⑴ 微生物實驗室 哪些儀器 小木蟲
不大明白你要問什麼，我猜測你是想問微生物實驗室需要哪些如廳者儀器，如果是那樣的話，需要：滅菌鍋（2個）、遠紅外爐（溶解培養基用的），生化培養箱、烘箱、潔凈工作台，百分之一天平（稱培伏圓養基的），如果測純化水的微生物的話，還需要微生物限度過濾器和配套濾杯濾膜，希望能幫到你渣薯。
⑵ chrome103色譜柱怕水不
chrome103色譜柱不怕水，但是用水短時間內沖洗色譜柱，通常不會對色譜柱造成較大的損傷，但如果長時間用水沖洗色譜柱則可能引起固定相喊螞流失和相塌陷現象，所以桐掘若非必要請盡量避免用純水沖洗色譜柱，建鄭輪埋議在水中加入一定量的甲醇或乙腈進行沖洗，通常水的含量<90%不會對色譜柱造成任何影響。
⑶ 病毒RNA的提取方法主要有哪幾種
方法很多（我從小木蟲粘貼了一份很全的流程），主流的有三種。
一、提禽流感病毒的詳細步驟，可參考（我提過N次做定量PCR都沒問題）：
1.取200ul樣品數+陰性對照+陽性對照個1.5ml滅菌eppendorf管
2.加600ul異硫氰酸胍，然後加入對照和樣品，再加200ul氯仿，顛倒混勻
3.13000rpm離心15min
4.在第3步離心快結束時，另取同樣多eppendorf管，加入400ul -20度預冷的異丙醇
5.取第3步離心的上清（一定不要吸取到中間白色層，第3步離心結束往外拿的時候，管子盡量不要傾斜）轉移到第4步准備的管中，顛倒混勻
6.13000rpm離心15min，輕輕倒去上清；在吸水紙上盡量沾干液體
7.加600ul 75％乙醇，顛倒數次以洗滌殘存異丙醇
7.13000rpm離心15min，輕輕倒去上清；在吸水紙上盡量沾干液體
8.4000rpm離心10sec，將管壁殘存液體甩到底部，用微量槍頭吸干，室溫乾燥2－3min（不可過分乾燥，防止下一步RNA不溶解）
9.加入20ul DEPE水(加入depc的純水高壓後的水即為DEPE水)，輕輕混勻溶解RNA。2000rpm離心5sec，冰上保存備用（最好2小時內使用，以免RNA降解）
二、用TRIzol LS提取
應用TRIzol LS提取病毒RNA
所提取物為血清、血液、細胞培養液、雞胚尿囊液等液體中的病毒。提取時盡量在人少時進行，防止空氣中RNA酶的污染。所用一切物品也應是無RNA酶的。
1.1 在1.5ml的eppendorf管中加入病毒原液500ul，再加入TRIzol LS 500ul，充分混勻，室溫放置10min。
1.2 加入200ul的氯仿，蓋緊離心管蓋，用力震盪離心管（溶液充分乳化，成乳白狀，無分相現象），室溫放置10min （由於氯仿沸點低、易揮發，振盪時離心管可能爆開，小心）。
1.3 離心 4℃、13000r/min、15min，取上層液相移入另一管（切忌吸動白色中間相）。
1.4 加入等體積異丙醇，輕輕顛倒離心管充分混勻液體，室溫放置10min。
1.5 離心 4℃、13000r/min、15min，（這時乍一看會發現管子里好像沒有東西，再仔細看看，會發現靠近管底的壁上有一星點的白色沉澱物，就是它了）用槍小心吸去所有上清。
1.6 1ml75%乙醇洗一遍，離心 4℃、8000r/min、10min，（這時又會發現管子沒東西了，不要擔心，有的，但是因為量太少看不見罷了）用槍小心吸去所有上清，在超凈台中乾燥5min。
1.7 加入適量DEPC處理水。（如果材料來源豐富的話，加入的水量為下一步RT的total減去其他試劑的量；若要省著點用，則自己看著辦了，盡量不要加太多的水）。
1.8 建議立即做RT。若要保存，可在上一步加入乙醇後凍存於－70℃，可保存一年；若加入DEPC水後則只能在－20℃保存1個月左右。
三、Trizol法提禽流感病毒protocol
Trizol法適用於人類、動物、植物、微生物的組織或培養細菌，樣品量從幾十毫克至幾克。
1、 取雞胚尿囊液，加入5-10倍體積 Trizol液，混勻；
2、 室溫放置5分鍾，然後以每1ml Trizol液加入0.2ml的比例加入氯仿，蓋緊離心管，用手劇烈搖盪離心管15秒；
3、 取上層水相於一新的離心管，按每ml Trizol液加0.5ml異丙醇的比例加入異丙醇，室溫放置10分鍾，12000g離心10分鍾；
4、 棄去上清液，按每ml Trizol液加入至少1ml的比例加入75%乙醇，混勻，4℃下7500g離心5分鍾；
5、 重復第4步；
6、 小心棄去上清液，然後室溫乾燥5-10分鍾，注意不要乾燥過分，否則會降低RNA的溶解度；
7、 然後將RNA溶於水中，放置10分鍾。
[注意]
1、 整個操作要帶口罩及一次性手套，並盡可能在低溫下操作。
2、 加氯仿前的勻漿液可在-70℃保存一個月以上，RNA沉澱在70%乙醇中可在4℃保存一周，-20℃保存一年
真核生物的基因組是DNA，為什麼不直接從DNA PCR得到我們需要的基因呢？因為真核生物的基因含有大量的非編碼區，稱為內元（intron），真正編碼蛋白的區段是被這些內元隔開的，這些編碼區叫做外元（exon）。真核生物的DNA轉錄成為RNA之後，經過剪切和拼接，去掉這些非編碼區，才形成成熟的mRNA，由mRNA再翻譯成蛋白質。
所以，如果直接從真核生物的基因組DNA獲取目的基因，克隆再表達，試圖獲取目的蛋白的思路是行不通的，因為獲取的DNA裡面會含有非編碼區。要表達真核生物的基因並表達出相應的蛋白，只能通過提取其mRNA並RT-PCR這條頗費周折的途徑。
1．RNA的提取
RNA的提取其實原理很簡單：通過變性劑破碎細胞或者組織，然後經過氯仿等有機溶劑抽提RNA，再經過沉澱，洗滌，晾乾，最後溶解。但是由於RNA酶無處不在，隨時可能將RNA降解，所以實驗中有很多地方需要注意，稍有疏忽就會前功盡棄。
