方式 4.6.2.1 按輸送泵的[pump]鍵，泵啟動，pump 指示燈亮。用檢驗方法規定的流動相沖洗系 統，一般最少需 6 倍柱體積的流動相。 4.6.2.2 檢查各管路連接處是否漏液，如漏液應予以排除。 4.6.2.3 觀察泵控制屏幕上的壓力值，壓力波動應不超過 1MPa。如超過則可初步判斷為柱 前管路仍有氣泡，按 3.5 操作。 4.6.2.4 觀察基線變化。如果沖洗至基線漂移<0.01mV/min，雜訊為<0.001mV 時，可認為 系統已達到平衡狀態，可以進樣。 4.7 測定步驟 4.7.1 計算校正因子 4.7.1.1 用編輯∈實驗參數編輯實驗參數在編輯實驗參數時， 紀錄圖譜名要按照校正文件名 的格式輸入 xxxx0101. 4.7.1.2 用編輯∈積分定量參數對話框，選擇單點外標法 4.7.1.3 用編輯∈報告參數對話框編輯好相應的參數，選擇校正實驗檢查框 4.7.1.4 用編輯∈校正∈校正實驗參數對話框編輯相應的校正參數及方式， 校正文件名前綴 必須與編輯∈實驗參數的文件名前 4 位一致 4.7.1.5 用編輯∈校正編輯定量峰表對話框編輯需要的校正的色譜峰的保留時間、樣品名、 每點的含量、峰標志及誤差，編輯完成後確認，以後∈校正∈計算校正因子命令利用定量 峰表進行峰的匹配及計算。 4.7.1.6 用∈操作∈數據採集功能進行求校正因子的實驗，將標准樣品進樣，進樣前按檢測 器[zero]鍵調零，按軟體中 [零點校正] 按鈕校正基線零點，再按一下 [查看基線] 按鈕使 其彈起。 4.7.1.7 用∈操作∈峰檢測功能對圖譜進行峰檢測， 完成後用∈操作∈校正∈計算校正因子 及繪制標准曲線。 4.7.2 進樣 4.7.2.1 進樣前按檢測器[zero]鍵調零，按軟體中 [零點校正] 按鈕校正基線零點，再按一 下 [查看基線] 按鈕使其彈起。用試樣溶液清洗注射器，並排除氣泡後抽取適量 4.7.2.2 進行樣品分析，用∈操作∈數據採集對樣品進行數據採集，並把編輯∈報告參數把 校正文件名填入校正文件名編輯框，然後進測定樣。 4.7.2.3 用∈操作∈峰檢測， 對採集的色譜峰進行檢測， 之後工作站自動裝入外標因子文件， 計算出含量。 4.7.2.4 列印報告 用∈列印∈列印分析報告，列印機輸出分析報告。 4.8 關機 樣品測定結束後，將檢測器關機，將輸送管道的吸濾器放入裝有 85％甲醇溶液（已脫氣） 的儲液瓶，進行測定系統清洗，半小時後關機。 5. 注意事項 5.1 流動相內有氣泡, 關閉泵, 打開泄壓閥, 打開 purge 鍵, 清洗脫氣, 氣泡不斷從過濾器冒 出, 進入流動相, 無論打開 purge 鍵幾次,都無法清除不斷產生的氣泡。 原因過濾器長期沉浸於乙酸銨等緩沖液內, 過濾器內部由於黴菌的生長繁殖,形成菌團, 阻塞了過濾器,緩沖液難以流暢地通過過濾器,空氣在泵的壓力作用下經過濾器進入流動 相。 處理過濾器浸泡於 5 %硝酸溶液中,超聲清洗幾分鍾即可;亦可將過濾器浸泡於 5 %硝酸 溶液中 12～36 小時, 輕輕震盪幾次, 再將過濾器用純水清洗幾次, 打開泄壓閥, 打開 p urge 鍵,清洗脫氣, 如仍有氣泡不斷從過濾器冒出, 繼續將過濾器浸泡於 5 %硝酸溶液中, 如沒有氣泡不斷從過濾器中冒出,說明過濾器內部的黴菌菌團已被硝酸破壞, 流動相可以 流暢地通過過濾器。打開泄壓閥,打開泵,流速調至 1. 0～3. 0ml/ min ,純水沖洗過濾器 1 小 時左右。即可將過濾器清洗干凈。關閉泄壓閥,純甲醇沖洗半小時即可。 5.2 柱壓高原因(1) 緩沖液鹽分如(乙酸銨等) 沉積於柱內; (2) 樣品污染沉積。 