『壹』 離子色譜柱能用純水沖洗嗎,這樣是否會影響柱子的性能。
按看說明書或咨詢色譜柱廠商,防止損害色譜柱,離子柱都不便宜,小心為上。
用純水短時間內沖洗色譜柱,通常不會對色譜柱造成較大的損傷,但如果長時間用水沖洗色譜柱則
可能引起固定相流失和相塌陷現象,所以若非必要請盡量避免用純水沖洗色譜柱,建議在水中加入一定
量的甲醇或乙腈進行沖洗,通常水的含量<90%不會對色譜柱造成任何影響。
原因分析:
首先,由於目前所用的色譜柱大多以硅膠為基質,硅膠的溶解特點是在純水中的溶解度比在含有一
定濃度有機溶劑的流動相中要大得多,所以長時間的用純水沖洗會導致固定相的流失,引起柱效下降。
其次,對於常規的 C18 柱而言,由於C18 長鏈與水是不互溶的,C18 長鏈之間的相互作用力大於
C18 與水分子的作用力,長時間的用水沖洗,使得C18 長鏈之間相互靠近,水流的沖刷,導致相互聯結
的C18 長鏈倒伏在硅膠基質的表面,對疏水性物質的保留能力下降,即相塌陷。針對用純水沖洗容易出
現相塌陷的現象,有些廠家推出了純水柱(如我公司的UltimateTM AQ-C18 柱),這種純水柱可以用純
水作流動相而不會產生相塌陷,這對只溶於純水的樣品的分析提供了一個很好的選擇。
第三,如使用過含緩沖鹽的流動相的色譜柱,用純水沖洗,並一定能將緩沖鹽完全洗去。因為,由
於緩沖鹽難溶於有機溶劑,C18 反相柱中用的填料是在硅膠表面上接上許許多多的C18 長鏈,相當於一
個疏水的有機相,而硅膠基體被有機物質包裹著,所以用純緩沖鹽水溶液做流動相時也許緩沖鹽不容易
到達硅膠基質,不至損害基體。但所用的流動相通常會含一部分有機溶劑,而且這些有機溶劑與C18
長鏈是互溶的,因此有機溶劑的加入增強了流動相滲入硅膠基質的能力,能使部分緩沖鹽達到硅膠基質。
同樣的道理,用純水沖洗只能洗掉表面的緩沖鹽,而滲入深處的緩沖鹽則仍然殘留在那裡。所以最好在
水中加入部分有機溶劑進行沖洗,一般的C18 柱通常用含水20%~90%都可以,含水的比例要視分析
時使用的流動相來定,原則上,用於沖洗的流動相中水的比例應該等於或高於(緩沖鹽用後清洗的情況,
推薦使用「等於」)分析時所用流動相中水的比例。
『貳』 液相色譜C18柱堵塞後如何沖洗柱子,能用純水 沖柱子嗎
C18柱子不能用純抄水沖洗,再說本來就堵了,壓力很高應該選擇壓力低的溶劑。
如果你確定是堵塞了,就用純乙腈反沖,先用低一點的流速,比如01ml/min,看壓力情況,不要超過200bar,再慢慢提高流速,但不要超過1.的流速,如果是真的堵了,可能會壓力慢慢降下來的。
如果上面方法不行,那還有可能是鹽析堵的,那就用乙腈:水=90:10反沖。
『叄』 碳十八色譜柱能進水嗎
可以。不知道你說的「進水」是用水做流動相還是用水作為樣品,不過都是可以的。
C18是最常見的回反相色譜答柱。反相的色譜柱都是可以用水作為流動相的。
不過一般來說,至少要有10%的有機相,也就是流動相里最好加入至少10%的甲醇或者乙腈。也有色譜柱的廠家說可以耐受100%的純水相,不過如果用100%的水作為流動相,對色譜柱和的損傷有點大,會減少壽命。
樣品進水溶液就更沒有問題了,流動相那麼大體積的水溶液都可以進柱子,進樣不過幾微升的體積而已,當然也是可以的。
『肆』 為什麼HPLC中不可用純水洗色譜柱
一般液相柱的固定相C18、C8等鍵合相在水中容易發生水解從而與硅膠基質分離,在強酸專性或強鹼性下水解得更快,屬所以一般盡量不要用100%的水洗,可以用95%的水+5%甲醇或乙腈
如必須用100%的水來洗去某種鹽的話,時間不要長,不要斷流,並逐步過渡到有機相
『伍』 waters x bridge c18 能耐純水嗎
一般說來,衡量色譜柱的柱壓高低主要以甲醇為流動相時的柱壓為准。不同的液相內儀柱壓也容略有差異。
你所提供的色譜柱,一般情況下,以甲醇為流動相,流速為1ml/min時,柱壓在700-900psi,壓差在50psi以下均為正常。
10%乙腈我沒用過,30%乙腈的一般在1500psi左右,10%乙腈應該比它低。
純水可能損壞色譜柱,純乙腈可能堵塞單向閥,不建議使用上述流動相。
『陸』 在沖洗高效液相C18反相柱的時候,為什麼不能用純水
相C18色譜柱(即憎水柱子)如果用純水沖洗後,如果立即停泵則由於其憎水(疏水專)的緣故使得柱子內屬的水因而流失掉,長時間停泵使得柱子幹掉(變干),會造成柱子內固定相填料表面鍵合的硅烷基結構塌陷(也說成是失去支撐倒下),柱子就這樣報廢了。那麼一旦沖洗柱子用了純水相怎麼辦呢?誒!不要驚慌,只要你不停泵,上述情況不會立即發生,我們只要保證最後用有機相沖洗柱子,停泵後使柱子內留存的是有機相,就無大礙,
『柒』 c18可以完全走水相嗎
不可以。
C18柱子都不能用純水。只有帶有極性基團的C18固定相才可以。但是你可以用純水+C30固定相。
『捌』 為什麼普通C18色譜柱不能用純水沖洗
容易引起疏水坍塌,把強保留物質沖出來,會毀了柱子的,所以水相不能超過95%,最開始的梯度淋洗也是高
有機相
到高水相,但是不是純水相。
『玖』 菲羅門色譜柱 gemini c18能走100%的水嗎
可以。
但是對柱子損傷有點大,壽命會縮減很多。不光是菲羅門的,一般的色譜柱都會這樣。即便官方說是100%耐水的柱子,用純水相對於色譜柱也會有很大的傷害的。
記得用完之後一定要用甲醇或者乙腈封存。不然容易長微生物。
『拾』 純水是否能通過高效液相色譜柱
看是什麼柱子,有一些做糖的柱子就是要求純水做流動相的。但一般的C8或C18柱子不行,要求最少5%有機相,以防對色譜柱傷害