1．1 分離高質量RNA
成功的cDNA合成來自高質量的RNA。高質量的RNA至少應保證全長並且不含逆轉錄酶的抑制劑，如EDTA或SDS。RNA的質量決定了你能夠轉錄到cDNA上的序列信息量的最大值。一般的RNA純化方法是使用異硫氰酸胍／酸性酚的一步法。
一般不必使用oligo(dT)選擇性分離poly(A)+RNA。不管起始模板是總RNA還是poly(A)+ RNA，都可以檢測到擴增結果。另外，分離poly(A)+RNA會導致樣品間mRNA豐度的波動變化，從而使信息的檢出和定量產生偏差。然而，當分析稀有mRNA時，poly(A)+RNA會增加檢測的靈敏度。
1．2 RNA提取的最大影響因素-RNA酶
在所有RNA實驗中，最關鍵的因素是分離得到全長的RNA。而實驗失敗的主要原因是核糖核酸酶（RNA酶）的污染。由於RNA酶廣泛存在而穩定，可耐受多種處理而不被滅活，如煮沸、高壓滅菌等，RNA酶催化的反應一般不需要輔助因子。因而RNA制劑中只要存在少量的RNA酶就會引起RNA在制備與分析過程中的降解，而所制備的RNA的純度和完整性又可直接影響RNA分析的結果，所以RNA的制備與分析操作難度極大。
在實驗中，一方面要嚴格控制外源性RNA酶的污染；另一方面要最大限度地抑制內源性的RNA酶。外源性的RNA酶存在於操作人員的手汗、唾液等，也可存在於灰塵中。在其它分子生物學實驗中使用的RNA酶也會造成污染。這些外源性的RNA酶可污染器械、玻璃製品、塑料製品、電泳槽、研究人員的手及各種試劑。而各種組織和細胞中則含有大量內源性的RNA酶。
1．3 常用的RNA酶抑制劑
*焦碳酸二乙酯（DEPC）：是一種強烈但不徹底的RNA酶抑制劑。它通過和RNA酶的活性基團組氨酸的咪唑環結合使蛋白質變性，從而抑制酶的活性。
*異硫氰酸胍：目前被認為是最有效的RNA酶抑制劑，它在裂解組織的同時也使RNA酶失活。它既可破壞細胞結構使核酸從核蛋白中解離出來，又對RNA酶有強烈的變性作用。
*氧釩核糖核苷復合物：由氧化釩離子和核苷形成的復合物，它和RNA酶結合形成過渡態類物質，幾乎能完全抑制RNA酶的活性。
*RNA酶的蛋白抑制劑（RNasin）：從大鼠肝或人胎盤中提取得來的酸性糖蛋白。RNasin是RNA酶的一種非競爭性抑制劑，可以和多種RNA酶結合，使其失活。
*其它：SDS、尿素、硅藻土等對RNA酶也有一定抑製作用。
1．4 防止RNA酶污染的措施、RNA提取之前需要注意和准備的工作
*盡可能在實驗室專門辟出RNA操作區，離心機、移液器、試劑等均應專用。RNA操作區應保持清潔，並定期進行除菌。
*操作過程中應始終戴一次性橡膠手套和口罩，並經常更換，以防止手、臂上的細菌和真菌以及人體自身分泌的RNase帶入各種容器內或污染用具。盡量避免使用一次性塑料手套。塑料手套不僅常常給操作帶來不便，而且塑料手套的多出部分常常將器具有RNase處傳遞到RNase-free處，擴大污染。
*盡量使用一次性的塑料製品，避免共用器具如濾紙、tips、tubes等，以防交叉污染。例如，從事RNA探針工作的研究者經常使用RNase H、T1等，在操作過程中極有可能造成移液器、離心機等的污染。而這些污染了的器具是RNA操作的大敵。
*關於一次性塑料製品，建議使用廠家供應的出廠前已經滅菌的tips和tubes等。多數廠家供應的無菌塑料製品很少有RNase污染，買來後可直接用於RNA操作。用DEPC等處理的塑料製品，往往由於二次污染而帶有RNase，從而導致實驗失敗。
*所有的玻璃器皿均應在使用前於180℃的高溫下干烤6hr或更長時間。
*無法用DEPC處理的用具可用氯仿擦拭若干次，這樣通常可以消除RNase的活性。
*配製溶液用的乙醇、異丙醇、Tris等應採用未開封的新瓶裝試劑。
*塑料器皿可用0.1% DEPC水浸泡或用氯仿沖洗（注意：有機玻璃器具因可被氯仿腐蝕，故不能使用）。
*有機玻璃的電泳槽等，可先用去污劑洗滌，雙蒸水沖洗，乙醇乾燥，再浸泡在3% H2O2 室溫10min，然後用0.1% DEPC水沖洗，晾乾。
*配製的溶液應盡可能的用0.1% DEPC，在37℃處理12hr以上。然後用高壓滅菌除去殘留的DEPC。不能高壓滅菌的試劑，應當用DEPC處理過的無菌雙蒸水配製，然後經0.22μm濾膜過濾除菌。
1．5 RNA提取的一般步驟
RNA提取的一般步驟是：破碎組織→分離RNA→沉澱RNA→洗滌RNA→融解RNA→保存RNA
破碎組織和滅活RNA酶可以同步進行，可以用鹽酸胍、硫氰酸胍、NP-40、SDS、蛋白酶K等破碎組織，加入β-ME可以抑制RNA酶活性。
分離RNA一半用酚、氯仿等有機溶劑，加入少量異戊醇，經過此步，離心，RNA一般分布於上層，與蛋白層分開。
沉澱RNA一般用乙醇、3M NaAc（pH-5.2）或異丙醇。
洗滌RNA使用70％乙醇洗滌，有時，為避免RNA被洗掉，此步可以省掉，洗滌之後可以晾乾或者烤乾乙醇，但是不能過於乾燥，否則不易溶解。
融解RNA一般使用TE。
保存RNA應該盡量低溫。為了防止痕量RNase的污染，從富含RNase的樣品（如胰臟、肝臟）中分離到的RNA需要貯存在甲醛中以保存高質量的RNA，對於長期貯存更是如此。從大鼠肝臟中提取的RNA，在水中貯存一個星期就基本降解了，而從大鼠脾臟中提取的RNA，在水中保存3年仍保持穩定。另外，長度大於4kb的轉錄本對於痕量RNase的降解比小轉錄本更敏感。為了增加貯存RNA樣品的穩定性，可以將RNA溶解在去離子的甲醯胺中，存於-70℃。用於保存RNA的甲醯胺一定不能含有降解RNA的雜物。來源於胰臟的RNA至少可以在甲醯胺中保存一年。當准備使用RNA時，可以使用下列方法沉澱RNA：加入NaAc至0.3M，12,000×g離心5分鍾。