處理對於第一種情況先用 40～50 ℃的純水,低速正向沖洗柱子, 待柱壓逐漸下降後, 相 應提高流速沖洗, 柱壓大幅度下降後, 用常溫純水沖洗, 之後用純甲醇沖洗柱子 30 分鍾; 對於第二種情況,由樣品的沉積引起污染的 C18 柱,和純水反向沖洗柱子, 然後換成甲醇沖 洗, 接著用甲醇+ 異丙醇(4 + 6) 沖洗柱子(沖洗時間的長短由樣品污染的情況而定) , 再用 換成甲醇沖洗, 然後用純水沖洗, 最後甲醇沖洗正向沖洗柱子 30 分鍾以上。 5.3 既無壓力指示,又無液體流過 原因(1) 泵密封墊圈磨損; (2) 大量氣泡進入泵體。 處理對於第一種情況,更換密封墊圈;對於第二種情況,在泵作用的同時, 用一個 50ml 的 玻璃針筒在泵的出口處幫助抽出空氣。 5.4 壓力波動大,流量不穩定. 原因系統中有空氣或者單向閥的寶石球和閥座之間夾有異物,使得兩者不能密封。 處理工作中注意觀察流動相的量, 保證不銹鋼濾器沉入儲液器瓶底,避免吸入空氣,流動 相要充分脫氣[2 >。 如為單向閥和閥座之間夾有異物, 拆下單向閥, 放入盛有丙酮的燒杯用 超聲波清洗. 5.5 出峰不佳,峰分叉。 原因(1) 色譜柱被污染; (2) 柱頭填料塌陷。 處理對於第一種情況, 先用純水反向沖洗柱子, 然後換成甲醇沖洗, 接著用甲醇+ 異丙 醇(4 + 6) 沖洗柱子(沖洗時間的長短由樣品污染的情況而定) , 再換成甲醇沖洗, 然後用純 水沖洗,最後甲醇沖洗正向沖洗柱子 30 分鍾以上。 如沖洗後依然出峰不佳,則考慮第二種情 況。對於第二種情況,擰開柱頭,檢查柱填料是否硬結或塌陷。去除硬結部分(污染的填料) , 裝入新填料, 滴一滴甲醇, 填料下陷, 再填, 用與柱內徑相同的頂端平滑的不銹鋼桿壓緊, 再填平, 滴甲醇, 再壓緊反復幾次, 直至裝滿填平[2 >。柱頭用甲醇沖洗干凈, 擦凈柱外壁 的填料, 擰緊柱頭,用純甲醇沖洗 30 分鍾以上。 5.6 峰面積重復性不佳。 原因(1) 進樣閥漏液; (2) 加樣針不到位。 處理對於第一種情況更換進樣閥墊圈; 對於第二種情況保證加樣針插到底,注射樣品溶 液後須快速、平穩地從 LOAD 狀態轉換到 INJ EC T 狀態,以保證進樣量的准確。日常工 作中, 液相色譜儀的保養非常重要, 如要注意不要讓空氣進入輸液系統和高壓泵中, 儲液 器內的溶液如長時間未用應清洗儲液器並更換溶液, 每次用完色譜儀後緩沖液要用純水沖 洗干凈,防止無機鹽析出或沉積; 樣品的前處理也很重要,任何樣品都要盡可能地去除雜質, 完全溶解, 盡量減少對色譜柱的污染, 以延長色譜柱的使用壽命, 同時避免注射過濃的樣 品溶液, 以免殘留液在進樣閥內析出固體引起堵塞; 色譜柱作好標記,用於不同分析目的 的色譜柱不要混用等。
⑶ 高效液相色譜比例閥堵了，工程師讓用異丙醇沖，想問是沖有問題的通道還是怎麼做，求具體操作步驟
首先說一下原理：異丙醇的粘度比較高。如果是不溶性微粒，或者氣泡之類的東西堵住了管路，異丙醇可以把他們粘下來。
第二，如果是比例閥堵了。建議四個管路都沖，每個管路25%。如果是某一個管路堵了，那就單獨沖洗這一個通道就可以。
第三，沖洗方法：先把色譜柱卸下來，換上兩通。異丙醇對色譜柱有傷害。最好不要過柱子。如果系統中有流動相，先用10%的甲醇水沖洗掉，免得無機鹽遇到異丙醇之後鹽析。然後排氣，慢慢地升高流速。有可能柱壓會很高，要沖一會兒才能提高流速。我不知道工程師是怎麼說的，要多少的流速，沖多久，記得注意壓力變化。如果壓力下降了，那麼可能就是沖開了。