1．6RNA抽提新方法-TRIZOL法
TRIZOL試劑是直接從細胞或組織中提取總RNA的試劑。它在破碎和溶解細胞時能保持RNA的完整性。加入氯仿後離心，樣品分成水樣層和有機層。RNA存在於水樣層中。收集上面的的水樣層後，RNA可以通過異丙醇沉澱來還原。在除去水樣層後，樣品中的DNA和蛋白也能相繼以沉澱的方式還原。乙醇沉澱能析出中間層的DNA，在有機層中加入異丙醇能沉澱出蛋白。共純化DNA對於樣品間標准化RNA的產量十分有用。
TRIZOL是有毒物，接觸皮膚或者不慎吞服，會導致灼傷，一旦接觸皮膚後立即以大量的洗滌劑和清水清洗。TRIZOL在室溫下能穩定保存12個月。盡管如此，為達到最佳效果，建議保存在2-8°C的環境下。
2．RT-PCR
RT-PCR是指將逆轉錄(Reverse Transcription；RT)反應和PCR (Polymerase Chain Reaction)反應組合在一起的方法。
2．1 RT-PCR的原理
RT-PCR將以RNA為模板的cDNA合成同PCR結合在一起，提供了一種分析基因表達的快速靈敏的方法。RT-PCR用於對表達信息進行檢測或定量。另外，這項技術還可以用來檢測基因表達差異或不必構建cDNA文庫克隆cDNA。RT-PCR比其他包括Northern印跡、RNase保護分析、原位雜交及S1核酸酶分析在內的RNA分析技術，更靈敏，更易於操作。
RT-PCR的模板可以為總RNA或poly(A)+選擇性RNA。逆轉錄反應可以使用逆轉錄酶，以隨機引物、oligo(dT)或基因特異性的引物（GSP）起始。RT-PCR可以一步法或兩步法的形式進行。在兩步法RT-PCR中，每一步都在最佳條件下進行。cDNA的合成首先在逆轉錄緩沖液中進行，然後取出1/10的反應產物進行PCR。在一步法RT-PCR中，逆轉錄和PCR在同時為逆轉錄和PCR優化的條件下，在一隻管中順次進行。
2．2 RT-PCR的步驟
⑴在冰浴離心管裡面加入模板RNA 4uL，引物2uL，去離子水5uL，混勻，離心3-5秒；
⑵70度水浴5分鍾，冰浴30秒（此處是為了使引物和模板正確配對）；
⑶加入5×反應液4uL，RNase抑制劑1uL，dNTP 2uL（這些應該先配好，然後分再裝到每一管），混勻；
⑷37度水浴5分鍾，加入1uL AMV-RT反轉錄酶，混勻；
⑸37度水浴1小時（此步是反轉錄過程）；
⑹70度10分鍾結束反應（此處是滅活酶活性，避免對後續實驗產生干擾），產物置冰上進行下一步PCR實驗，餘下的-70度保存。
2．3 RT-PCR的引物設計
RT-PCR引物設計和一般PCR引物設計可以遵循同樣的原則。細心地進行引物設計是PCR中最重要的一步。理想的引物對只同目的序列兩側的單一序列而非其他序列退火。設計糟糕的引物可能會同擴增其他的非目的序列。設計理想的引物都有以下共同的特點，而設計失敗的引物則各有各的缺點：
* 典型的引物18到24個核苷長。引物需要足夠長，保證序列獨特性，並降低序列存在於非目的序列位點的可能性。但是長度大於24核苷的引物並不意味著更高的特異性。較長的序列可能會與錯誤配對序列雜交，降低了特異性，而且比短序列雜交慢，從而降低了產量。
* 選擇GC含量為40％到60％或GC含量反映模板GC含量的引物。
* 設計5'端和中間區為G或C的引物。這會增加引物的穩定性和引物同目的序列雜交的穩定性。
* 避免引物對3'末端存在互補序列，這會形成引物二聚體，抑制擴增。
* 避免3'末端富含GC。設計引物時保證在最後5個核苷中含有3個A或T。
* 避免3'末端的錯誤配對。3'端核苷需要同模板退火以供聚合酶催化延伸。
* 避免存在可能會產生內部二級結構的序列，這會破壞引物退火穩定性。
目的序列上並不存在的附加序列，如限制位點和啟動子序列，可以加入到引物5'端而不影響特異性。當計算引物Tm值時並不包括這些序列，但是應該對其進行互補性和內部二級結構的檢測。
引物的穩定性依賴於儲存條件。應將乾粉和溶解的引物儲存在-20℃。以大於10μM濃度溶於TE的引物在-20℃可以穩定保存6個月，但在室溫（15℃到30℃）僅能保存不到1周。乾粉引物可以在-20℃保存至少1年，在室溫（15℃到30℃）最多可以保存2個月。
2．4 引物退火溫度
引物的另一個重要參數是熔解溫度（Tm）。這是當50％的引物和互補序列表現為雙鏈DNA分子時的溫度。Tm對於設定PCR退火溫度是必需的。在理想狀態下，退火溫度足夠低，以保證引物同目的序列有效退火，同時還要足夠高，以減少非特異性結合。合理的退火溫度從55℃到70℃。退火溫度一般設定比引物的Tm低5℃。
根據所使用的公式及引物序列的不同，Tm會差異很大。因為大部分公式提供一個估算的Tm值，所有退火溫度只是一個起始點。可以通過分析幾個逐步提高退火溫度的反應以提高特異性。開始低於估算的Tm 5℃，以2℃為增量，逐步提高退火溫度。較高的退火溫度會減少引物二聚體和非特異性產物的形成。為獲得最佳結果，兩個引物應具有近似的Tm值。引物對的Tm差異如果超過5℃，就會由於在循環中使用較低的退火溫度而表現出明顯的錯誤起始。如果兩個引物Tm不同，將退火溫度設定為比最低的Tm低5℃。或者為了提高特異性，可以在根據較高Tm設計的退火溫度先進行5個循環，然後再根據較低Tm設計的退火溫度進行剩餘的循環。這使得在較為嚴謹的條件下可以獲得目的模板的部分拷貝。
2．5 提高逆轉錄保溫溫度
較高的保溫溫度有助於RNA二級結構的打開，增加了反應的產量。對於多數RNA模板，在沒有緩沖液或鹽的條件下，將RNA和引物在65℃保溫，然後迅速置於冰上冷卻，可以消除大多數二級結構，從而使引物可以結合。然而某些模板仍然會存在二級結構，即使熱變性後也是如此。較高的保溫溫度也可以增加特異性，尤其是當使用基因特異性引物（GSP）進行cDNA合成時。如果使用GSP，確保引物的Tm值與預計的保溫溫度相同。不要在高於60℃時使用oligo(dT)和隨機引物。隨機引物需要在增加到60℃前在25℃保溫10分鍾。除了使用較高的逆轉錄溫度外，還可以通過直接將RNA/引物混合物從65℃變性溫度轉到逆轉錄保溫溫度，並加入預熱的2×的反應混合物提高特異性（cDNA熱啟動合成）。這種方法有助於防止較低溫度時所發生的分子間鹼基配對。使用PCR儀可以簡化RT-PCR所需的多種溫度切換。
2．6 促進逆轉錄的添加劑
包括甘油和DMSO在內的添加劑加到第一鏈合成反應中，可以減低核酸雙鏈的穩定並解開RNA二級結構，最多可以加入20％的甘油或10％的DMSO而不影響或MMLV的活性。AMV也可以耐受最多20％的甘油而不降低活性。為了在逆轉錄反應中最大限度提高RT-PCR的靈敏度，可以加入10％的甘油並在45℃保溫。如果1/10的逆轉錄反應產物加入到PCR中，那甘油在擴增反應中的濃度為0.4％，這不足以抑制PCR。
在逆轉錄反應中經常加入RNase抑制劑以增加cDNA合成的長度和產量。RNase抑制劑要在第一鏈合成反應中，在緩沖液和還原劑（如DTT）存在的條件下加入，因為cDNA合成前的過程會使抑制劑變性，從而釋放結合的可以降解RNA的RNase。蛋白RNase抑制劑僅防止RNase A，B，C對RNA的降解，並不能防止皮膚上的RNase，因此盡管使用了這些抑制劑，也要小心不要從手指上引入RNase。
使用無RNaseH活性（RNaseH-）的逆轉錄酶：逆轉錄酶催化RNA轉化成cDNA，不管是M-MLV還是AMV，在本身的聚合酶活性之外，都具有內源RNaseH活性。RNaseH活性同聚合酶活性相互競爭RNA模板與DNA引物或cDNA延伸鏈間形成的雜合鏈，並降解RNA：DNA復合物中的RNA鏈。被RNaseH活性所降解的RNA模板不能再作為合成cDNA的有效底物，降低了cDNA合成的產量和長度。因此消除或大大降低逆轉錄酶的RNaseH活性將會大有裨益。RNaseH-的MMLV逆轉錄酶及RNaseH-的AMV，比MMLV和AMV能得到更多量和更多全長。RT-PCR靈敏度會受cDNA合成量的影響。RT-PCR產物的大小受限於逆轉錄酶合成cDNA的能力，尤其是克隆較大的cDNA時。RNaseH-的逆轉錄酶可以顯著提高長RT-PCR產物的產量，同時增加了熱穩定性，所以反應可以在高於正常的37-42℃的溫度下進行。
2．7 RNaseH處理
在PCR之前使用RNaseH處理cDNA合成反應可以提高靈敏度。對於某些模板，據認為cDNA合成反應中的RNA會阻止擴增產物的結合，在這種情況下，RNaseH處理可以增加靈敏度。一般當擴增較長的全長cDNA目標模板時，RNaseH處理是必需的，比如低拷貝的。對這種困難模板，RNaseH的處理加強了或AMV合成的cDNA所產生的信號。對於多數RT-PCR反應，RNaseH處理是可選的，因為95℃保溫的PCR變性步驟一般會將RNA：DNA復合物中的RNA水解掉。
2．8 小量RNA檢測方法的提高
當僅有小量RNA時，RT-PCR尤其具有挑戰性。在RNA分離過程中加入的作為載體的糖元有助於增加小量樣品的產量。可以在加入Trizol的同時加入無RNase的糖元。糖元是水溶性的，可以同RNA保持在水相中以輔助隨後的沉澱。對於小於50mg的組織或106個培養細胞的樣品，無RNase糖元的建議濃度為250μg/ml。
2．9 一步法同兩步法RT-PCR的比較
兩步法RT-PCR比較常見，在使用一個樣品檢測多個mRNA時比較有用。然而一步法RT-PCR具有其他優點。一步法RT-PCR在處理大量樣品時易於操作，有助於減少殘余污染，因為在cDNA合成和擴增之間不需要打開管蓋。一步法可以得到更高的靈敏度，最低可以達到0.1pg總RNA，這是因為整個cDNA樣品都被擴增。對於成功的一步法RT-PCR，一般使用反義的基因特異性引物起始cDNA合成。
2．10 增加RT-PCR特異性
第一鏈cDNA合成的起始可以使用三種不同的方法，各種方法的相對特異性影響了所合成cDNA的量和種類。
隨機引物法是三種方法中特異性最低的。引物在整個轉錄本的多個位點退火，產生短的，部分長度的cDNA。這種方法經常用於獲取5'末端序列及從帶有二級結構區域或帶有逆轉錄酶不能復制的終止位點的RNA模板獲得cDNA。為了獲得最長的cDNA，需要按經驗確定每個RNA樣品中引物與RNA的比例。隨機引物的起始濃度范圍為50到250ng每20μl反應體系。因為使用隨機引物從總RNA合成的cDNA主要是核糖體RNA，所以模板一般選用poly(A)+RNA。
Oligo(dT)起始比隨機引物特異性高。它同大多數真核細胞mRNA 3'端所發現的poly(A)尾雜交。因為poly(A)+RNA大概占總RNA的1%到2％，所以與使用隨機引物相比，cDNA的數量和復雜度要少得多。因為其較高的特異性，oligo(dT)一般不需要對RNA和引物的比例及poly(A)+選擇進行優化。建議每20μl反應體系使用0.5μg oligo(dT)。oligo(dT)12-18適用於多數RT-PCR。ThermoScript RT-PCR System提供了oligo(dT)20，因為其熱穩定性較好，適用於較高的保溫溫度。
基因特異性引物（GSP）對於逆轉錄步驟是特異性最好的引物。GSP是反義寡聚核苷，可以特異性地同RNA目的序列雜交，而不象隨機引物或oligo(dT)那樣同所有RNA退火。用於設計PCR引物的規則同樣適用於逆轉錄反應GSP的設計。GSP可以同與mRNA3'最末端退火的擴增引物序列相同，或GSP可以設計為與反向擴增引物的下游退火。對於部分擴增對象，為了成功進行RT-PCR，需要設計多於一個反義引物，因為目的RNA的二級結構可能會阻止引物結合。建議在20μl的第一鏈合成反應體系中使用1pmol反義GSP。
2．11 提高逆轉錄保溫溫度
為了充分利用GSP特異性的全部優點，應該使用有較高熱穩定性的逆轉錄酶。熱穩定逆轉錄酶可以在較高溫度保溫以增加反應嚴謹性。比如，如果一個GSP退火溫度為55℃，那麼如果使用AMV或M-MLV在低嚴謹性的37℃進行逆轉錄，GSP所帶有的特異性就沒有完全利用。然而某些特別的逆轉錄酶可以在50℃或更高進行反應，這就會消除較低溫度時產生的非特異性產物。為獲得最大的特異性，可以將RNA/引物混合物直接從65℃變性溫度轉移到逆轉錄保溫溫度。這有助於防止低溫時分子間鹼基配對。使用PCR儀可以簡化RT-PCR所需的多種溫度轉換。
2．12 減少基因組DNA污染
RT-PCR所遇到的一個潛在的困難是RNA中沾染的基因組DNA。使用較好的RNA分離方法，如Trizol，會減少RNA制備物中沾染的基因組DNA。為了避免產生於基因組DNA的產物，可以在逆轉錄之前使用擴增級的DNaseⅠ對RNA進行處理以除去沾染的DNA。將樣品在2.0mM EDTA中65℃保溫10分鍾以終止DNaseⅠ消化。EDTA可以螯合鎂離子，防止高溫時所發生的依賴於鎂離子的RNA水解。
為了將擴增的cDNA同沾染的基因組DNA擴增產物分開，可以設計分別同分開的外顯子退火的引物。來源於cDNA的PCR產物會比來源於沾染的基因組DNA的產物短。另外對每個RNA模板進行一個無逆轉錄的對照實驗，以確定一個給定片段是來自基因組DNA還是cDNA。在無逆轉錄時所得到的PCR產物來源於基因組。
⑷ 求有關酸雨的PPT、資料……
酸雨 （acid rain）是指PH值小於5.65的降水。
編輯本段酸雨相關名詞
什麼是酸雨？
被大氣中存在的酸性氣體污染，pH值小於5.65的降水叫酸雨。什麼是酸？ 純水是中性的，沒有味道；檸檬水，橙汁有酸味，醋的酸味較大，它們都是弱酸；小蘇打游叢頃水有略澀的鹼性，而苛性鈉水就澀澀的，鹼味較大，苛性鈉是鹼，小蘇打雖顯鹼性但屬於鹽類。科學家發現酸味大小與水溶液中氫離子濃度有關；而鹼味與水溶液中羥基離子濃度有關；然後建立了一個指標：氫離子濃度對數的負值，叫pH值。於是，純水（蒸餾水）的pH值為7；酸性越大，pH值越低；鹼性越大，pH值越高。（PH值一般為0-14之間)未被污染的雨雪是中性的，pH值近於7；當它為大氣中二氧化碳飽和時，略呈酸性（水和二氧化碳結合為碳酸），pH值為5.65。pH值小於5.65的雨叫酸雨；pH值小於5.65的雪叫酸雪；在高空或高山(如峨眉山)上彌漫的霧，pH值小於5.65時叫酸霧。
檢驗水的酸鹼度一般可以用幾個工具：石蕊試液＼酚酞試液＼PH試紙（精確率高，能檢驗PH值）\PH計（能測出更精確的PH值）。
什麼是酸雨率？
一年之內可降若干次雨， 有的是酸雨， 有的不是酸雨， 因此一般稱某地區的酸雨率為該地區酸雨次數除以降雨的總次數。其最低值為0%； 最高值為100%。如果有降雪， 當以降雨視之。
有時， 一個降雨過程可能持續幾天， 所以酸雨率應以一個降水全過程為單位， 即酸雨率為一年出現酸雨的降水過程次數除以全年降水過程的總次數。
除了年均降水pH值之外， 酸雨率是判別某地區是否為酸雨區的又一重要指標。
什麼是酸雨區？
某地收集到酸雨樣品， 還不能算是酸雨區， 因為一年可有數十場雨， 某場雨可能是酸雨， 某場雨可能不是酸雨， 所以要看年均值。目前我國定義酸雨區的科學標准尚在討論之中， 但一般認為： 年均降水pH值高於5.65， 酸雨率是0-20%，為非酸雨區；pH值在5.30--5.60之間， 酸雨率是10--40% ， 為輕酸雨區； pH值在5.00--5.30之間， 酸雨率是30-60%，為中度酸雨區；pH值在4.70--5.00之間，酸雨率是50-80%，為較重酸雨區；pH值小於4.70， 酸雨率是70-100%，為重酸雨區。這就是所謂的五級標准。其實，北京、西寧、蘭州和烏魯木齊等市也收集到幾場酸雨，但年均pH值和酸雨率都在非酸雨區標准內，神陸故為非酸雨區。
我國三大酸雨區包括(我國酸雨主要是：硫酸型）
1。西南酸雨區：是僅次於華中酸雨區的降水污染嚴重區域。
2。華中酸雨區：目前它已成為全國酸雨污染范圍最大，中心強度最高的酸雨污染區。
3。華東沿海酸雨區：它的污染強度低於華中、西南酸雨區。
編輯本段酸雨的發現
近代工業革命，從蒸汽機開始，鍋爐燒煤，產生蒸汽，推動機器；而後火力電廠星羅齊布，燃煤數量日益猛增。遺憾地是，煤含雜質硫，約百分之一，在燃燒中將排放酸性氣體 SO2；燃燒產生的高溫尚能促使助燃的空氣發生部分化學變化，氧氣與氮氣化合，也排放酸性氣體NOx。它們在高空中為雨雪沖刷，溶解，雨成為了酸雨；這些酸性氣體成為雨水中雜質硫酸根、硝酸根和銨離子。1872年英國科學家史密斯分析了倫頓市雨水成份，發現它呈酸性，且農村雨水中含碳酸銨，酸性不大；郊區雨水含硫酸銨，略鄭祥呈酸性；市區雨水含硫酸或酸性的硫酸鹽，呈酸性。於是史密斯首先在他的著作《空氣和降雨：化學氣候學的開端》中提出「酸雨」這一專有名詞。
編輯本段酸雨的成因
酸雨的成因是一種復雜的大氣化學和大氣物理的現象。酸雨中含有多種無機酸和有機酸，絕大部分是硫酸和硝酸。工業生產、民用生活燃燒煤炭排放出來的二氧化硫，燃燒石油以及汽車尾氣排放出來的氮氧化物，經過「雲內成雨過程」，即水汽凝結在硫酸根、硝酸根等凝結核上，發生液相氧化反應，形成硫酸雨滴和硝酸雨滴；又經過「雲下沖刷過程」，即含酸雨滴在下降過程中不斷合並吸附、沖刷其他含酸雨滴和含酸氣體，形成較大雨滴，最後降落在地面上，形成了酸雨。我國的酸雨是硫酸型酸雨。
酸雨多成於化石燃料的燃燒：
⑴S→H2SO4 S+O2（點燃）→SO2
SO2+H2O→H2SO3（亞硫酸）
2H2SO3+O2→2H2SO4（硫酸）
總的化學反應方程式：
S+O2（點燃）＝SO2 2SO2+2H2O+O2＝2H2SO4
⑵氮的氧化物溶於水形成酸：
a.NO→HNO3（硝酸）
2NO+O2＝2NO2 3NO2+H2O=2HNO3+NO
總的化學反應方程式：
4NO+2H2O+3O2＝4HNO3
b.NO2→HNO3
總的化學反應方程式：
4NO2+2H2O+O2→4HNO3
（*註：元素後的數字為腳標，化學式前的數為化學計量數。）
編輯本段酸雨形成的影響因素
1.酸性污染物的排放及轉換條件
一般說來，某地SO2污染越嚴重，降水中硫酸根離子濃度就越高，導致ph值越低。
2. 大氣中的氨
大氣中的氨（NH3）對酸雨形成是非常重要的。氨是大氣中唯一的常見氣態鹼。由於它的水溶性，能與酸性氣溶膠或雨水中的酸反應，起中和作用而降低 酸度。大氣中氨的來源主要是有機物的分解和農田施用的氮肥的揮發。土壤的氨的揮發量隨著土壤pH值的上升而增大。京津地區土壤pH值為7~8以上，而重 慶、貴陽地區則一般為5~6，這是大氣氨水平北高南低的重要原因之一。土壤偏酸性的地方，風沙揚塵的緩沖能力低。這兩個因素合在一起，至少在目前可以解釋 我國酸雨多發生在南方的分布狀況。
3. 顆粒物酸度及其緩沖能力
大氣中的污染物除酸性氣體SO2和NO2外，還有一個重要成員——顆粒物。顆粒物的來源很復雜。主要有煤塵和風沙揚塵。後者在北方約佔一半，在南 方估計約佔三分之一。顆粒物對酸雨的形成有兩方面的作用，一是所含的催化金屬促使SO2氧化成酸；二是對酸起中和作用。但如果顆粒物本身是酸性的，就不能 起中和作用，而且還會成為酸的來源之一。目前我國大氣顆粒物濃度水平普遍很高，為國外的幾倍到十幾倍，在酸雨研究中自然是不能忽視的。
4.天氣形勢的影響
如果氣象條件和地形有利於污染物的擴散，則大氣中污染物濃度降低，酸雨就減弱，反之則加重（如逆溫現象）。
編輯本段酸雨的危害
硫和氮是營養元素。弱酸性降水可溶解地面中礦物質，供植物吸收。如酸度過高，pH值降到5.6以下時，就會產生嚴重危害。它可以直接使大片森林死亡，農作物枯萎；也會抑制土壤中有機物的分解和氮的固定，淋洗與土壤離子結合的鈣、鎂、鉀等營養元素，使土壤貧瘠化；還可使湖泊、河流酸化，並溶解土壤和水體底泥中的重金屬進入水中，毒害魚類；加速建築物和文物古跡的腐蝕和風化過程；可能危及人體健康。
酸性雨水的影響在歐洲和美國東北部最明顯，而且被大力宣傳，但受威脅的地區還包括加拿大，也許還有加利福尼亞州塞拉地區、洛基山脈和中國。在某些地方，偶爾觀察到降下的雨水像醋那樣酸。酸雨影響的程度是一個爭論不休的主題。對湖泊和河流中水生物的危害是最初人們注意力的焦點，但現在已認識到，對建築物、橋梁和設備的危害是酸雨的另一些代價高昂的後果。污染空氣對人體健康的影響是最難以定量確定的。
受到最大危害的是那些緩沖能力很差的湖泊。當有天然鹼性緩沖劑存在時，酸雨中的酸性化合物(主要是硫酸、硝酸和少量有機酸)就會被中和。然而，處於花崗岩(酸性)地層上的湖泊容易受到直接危害，因為雨水中的酸能溶解鋁和錳這些金屬離子。這能引起植物和藻類生長量的減少，而且在某些湖泊中，還會引起魚類種群的衰敗或消失。由這種污染形式引起的對植物的危害范圍，包括從對葉片的有害影響直到細根系的破壞。
在美國東北部地區，減少污染物的主要考慮對象是那些燃燒高含硫量的煤發電廠。能防止污染物排放的化學洗氣器是可能的補救辦法之一。化學洗氣器是一種用來處理廢氣、或溶解、或沉澱、或消除污染物的設備。催化劑能使固定源和移動源的氮氧化物排放量減少，又是化學在改善空氣質量方面能起作用的另一個實例。
編輯本段酸雨的治理措施
控制酸雨的根本措施是減少二氧化硫和氮氧化物的排放。
治理措施
世界上酸雨最嚴重的歐洲和北美許多國家在遭受多年的酸雨危害之後，終於都認識到，大氣無國界，防治酸雨是一個國際性的環境問題，不能依靠一個國家單獨解決，必須共同採取對策，減少硫氧化物和氮氧化物的排放量。經過多次協商，1979年11月在日內瓦舉行的聯合國歐洲經濟委員會的環境部長會議上，通過了《控制長距離越境空氣污染公約》，並於1983年生效。《公約》規定，到1993年底，締約國必須把二氧化硫排放量削減為1980年排放量的70％。歐洲和北美(包括美國和加拿大)等32個國家都在公約上簽了字。為了實現許諾，多數國家都已經採取了積極的對策，制訂了減少致酸物排放量的法規。例如，美國的《酸雨法》規定，密西西比河以東地區，二氧化硫排放量要由1983年的2000萬噸／年，經過10年減少到1000萬噸／年；加拿大二氧化硫排放量由1983年的470萬噸／年，到1994年減少到230萬噸／年，等等。目前世界上減少二 氧化硫排放量的主要措施有：
1、原煤脫硫技術，可以除去燃煤中大約40％一60％的無機硫。
2、優先使用低硫燃料，如含硫較低的低硫煤和天然氣等。
3、改進燃煤技術，減少燃煤過程中二氧化硫和氮氧化物的排放量。例如，液態化燃煤技術是受到各國歡迎的新技術之一。它主要是利用加進石灰石和白雲石，與二氧化硫發生反應，生成硫酸鈣隨灰渣排出。
4、對煤燃燒後形成的煙氣在排放到大氣中之前進行煙氣脫硫。目前主要用石灰法，可以除去煙氣中85％一90％的二氧化硫氣體。不過，脫硫效果雖好但十分費錢。例如，在火力發電廠安裝煙氣脫硫裝置的費用，要達電廠總投資的25％之多。這也是治理酸雨的主要困難之一。
5.開發新能源，如太陽能，風能，核能，可燃冰等，但是目前技術不夠成熟，如果使用會造成新污染，且消耗費用十分高.
酸雨是大氣受污染的一種表現，因最早引起注意的是酸性的降雨，所以習慣上統稱為酸雨。
純凈的雨雪在降落時，空氣中的二氧化碳會溶入其中形成碳酸，因而具有一定的弱酸性。空氣中的二氧化碳濃度一般約在316ppm左右，這時降水的pH值可達5.6。這是正常的現象，不是我們通常所說的酸雨。
我們所講的酸雨是指由於人類活動的影響，使得pH值降低至5.6以下的酸性降水。隨著近現代工業化的發展，這樣的降水開始出現，並且逐年增多。它已經開始影響到人類賴以生存的環境，以及人類自己了。
古代的雨雪酸度沒有記載，對大約180年前的格陵蘭島積冰的測定表明，那時降雪的pH值為6～7.6之間。
二十世紀50年代以前，世界上降水的pH值一般都大於5，少數工業區曾降酸雨。從60年代開始，隨著工業的發展和礦物燃料消耗的增多，世界上一些工業發達地區(如北歐南部和北美東部)降水的pH值降到5以下，而且范圍不斷擴大，生態系統受到了明顯的傷害。
1872年英國化學家史密斯在其《空氣和降雨：化學氣候學的開端》一書中首先使用了「酸雨」這一術語，指出降水的化學性質受到燃煤和有機物分解等因素的影響，也指出酸雨對植物和材料是有害的。
二十世紀50年代中期，美國水生生態學家戈勒姆進行了一系列研究工作，揭示了降水的酸度同湖水和土壤酸度之間的關系，並指出降水酸度是礦物燃料燃燒和金屬冶煉排出的二氧化硫造成的。但是，他們的工作都沒有引起人們的注意。
二十世紀60年代間，瑞典土壤學家奧登首先對湖沼學、農學和大氣化學的有關記錄進行了綜合性研究，發現酸性降水是歐洲的一種大范圍現象，降水和地面水的酸度正在不斷升高，含硫和含氮的污染物在歐洲可以遷移上千公里。
1972年瑞典政府向聯合國人類環境會議提出一份報告：《穿越國界的大氣污染：大氣和降水中的磕對環境的影響》。從此更多的國家關注酸雨這一問題，研究的規模也在不斷擴大。
1975年5月，在美國俄亥俄州立大學舉行了第一次國際酸性降水和森林生態系統討論會。1982年6月在瑞典斯德哥爾摩召開了國際環境酸化會議，酸雨已成為當前全球性環境污染的主要問題之一。
酸雨的形成是一種復雜的大氣化學和大氣物理現象。酸雨中含有多種無機酸和有機酸，絕大部分是硫酸和硝酸，以硫酸為主。硫酸和硝酸是由人為排放的二氧化硫和氮氧化物轉化而成的，可以是當地排放的，也可以是從遠處遷移來的。
煤和石油燃燒以及金屬冶煉等工業活動會釋放二氧化硫到空氣中，通過氣相或液相氧化反應生成硫酸。同時高溫燃燒會使空氣中的氮氣和氧氣生成一氧化氮，其在大氣中與氧繼續作用，大部分轉化成為二氧化氮，遇水或水蒸氣就會生成硝酸和亞硝酸。
由於人類活動和自然過程，還有許多氣態或固體物質進入大氣，對酸雨的形成也產生影響。大氣顆粒物中的鐵、銅、鎂等是成酸反應的催化劑。大氣光化學反應生成的臭氧和過氧化氫等又是使二氧化硫氧化的氧化劑；飛灰中的氧化鈣、土壤中的碳酸鈣、天然和人為來源的氨，以及其他鹼性物質又會與酸反應，而使酸中和。
降水的酸度實際上就是降水中的主要陰陽離子的干衡。當大氣中二氧化硫和一氧化氮的濃度較高時，降水中就會表現為酸性；如果降水中代表鹼性物質的幾個主要陽高子濃度也較高時，降水就不會有很高的酸度，甚至可能呈現鹼性。在鹼性土壤地區，或大氣中顆粒物濃度高時，往往出現這種情況。相反，即使大氣中二氧化硫和一氧化氮濃度不高，而鹼性物質相對更少時，則降水仍然會有較高的酸度。工業區的高大煙囪可把二氧化硫擴散到很遠的地方，因而很多山區和荒野地帶也降酸雨。
硫和氮是植物生長不可或缺的營養元素，弱酸性降水可溶解地殼中的礦物質，供動、植物吸收。但如果酸度過高，例如pH值降到5以下，就可能使生態系統遭受損害。
在土壤鹽基飽和度低的地區或土層薄的岩石地區，酸性雨水降落地面後得不到中和，就會使土壤、湖泊、河流酸化。
當湖水或河水的pH值降到5以下時，流域內的土壤和水體底泥中的金屬(例如鋁)就會被溶解進入水中，毒害魚類，使其繁殖和發育受到嚴重影響。水體酸化還會導致水生生物的組成結構發生變化，耐酸的藻類、真菌增多，而有根植物、細菌和無脊椎動物減少，有機物的分解率降低。因此，酸化的湖泊、河流中魚類減少。瑞典和挪威南部以及美國東北部許多湖泊都已成為無魚的死湖。
例如美國東部阿迪朗達克山區，海拔700米以上的湖泊，目前半數以上湖水pH值在5以下，90%已無魚。而在1929～1937年間，只有4%的湖泊的pH值在5以下，或者是無魚的。現在瑞典18000多個大中型湖泊已經酸化，其中約4000個酸化嚴重，水生生物受到很大傷害。
酸雨還會抑制土壤中有機物的分解和氮的固定，淋洗與土壤粒子結合的鈣、鎂、鉀等營養元素，使土壤貧瘠化。
酸雨會傷害植物的新生芽葉，從而影響其發育生長；酸雨腐蝕建築材料、金屬結構、油漆等，古建築、雕塑像也會受到損壞；作為水源的湖泊和地下水酸化後，由於金屬的溶出，就會對飲用者的健康產生有害影響。
控制酸雨的根本措施是減少二氧化硫和一氧化氮的人為排放量。另外瑞典等國試驗在已酸化的土壤和水體中施加鹼性的石灰，在短期內也曾取得較好的效果
怎樣減少酸雨？
酸雨是我們當今面臨的、更為顯著的空氣質量問題之一。酸性物質以及導致形成酸性物質的化合物，是在燃燒礦物燃料來發電和提供運輸時生成的。這些物質主要是從硫氧化物和氮氧化物衍生而成的酸。這些化合物也有一些天然來源，例如雷電、火山、生物物料燃燒和微生物活動，但除了罕見的火山爆發外，這些天然來源同來自汽車、電廠和冶煉廠的排放氣相比，是相當小量的。
用以減少酸雨的各種戰略對策，可能每年需要幾十億美元的投資。由於耗資如此巨大，所以，至關重要的是要很好地了解涉及污染物遷移、化學轉化和歸宿的大氣過程。
酸沉降包括兩部分，即「濕」降水(如雨和雪的形式)和干沉降(氣溶膠或氣態酸性化合物的形式沉降到諸如土壤顆粒、植物葉片等表面上)。以被沉降而告終的物質，往往以一種極其不同的化學形式進入大氣。例如，煤中的硫被氧化成二氧化硫，這是它從煙囪排出的氣態形式。隨著它在大氣中運動，便慢慢被氧化，並與水反應生成硫酸——這是它可能被沉降在下風向數百英里處的形式。
氮氧化物的生成、反應以及最終從大氣中脫除所經歷的路線也是非常復雜的。當氮氣和氧氣在發電廠、在民用爐灶和汽車發動機中的高溫下加熱時，生成一氧化氮(NO)，再與氧化劑反應生成二氧化氮(NO2)，最終生成硝酸(HNO3)。全球氮氧化物衡算——它們來自何方及它們去往何方的定量估計值仍然相當不確定。
可以容易地看到，在我們徹底了解各種不同化學形式的氮、硫和碳的生物地球化學循環以及這些化學物種的全球來源與歸宿之前，將難以滿懷信心地選擇空氣污染控制戰略。大氣化學和環境化學是實現一個更清潔、更有益健康的環境的核心。發展空氣中痕量化學物種的可靠測定方法、重要大氣反應的動力學、和發現可用以減少污染物排放的、新的、更有效的化學工藝，這些就是未來10年中必須受到國家承諾的目標。
編輯本段酸雨的生物防治
世界觀察研究不久前發表的1994年全球趨勢報告《1994年生命特徵》中說：總的來看，地球的情況並不太好，在所有衡量地球健康狀況的指標中，我們僅成功地扭轉了一項指標的惡化—使臭氧層出現空洞的氟里昂的減少。碳排放量沒有減少，大氣污染日益嚴重。據統計，人類每年向大氣層排放SO21.15噸，NO2約5012萬噸。全世界城市人口中有一半左右生活在SO2超標的大氣環境中，有10億人生活在顆粒物超標的環境中。大氣污染已成為隱蔽的殺手。而SO2則是罪魁禍首。最近，歐洲的26個國家和加拿大，在聯合國歐洲經濟委員會提出的一份新協議上簽了字，休證把本國SO2的排放量減少87%，美國也承諾到了2010年將SO2的排放量減少80%。歐洲國家和加拿大稱贊這項新協議是防治大氣污染的一個里程碑。 SO2不僅污染空氣、危害人類健康，而且是形成酸雨的主要物質。大氣中的SO2和NO2，在空氣在氧化劑的作用下溶解於雨水中。當雨水、凍雨、雪和雹等大氣降水的pH小於5.6時，即是酸雨。據美國有關部門測定，酸雨中硫酸佔60%，硝酸佔33%，鹽酸佔6%，其餘是碳酸和少量有機酸。
酸雨給地球生態環境和人類的社會經濟帶來嚴重的影響和破壞，酸雨使土壤酸化，降低土壤肥力，許多有毒物質被值物根系統吸收，毒害根系，殺死根毛，使植物不能從土壤中吸收水分和養分，抑制植物的生長發育。酸雨使河流、湖泊的水體酸化，抑制水生生物的生長和繁殖，甚至導致魚苗窒息死亡；酸雨還殺死水中的浮游生物，減少魚類食物來源，使水生生態系統紊亂；酸雨污染河流湖泊和地下水，直接或間接危害人體健康。酸雨通過對植物表面（葉、莖）的淋洗直接傷害或通過土壤的間接傷害，促使森林衰亡，酸雨還誘使病蟲害暴發，造成森林大片死亡。歐洲每年排出2200萬噸硫，毀滅了大片森林。我國四川、廣西等省區已有10多萬公頃森林瀕臨死亡。酸雨對金屬、石料、木料、水泥等建築材料有很強的腐蝕作用，世界已有許多古建築和石雕藝術品遭酸雨腐蝕破壞，如加拿大的議會大廈、我國的樂山大佛等。酸雨還直接危害電線、鐵軌、橋梁和房屋。
目前，世界上已形成了三大酸雨區，一是以德、法、英等國家為中心，涉及大半個歐洲的北歐酸雨區。二是50年代後期形成的包括美國和加拿大在內的北美酸雨區。這兩個酸雨區的總面積已達1000多萬平方千米，降水的pH小於5.0，有的甚至小於4.0。我國在70年代中期開始形成的覆蓋四川、貴州、廣東、廣西、湖南、湖北、江西、浙江、江蘇和青島等省市部分地區，面積為200萬平方千米的酸雨區是世界第三大酸雨區。我國酸雨區面積雖小，但發展擴大之快，降水酸化速率之高，在世界上是罕見的。由於大氣污染是不分國界的，所以酸雨是全球性的災害。
酸雨的危害已引起世界各國的普遍關注。聯合國多次召開國際會議討論酸雨問題。許多國家把控制酸雨列為重大科研項目。全世界已有40多個國家通過有關污染限制汽車排污。1993年在印度召開的"無害環境生物技術應用國際合作會議"上，專家們提出了利用生物技術預防、阻止和逆轉環境惡化，增強自然資源的持續發展和應用，保持環境完整性和生態平衡的措施。專家們認為：利用生物技術治理環境具有巨大的潛力。煤是當前最重要的能源之一，但煤中含有硫，燃燒時放出SO2等有害氣體。煤中的硫有無機硫和有機硫兩種。無機硫大部分以礦物質的形式存在，其中主要的是黃鐵礦（FeS2）。生物學家利用微生物脫硫，將2價鐵變成3價鐵，把單體硫變成硫酸，取得了很好效果。例如，日本中央電力研究所從土壤中分離出一種硫桿菌，它是一種鐵氧化細菌，能有效地去除煤中的無機硫。美國煤氣研究所篩選出一種新的微生物菌株，它能從煤中分離有機硫而不降低煤的質量。捷克篩選出的一種酸熱硫化桿菌，可脫除黃鐵礦中75%的硫。據1991年統計，捷克利用生物技術已平均脫去煤中無機硫的78.5%，有機硫的23.4%，目前，科學家已發現能脫去黃鐵礦中硫的微生物還有氧化亞鐵硫桿菌和氧化硫桿菌等。日本財團法人電力中央研究所最近開發出的利用微生物膠硫的新技術，可除去70%的無機硫，還可減少60%的粉塵。這種技術原理簡單，設備價廉，特別適合無力購買昂貴脫硫設備的發展中國家使用。生物技術脫硫符合「源頭治理」和「清潔生產」的原則，因而是一種極有發展前途的治理方法，越來越受到世界各國的重視。